NYHETSAVIS NR. 2/2015

Transkript

1 TEST 099 NYHETSAVIS NR. 2/2015 Juni 2015 INNHOLD: Informasjon Åpningstider og avvikling av kveldspoliklinikk ved prøvetakningsenheten ved endokrinologisk poliklinikk, Aker. Det er viktig med kliniske opplysninger ved genanlyser. Holdbarhet av prøver til analysene insulin, c-peptid og proinsulin. Klinikk Analyse av steroidhormoner med LC-MS/MS. Analysenytt Ny kvantifiseringsgrense for testosteron fra 16/ Ny metode for bestemmelse av 11-deoksikortisol i serum fra 13/ Ny metode for bestemmelse av deoksikortikosteron (DOC) i serum fra 27/ Ny metode for bestemmelse av østradiol i serum fra 27/ Ny analyse for undersøkelse av 3-beta-hydroksisteroid dehydrogenase type II mangel fra 30/ Oppdatert oversikt over akkrediterte analyser foreligger på: Hormonlaboratoriet Klinikk for diagnostikk og intervensjon MBK Oslo universitetssykehus, Aker 1

2 INFORMASJON Åpningstider og avvikling av kveldspoliklinikk ved prøvetakningsenheten ved endokrinologisk poliklinikk, Aker. 1. Åpningstider sommer 2015: Laboratoriet og poliklinikken i bygg 98 holder stengt uke 29 ( fra 13. til 19. juli). De øvrige ukene holdes vanlig åpningstid som er mandag til torsdag og fredager fra Telefontid: kl og Kveldspoliklinikk avvikles: Fra 30. juni 2015 (uke 27) vil det ikke lenger være mulighet for å ta spesielle endokrinologiske prøver på tirsdagskveldene. Dette gjelder i hovedsak kortisol og ACTH. I Oslo området holder Fürst medisinsk Laboratorium kveldsåpent fra 10. august (uke 33): Fürst Majorstua til kl 20 tirsdager og Fürst Furuset til kl 20 på onsdager, og er behjelpelige med å ta kveldsprøver. Det er ønskelig med timebestilling og aktuelle pasienter kan ringe for dette. Det er viktig med kliniske opplysninger ved genanlyser. Gensekvensering er kostbare og tidkrevende analyser. Det bes om at rekvirenten oppgir kliniske opplysninger ved rekvirering da Hormonlaboratoriets leger vurderer indikasjonen for gentesten. Spesielt opplysninger om slektninger med samme tilstand er nyttig. Tidkrevende innhenting av relevant klinisk informasjon forsinker svartiden. Det må gis opplysninger fra rekvirenten om hvorvidt den aktuelle testen utføres i diagnostisk eller prediktiv hensikt. Bioteknologiloven krever genetisk veiledning ved prediktiv testing. Holdbarhet av prøver til analysene insulin, c-peptid og proinsulin. Hormonlaboratoriet har den siste tiden undersøkt holdbarheten av analyttene insulin, c-peptid og proinsulin. Konsentrasjonen av insulin, c-peptid og proinsulin synker fort ved henstand i gelglass ved romtemperatur. Vi anbefaler derfor å avpipettere serum etter sentrifugering. Dersom forsendelse av serum ikke skjer samme dag, må prøven oppbevares kjølig før forsendelse. KLINIKK Analyse av steroidhormoner med LC-MS/MS Hormonlaboratoriet har overført total 5 rutineanalyser av steroidhormoner (17-OHprogesteron, testosteron, androstendion, 11-deoksikortisol og 11- deoksikortikosteron) til LC-MS/MS metodikk. 2

3 Prøve Dataoppsamling LC LC-MS/MS står for væskekromatografi tandem massespektrometri. Dette er en teknikk der analytter i en blanding (prøven) blir separert på en kolonne og deretter detektert som ladete molekyler. Man utnytter analyttens vekt og ladning i deteksjonen og metoden er derfor svært spesifikk. LC-MS/MS kan settes opp som en multikomponent metode, der flere aktuelle analytter bestemmes fra en og samme prøve. Analyse av steroidhormoner er en slik multi-komponent metode, og fra et prøvevolum på 0,7 ml vil man kunne få svar på 13 forskjellige steroidhormoner. Det betyr at dersom man ønsker svar på 17-OH-progesteron, androstendion og testosteron, så holder det med én prøve på 0,7 ml. Tre av de 13 steroidhormonene er nye analytter: 18-hydroksikortikosteron, kortison og 21-deoksikortisol. Hormonlaboratoriet har ikke hatt metoder for påvisning av disse tidligere. For tre av de 13 steroidhormonene (DHEA, DHT, 17-hydroksipregnenolon) er ikke metoden helt ferdig utviklet. Vi jobber nå med å endre vår måte å se på svar på, fra enkeltsvar til et mer helhetlig bilde. I en senere utgave av nyhetsavisen vil vi følge opp med noen eksempler på prøvesvar der vi har vurdert flere analytter fra binyrer i sammenheng. I framtiden vil vi derfor tilby rekvirering av enkeltanalyser (utredning og oppfølging med en markør) eller paneler (til utredning av f. eks. binyrecancer). MS ANALYSENYTT Ny kvantifiseringsgrense for testosteron fra 16/ Kvantifiseringsgrensen for testosteron (analyseres med LC-MS/MS) er endret fra 0,2 nmol/l til 0,1 nmol/l. Ny metode for bestemmelse av 11-deoksikortisol i serum fra 13/ Ny metode er væskekromatografi-tandem massespektrometri (LC-MS/MS). Bruk av LC-MS/MS til kvantifisering av steroider er mer fleksibelt, spesifikt og som regel mer sensitivt enn immunoassays, samt at flere steroider kan påvises fra en enkelt prøveinjeksjon. 3

4 11-deoksikortisol separeres fra andre steroidhormoner og eventuelle interferenser med omvendt-fase kromatografi. Deteksjon med elektrospray-ms/ms. Forventede verdier: Barn (1-18 år): <2,3 nmol/l Voksne (> 18 år): <3,2 nmol/l Barn < 1år kan ha 11-deoksikortisol konsentrasjon opp mot 5,3 nmol/l. Prøvemateriale: 0,7 ml serum. Korrelasjon mot tidligere metode: r = 0,88 Regresjon mot tidligere metode: Y(LC-MS/MS) = 0,7 X(RIA) 0,6 Total analytisk variasjon: CV% = 5,3% (0,6 nmol/l); CV% =7,0% (2,2 nmol/l) Funksjonell sensitivitet: 0,3 nmol/l Ny metode for bestemmelse av deoksikortikosteron (DOC) i serum fra 27/ Ny metode er væskekromatografi-tandem massespektrometri (LC-MS/MS). Bruk av LC-MS/MS til kvantifisering av steroider er mer fleksibelt, spesifikt og som regel mer sensitivt enn immunoassays, samt at flere steroider kan påvises fra en enkelt prøveinjeksjon. Deoksikortikosteron (DOC) separeres fra andre steroidhormoner og eventuelle interferenser med omvendt-fase kromatografi. Deteksjon med elektrospray-ms/ms. Forventede verdier: Menn og kvinner: <0,41 nmol/l Barn <1år kan ha høyere DOC-konsentrasjon Prøvemateriale: 0,7 ml serum. Korrelasjon mot tidligere metode: r = 0,84 Regresjon mot tidligere metode: Y(LC-MS/MS) = 0,94 X(RIA) 0,07 Total analytisk variasjon: CV% = 19% (0,1 nmol/l); CV% =17% (1,4 nmol/l) Funksjonell sensitivitet: 0,07 nmol/l Ny metode for bestemmelse av østradiol i serum fra 27/ Den nye metoden er en kompetitiv kjemiluminesens immunoassay (CLIA) som utføres på Liaison analysemaskin fra DiaSorin Inc. 4

5 Klinisk relevans: Hos kvinner: Utredning av menstruasjonsforstyrrelser. Hos menn: Utredning av gynekomasti. Prøvemateriale: 0,5 ml serum. Regresjon og korrelasjon mot tidligere metode: y(liaison) = 0,92X (Immulite) 0,02 r = 0,95 Total assay variasjon: CV% < 11 for konsentrasjoner 0,13 nmol/l Funksjonell sensitivitet: 0,06 nmol/l Antiserum kryssreaksjon: - 17 α- Østradiol 0,17% - 17 β-østradiol 3-benzoate 1,4% - 17 β-østradiol 17-propionate 0,62% - 11 hydroksi-østradiol 1,8% - 4 hydroksi-østradiol 12,3% - Østron 1,4% - Østriol 0,15% - Progesterone ikke målbar - 17-hydroksi-progesterone ikke målbar - Testosteron ikke målbar - Androstendion ikke målbar - Kortisol ikke målbar - DHEA ikke målbar - Aldosterone ikke målbar - 11-deoksikortisol ikke målbar - Clomiphene ikke målbar - Tamoxifen ikke målbar For fullstendig liste over kryssreaksjoner testet av produsent se lenke: Referanseområde: Menn >16 år: 0,06-0,14 nmol/l Kvinner år: Follikkelfase: 0,09-0,21 nmol/l Midtsyklisk topp: 0,43-2,20 nmol/l Lutealfase: 0,27-1,05 nmol/l Kvinner 50 år: Postmenopausalt: <0,12 nmol/l Ny analyse for undersøkelse av 3-beta-hydroksisteroid dehydrogenase type II mangel fra 30/ På forespørsel har Hormonlaboratoriet satt opp sekvensering av HSD3B2-genet for undersøkelse av 3-beta-hydroksisteroid dehydrogenase type II mangel. 5

6 Gen:HSD3B2, hydroksi-delta-5-steroid dehydrogenase, 3 beta- og steroid deltaisomerase 2 locus 1p12. Inaktiverende mutasjoner i exon 1-4 med UTR og intron-exon overganger undersøkes. Mutasjon i HSD3B2 er en autosomal recessiv tilstand som gir en sjelden form (1-10%) av kongenital adrenal hyperplasi (CAH). Alle heterozygote bærere av mutasjoner i HSD3B2 er asymptomatiske. Genet utrykkes hovedsakelig i binyrer og gonader. 3-beta-hydroksisteroid dehydrogenase omdanner Pregnenolon,17α(OH)-pregnenolon, DHEA og Androstendion til Progesteron, 17α(OH)-progesteron, Androstenedion og Testosteron. Lutfallah C et al J Clin Endocrinol Metab Jun;87(6): har ved ACTH stimulering av genotype-normale pasienter funnet at følgende hormon-kriterier utelukker 3-beta HSD mangel: Barn med prematur pubarke: 17α(OH)-pregnenolon 72 nmol/l = <11 SD over gjennomsnittlig normalnivå. 17α(OH)-pregnenolon/ Kortisol-ratio 67 = < 5 SD over gjennomsnittlig normalratio. Simard et al Endocrine Reviews, June 2005, 26(4): angir ACTH stimulert 17α(OH)-pregnenolon 100 nmol/l som kriterium for diagnose av 3-beta hydroksisteroid dehydrogenase mangel. Det er ved sekvensering av HSD3B2 hittil ikke vært bekreftet late-onset (ikke-klassisk form) for 3-beta-hydroksisteroid dehydrogenase mangel. Hormonlaboratoriet tilbyr også sekvensering av Cyp11B1 og Cyp17A1 for utredning av 11- beta-hydroksilasemangel og 17-alfa-hydroksilasesvikt som er andre sjeldne årsaker til kongenital adrenal hyperplasi. Nyheter fra forskningen Publikasjoner siden sist Aass C, Norheim I, Eriksen EF, Thorsby PM, Pepaj M (2015). Single unit filter-aided method for fast proteomic analysis of tear fluid. Anal Biochem. 480:1-5. Postadresse: Hormonlaboratoriet, Oslo universitetssykehus HF, Postboks 4959 Nydalen, 0424 Oslo. Gateadresse: Bygg 23, Aker sykehus, Trondheimsveien 235 Telefon: , Telefaks: E-post: h-lab@h-lab.no Internett: Klinikk for diagnostikk og intervensjon MBK Oslo universitetssykehus, Aker 6