CELLESTOFFSKIFTE OG MILJØGIFT TEST UMP/EPP (Urinary Metabolic Profile and Environmental Pollutant) Testing av organiske syrer Å forstå testing av organiske syrer og testens kliniske bruk, kan gi deg den friheten du trenger for, på en lett forståelig måte, å nå frem til klienten med budskapet. Organiske syrer finnes vanligvis i urinen. Unormale verdier er funksjonelle markører for vitaminmangel, GI dysbiose, gifteksponering og nevroendokrin aktivitet. Testing av organiske syrer brukes for å avdekke grunnlaget for ernæringsterapi overfor mange sykdomstilstander, for eksempel humør/oppførsels problemer, kronisk tretthet, fibromyalgi, depresjon og metabolske forgiftninger. Når kroppen begynner å vise tegn til sykdom, har det allerede skjedd forandringer inne i cellen, og mange reaksjoner som er nødvendig for en sunn metabolisme, går allerede på kompromiss. Det er mange faktorer som kan bidra til denne nedbrytningen, og til symptomer på sykdom, bl.a. næringsstoff ubalanse, stress og dårlige livsstilsvaner. Gjennom testing av organiske syrer kan vi se stoffskiftet på cellenivå, hvor godt kroppen fungerer, og hvordan den møter kravene. Hva er en organisk syre? En organisk syre kalles også carboxyl syre, dvs. en syrebinding som består av en carbonyl gruppe av et carbonatom, to oksygen atomer og et hydrogenatom. Vanlige eksempler på carboxylsyre finner man i eddik (acetic acid = eddik syre) og sitrusfrukter (sitronsyre). Eksempler på organiske syrer som finnes i kroppen, er delvis nedbrutte stoffer fra nedbrytning av fett, karbohydrater og proteiner. Ideelt sett blir disse delvis nedbrutte stoffene, utnyttet fullt ut gjennom sentrale energistrømmer i mitokondriene, for dannelse av cellulær energi, ATP, til biosyntetiske reaksjoner. Disse strømmene i cellene katalyseres av enzymer som krever vitaminer eller mineraler som kofaktorer. Derfor vil et unormalt nivå av hver enkelt organisk syre
i urinen indikere en funksjonell mangel på næringsstoffet som er nødvendig for nøkkelenzymet, til dannelsen av den spesifikke organiske syren. Andre organiske syrer man kan finne i en urinprøve, inkluderer intermediære metabolitter fra katekolamin metabolismen, og bi-produkter fra unormal bakteriell metabolisme i mage/tarm. Sammen kan disse markørene gi verdifull informasjon om den cellulære helsestatus. For eksempel vil sistnevnte være viktig klinisk for alle klienter der man mistenker gastrointestinal dysbiose. Noen av faktorene som kan danne grunnlag for en slik tilstand er: tidligere bruk av antibiotika og andre medisiner, dårlige livsstils- og spisevaner, redusert fordøyelse, eller en underliggende sykdom som cøliaki og Chrons sykdom. Unormal overvekst av uheldige mikroorganismer dekker et bredt spekter av symptomer, p.g.a. frigjøringen av deres metabolske bi-produkter eller gifter over i blodbanen. Økte urinsyreverdier fra disse organismene indikerer behovet for å behandle en underliggende dysbiose, når man tar med klientens andre tegn og symptomer i betraktningen. US BioTek s Cellestoffskifte Profil Test, analyserer 40 analytter som er involvert i cellulære nøkkleloppgaver, inkludert energiproduksjon i mitokondriene (glykolyse, citronsyresyklus, fettsyreoksidasjon, ketondannelse), nevrotransmitter metabolisme, markører for vitaminmangel, og markører for avgiftning og dysbiose. En referanse guide er tilgjengelig for behandleren. Denne viser nøkkel næringsstoffer og klinisk vurdering av hver enkelt analytt som testes. Det er også inkludert et oversiktsark med Krebs Citronsyresyklus til hjelp i forklaring til pasienten. Ut over dette er hver enkelt laboratorie rapport gjort kundevennlig med en terapeutisk næringsstoff guide som angir anbefalte mengder næringstilskudd. I tillegg får pasienten en innkjøpsliste over nødvendige vitaminer og mineraler. Løsninger på stabilitets spørsmålet ved analysering av organiske syrer i urin Mark Newman, MS, Senior Chemist I lang tid har analysering av organiske syrer i urinen blitt utført på nyfydte i den hensikt å avdekke evt. medfødte stoffskifte feil. Fra et funksjonelt medisinsk perspektiv, er analysering av organiske syrer anerkjent som en essensiell test for å stadfeste den metabolske helsetilstanden hos store deler av befolkningen. Testing av organiske syrer gir en mengde informasjon om ernæringsstatus hos komplekse pasienter, bl.a.: Energiproduksjonsstatus i mitokondriene Vitamin / mineral insuffisiens Status på cellulær avgiftning
Nevrotransmitter metabolisme Bakteriell mage/tarm dysbiose Ved å bruke gasskromatografi sammen med masse spektrometer (GC-MS) kan denne enkle urin testen tillate målinger av en rekke organiske syrer; bi-produkter av den metabolske syklus på cellenivå. Derfor kan denne analysen være et veldig kostnadseffektivt verktøy som gir overblikk over mesteparten av pasientens cellulære helse. Dessverre er det noen få store utfordringer rundt denne analysen, hvor noen av dem kan medføre at man må gå på kompromiss med testresultatene. Dette blir diskutert i den følgende tekst. Prøvemateriale Flytende vs. Tørket En sammenlikning av metoder US BioTek har utviklet en innovativ innsamlingsteknikk av urinprøver, som er fullt på høyde, og bevarer prøvestabiliteten sammenliknet med vanlige flytende prøver. En kritisk vurdering av US BioTek s Dip'N Dry innsamlings strips ble utført av US BioTek. Ved å sammenlikne analytt verdier fra ny innsamlet urin med en urinprøve der det ble brukt US BioTek s Dip'N Dry metode, ble det registrert utrolige likheter, som det vises på diagrammet under. Analysering av organiske syrer med GC-MS gir et pålitelig resultat, som kan reproduseres og ermeget presist. Men problemet ligger i prøvematerialets stabilitet før det analyseres. Noen laboratorier bruker konserveringsmidler (vanligvis Thymol eller Ascorbinsyre) for å sikre analyttenes stabilitet i urinprøven. Dessverre har disse konserveringsmidlene bare en oppgave, nemlig å eliminere ødeleggende effekter av bakteriell vekst. Dette er et veldig kritisk tema, siden noen av de organiske syrene, som hippuric acid, kan ødelegges ved å fjerne bakterieveksten. Derimot vil konserveringsstoffer ikke på noen måte redusere ustabiliteten i forhold til kjemisk nedbrytning, noe som skjer uavhengig av bakteriell påvirkning. Ustabilitet på pyruvat og alfa-keto syre Betydelig degradering av disse ustabile organiske syrene ses typisk i analyser med flytende urin. Kjemisk nedbrytning i flytende urinprøver kan være varierende, uforutsigbar og dramatisk. US BioTek s interne splitt-test studier har avdekket betydelig kjemisk ustabilitet hos
disse organiske syrene. Når delte, flytende urinprøver ble sendt til to ledende konkurrenter, ble det oppdaget alarmerende resultater. To-2 urinprøver hadde for høye verdier av pyruvat og tre-3 alfa-keto syre: alfa-ketoisovalerat, alfa-ketoisocaproat, og alfa-keto-betamethylvalerat. Resultatene som ble hentet fra disse prøvene viste en degenerering på over 70 % for alfa-ketoisocaproat og total degenerasjon for alfaketoisovalerat i begge prøvene! Mens interne målinger bekreftet forhøyningen av analyttene, klarte ikke de to ledende laboratoriene, som brukte flytende urin, å fange opp disse forhøyningene på grunn av degenerasjon av prøvene før analysen. Pyruvat og alfa-keto-betamethylvalerat viste seg like ustabile. Ustabilitet på succinat Det er bare ca. 5 % av succinat i urin som er "fri. Det meste av succinat i urinen er i form av glucuronid konjugat. Succinat-glucuronid bindingen brytes lett, og kan gi en falsk økning av verdiene. I likhet med pyruvat og alfa-ketosyre, er succinat nivåene ustabile umiddelbart etter at urinprøven er samlet. Hvis urinprøven oppbevares i romtemperatur over en periode, eller settes i kjøleskap lenger enn noen timer, vil succinat verdiene øke signifikant. US BioTek s forskning har vist hvorfor. Bare ca. 5 % av succinat eksisterer i urinen i sin frie form (målet for analyser av organiske syrer). En reserve av succinat-glucuronid konjugat er også tilstede i urinen. Dessverre er succinat-glucuronid bindingen veldig sårbar, og kan derfor resultere i en falsk forhøyning av succinat verdiene i test rapporten. Den eneste måten å unngå at denne bindingen brytes i flytende urin, er å fryse urinprøven (og holde den frossen frem til analysering). Ironisk nok, vil fryse/tine prosessen bidra til problemet ved å øke mengden fri succinat i urinen med hele 20-40%. Det kommer klart frem at flytende urinprøver har signifikant kjemisk ustabilitetstematikk i forhold til testresultater, og gir i beste fall et noe suspekt svar med henblikk på klinisk bruk. Løsningen US BioTek's Dip'N Dry" US BioTek's Dip'N Dry innsamlingsstrips tilbyr presise og reproduserbare resultater. Organiske syrer er stabile i flere uker i det de er tørket og låst inne i Dip'N Dry innsamlingsstripsene. Succinat verdiene forblir stabile, og blir falskt forhøyede.de organiske syrene tapes ikke gjennom fordampning eller bakteriell degenerering. Ved en typisk urinprøvetakning, samler pasienten den første morgenurinen, og prøven blir enten frosset umiddelbart, eller sendt direkte til det utvalgte laboratorie. I løpet av
timer etter prøveinnsamling, kan konsentrasjonen av viktige syrer forandres p.g.a. kjemisk ustabilitet og nedbrytning. Hvis det var mulig å ta et "øyeblikksbilde"? av den ferske prøven, ville resultatet være mye mer troverdig. Heldigvis, finnes det nå en måte å gjøre akkurat det! US BioTek's revolusjonerende urin innsamlingsstrips, Dip'N Dry, er hurtige og enkle å bruke. Disse absorberende stripsene dyppes i urinen, lufttørkes, og sendes med posten i spesial designede poser for å sikre prøvens holdbarhet. For at analyttene i urinprøven skal brytes ned, kreves det at væske er tilstede. Ved å eliminere dette medium gjennom dehydrering, kan analyttene holde seg utrolig stabile i flere uker uten at de brytes ned. Bruken av urin innsamlingsstrips er en suksess, og er veldokumentert forskjellige forskergrupper. US BioTek's forskning har vist en stabilitet og reproduserbarhet som er mye bedre enn den fra flytende urin. Disse stripsene sikrer analyttenes stabilitet i over to-2 uker på ALLE de organiske syrene representert i US BioTek Urinary Metabolic Profile (Metabolsk stoffskifte profil). Bakteriell effekt og kjemisk ustabilitet er eliminert ved helt å tørke urinprøven på US BioTek's innovative innsamlingsstrips. Dette tillater en rask, enkel og presis test. Fordelene er klare: Høyere stabilitet på analyttene ved bruk av Dip'N Dry innsamlingsstrips. Enkel prosess og forsendelse via standard konvolutt. Ingen frysing av prøven eller ekspress frakt er nødvendig. En enkel, kostnadseffektiv og klinisk nyttig test! Referanser er tilgjengelig på forespørsel. Testeksempel UMP-EPB