VBC og uegnede prøver

Transkript

1 VBC og uegnede prøver Årsmøte i NFKC 9.febr. 213 Maj Liv Eide Avd. for patologi og med. gen., St. Olavs Hospital og Bioingeniørutd. ved HiST

2 VBC og andel uegnede cervixcytologiske prøver i England, Danmark og Norge Andel uegnede i England (1 % VBC) : 2,4 % Andel uegnede i Danmark 211 (ca 7 % VBC): 2,3 % Andel uegnede i Norge 211 ( ca 3 % VBC): 3,4 % totalt og 5,5 % (lab. med VBC i 212) Hvorfor øker andelen uegnede i Norge ved konvertering til VBC i motsetning til andre land?

3 La oss stupe under overflaten og finne mulige årsaker

4 Andel uegnede cervixprøver i England aldersgruppe i årene Helseregion (antall prøver) Gj. sn. andel uegnet ( %) Min maks ( %) North East (178192) SP 1,2,6 3,3 North West (433332) SP 2,7 1,9 3,5 Yorkshire & the Humber (379987) SP 1,3,6 1,7 East Midlands (254124) 6 % SP 1,5,9 1,6 West Midlands (312162) 65 % SP 2,9 1,4 4,7 East of England (374967) TP 2,5,7 3,7 rvical/cerv-scre-prog-eng /cerv-scre-progeng rep-v1.1.pdf Tabell 19 South Central (272274) 82 % TP 2,,8 2,8 South West (388897) TP 2,7 1,9 3,5 South East Coast (33773) TP 2,2,9 4,6 LONDON (64547) TP 3,4 1,3 6,8 Antall prøver totalt: ,4,6 6,8 Prøvetakere: Sykepleiere og almennleger Minimum plateepitel- vurderingskriteriene varierer: Noen bruker Bethesda (5 celler) andre 15 celler (SurePath) eller 1 celler (ThinPrep).

5 Region/lab VBC metode Andel uegnet % Andel uegnede cervixprøver i Danmark 211 (kun tatt med lab. med VBC prøver) Styregruppen for DKLS Årsrapport DKLS 211 Dansk Kvalitetsdatabase for Livmoderhalskræftscreening Region hovedstaden Herlev Hillerød Hvidovre Region Midt-Jylland Aarhus Holstebro Randers Skive Region Syd-Danmark Esbjerg Odense Sønderborg Vejle Konv./ ThinPrep ThinPrep 1,2 2,4,9,6 2, 2,3 1,6 2,3 1,6 2,2 2,2 3, 1,3 1,9 _dkls-årsrapport-211-dfs pdf Prøvetakere: Almennleger og gynekologer Minimum plateepitel: Bethesda 5 celler, men følger ikke Bethesda når det gjelder kontrollprøver uten syl/met.

6 Andelen uegnede celleprøver fordelt på årsak i Danmark (vbc lab) 211 Region/lab VBC metode Autolyse/ blødning For lite materiale Inflamm- asjon For lite plate Uten sylinder Teknisk dårlig Uegnet NOS Region hovedstaden Herlev Hillerød Hvidovre Konv./ 5,2 6,7 5,9 1, 19,6 15,1 37,5 16,3,2,3,7 38,2 49,9 12,3 29,5 19, 21,8 32,8 3,7 4,6 1,5 3,4 14, 1,9 9,7 49, Region Midt-Jylland Aarhus Holstebro Randers Skive,1,6 13,5 4,9 4,6 9,3 14,,2,2,1,4 3,1 32,2 32,6 31,8 17,1 51,2 58,7 18,2 54,6 63,4 2, 1,8 4,8 1,6,4 2,9 2,3 3,2 2,6 4,7 Region Syd-Danmark Esbjerg Odense Sønderborg Vejle ThinPrep ThinPrep,3,1,4,8 52,3 2,5 76,3 8,1 7,5 1,2 2,5 27,3 55, 1,7 89,8 2,1 8,8,3 1,5 18,5 1,1 42,3 1,7 8,2

7 ThinPrep vs SurePath Artikkel: Unsatisfactory rates vary between cervical cytology samples prepared using ThinPrep and SurePath platforms: a review and meta-analysis av Fontaine, Narine og Naugler 212 Review: : 14 studier med totalt 1,1 mill prøver:,3 % uegnede ThinPrep: 28 studier med totalt 1,1 mill prøver: 1,3 % uegnede Meta-analyse: 4 studier viste signifikant færre uegnede med SurePath NB: Ikke oversikt over hvilke kriterier som ble brukt til å vurdere cellularitet

8 Væskebasert cytologi (VBC) ThinPrep vs ThinPrep Pap Test BD SurePath Pap Test Endocervikal børste/spatel eller kombibørste. Børsten vispes i væsken umiddelbart etter prøvetaking og kastes deretter Væsken inneholder: 5 % metanol i en bufret løsning Filtermetode Børstehodet knekkes av etter prøvetaking og overføres til prøvebeholder Væsken inneholder: etanol (15-2%), < 1 %, isopropylalkohol, < 1 % metanol og,1 % formaldehyd Sentrifugeringsmetode

9 ThinPrep Pap Test prepareringsprosess SurePath ThinPrep Celleblanding: Spinning av cellemateriale blander celleprøven og løser opp blod, slim og debris Celleinnsamling: Væsken suges opp gjennom filtermembranen og ett lett vakuum på innsiden av filteret samler cellene på ytre del av filtermembranen. Celleoverføring: Filteret snus og presses lett mot objektglasset. Celler overføres pga den naturlige tiltrekkingen mellom cellene og glasset Resultat: Jevnt fordelte celler innenfor et område på 2 med mer Ulempe: Blod, slim, eksplorasjonskrem og leukocytter, konkurrerer med epitelcellene om plassen på filteret

10 BD SurePath væskebasert Pap test Cellesuspensjonen i prøvebeholder vortekses for å løsne cellene fra børstehodet trapped debris is removed enriched cell pellet Sentrifugal sedimentering i ulike skikt, som delvis fjerner ikke-diagnostisk debris og overflødige inflammatoriske celler ages/bloody_vial.gif ventional SurePath ThinPrep Etter sentrifugering overføres cellepelletten i reagensrøret til et kammer med et montert objektglass Automatisk farging vha en modifisert Pap farging i en PrepStain slide processor Resultat: Jevnt fordelte celler innenfor et område på 13 mm

11 Hvordan vurdere minimumsantallet plateepitelceller i Thinprep og? Retningslinjer i Bethesdaklassifikasjonen Det skal telles gjennomsnittsantall celler/synsfelt i minimum 1 synsfelt langs en diameter som går gjennom sentrum av prepareringen (ikke 1 påfølgende synsfelt eller 1 tilfeldige synsfelt i ringen) ThinPrep (diameter 2 mm) Minimum antall celler pr. synsfelt SurePath (diameter 13 mm) Minimum antall celler pr. synsfelt Totalt 5 celler 5 celler FN 2/ 1 x objektiv 5 118,3 FN 2/ 4 x objektiv 3,1 7,4 FN 22/ 1 x objektiv 6,5 143,2 FN 22/ 4 x objektiv 3,8 9 I England bruker mange nå minimumsantall plateepitelceller: 1 eller 15 celler

12 Årsaker til uegnede prøver med ThinPrep metoden Prøvetakingsfeil Ikke optimal overføring av prøvemateriale til prøvebeholder Blod, slim og eksplorasjonskrem konkurrer med cellene om plassen på filtermembranen Kriterier for cytologisk vurdering av minimumsantall plateepitel brukes feil

13 Prøvetaking fra cervix til cytologisk undersøkelse med ThinPrep Pap Test Endocervical børste/spatel protokoll Ta en prøve fra ektocervix ved å føre en plastikkspatel med den pekende enden inn i cervikalåpningen. Drei 36 i en retning, samtidig mens du trykker lett mot ektocervix. Skyll spatelen så raskt som mulig i beholderen med PreservCytløsningen ved å rotere spatelen kraftig i beholderen 1 ganger. Kast spatelen. Ta en prøve fra endocervix ved å bruke en endocervikal børste. Før børsten inn i cervikalåpningen til kun det nederste av børsten vises. Roter sakte 1/4 eller 1/2 omdreining i en retning. Cervex børste protokoll Cervexbrush Combi protokoll Skyll børsten så raskt som mulig i PreservCyt løsningen ved å rotere denne i løsningen 1 ganger mot beholderens vegg. Rist tilslutt børsten i væsken for å frigjøre alt materiale. Kast børsten umiddelbart. LA ALDRI BØRSTEN BLI STÅENDE I VÆSKEN FØR ROTERING, fordi dette vil føre til at cellematerialet fikseres fast til børsten. Ta en tilstrekkelig prøve fra ecto- og endocervix i en operasjon, ved å bruke en Cervex-Brush Combi. Før tuppen av børsten inn i cervikalkanalen til de korteste bustene på børsten får kontakt med ectocervix. Trykk lett, mens du roterer børsten i urviserretningen to ganger. Skyll børsten så raskt som mulig i beholderen med PreservCyt løsning Ved å trykke børsten mot bunnen 1 ganger slik at bustene går fra hverandre. Til slutt, roter børsten i væsken for å frigjøre alt materiale. Kast børsten umiddelbart. LA ALDRI BØRSTEN BLI STÅENDE I VÆSKEN, fordi dette vil føre til at cellematerialet fikseres fast til børsten.

14 Total % inadequate samples ABC % of total smears Effect of sample taker issues on inadequate rates in Thin prep cervical LBC samples Introduction Liquid Based Cytology (LBC) was introduced to the National Health Service Cervical Screening Programme (NHSCSP) with a benefit of reduction in inadequate rates. This was well documented (1)(2) and initially held true in the Gloucestershire laboratory (fig. 1) following the introduction of LBC in 26. Figure % 14.% 12.% 1.% 8.% 6.% 4.% 2.%.% GHNHSFT cervical cytology Inadequate rates Period Current situation Inadequate rates have increased both in this laboratory and across the region influenced by multiple factors. These can be divided as follows: Sample taker issues: Sample taker training Timing of sample collection Use of lubricants Laboratory issues Laboratory reprocessing rates Laboratory reporting consistency following SW regional policies (3) from 1st October 29, introduction of conditional inadequate category for samples failing sample collection quality assurance sample pot out of date, box 2 not completed, broom head in pot, taken too soon. Technology issues Concerns have risen with inadequate rates. Given the multi factorial nature of this issue and specific technology issues which are key to sample preparation, an assessment of Inadequate rates and patterns has been made and presented in this poster. Phil Bullock CSci MSc FIBMS Consultant Healthcare Scientist in Cytology Inad lower NHSCSP Inad upper NHSCSP CGH GRH Glos combined Inadequate rate data The Gloucestershire laboratory covers two screening programmes each of which contributes in the region of 4 samples per annum to the laboratory workload. These are identified as screening programme A and B to preserve confidentiality. Since 1st April 21 the laboratory has reported inadequate rates by surgery to both screening programmes on a monthly basis. Screening programme B has acted on this data and instituted a robust programme of visits to practices with high inadequate rates by the PCT sample taker lead whereas screening programme A has relied on historical mechanisms. Three factors have been selected for comparison between the two screening programmes and have been measured over the 5 month period April August 21 which corresponds with the introduction of practice visits in screening programme B. Figure 2. 6.% 5.% 4.% 3.% 2.% 1.%.% Inadequate rate by screening programme April May June July August Month Screening programme A Screening programme B Data analysis Overall inadequate rate (fig 2). Screening programme B has a mean overall inadequate rate % lower than programme A. Percentage of surgeries with inadequate rate of % Screening programme B has a mean rate of 26.28% lower than screening programme A. Percentage of surgeries with an inadequate rate higher than 1%. Screening programme A has a mean rate of % higher than screening programme B All 3 factors suggest improved performance by screening programme B over the period in question but in assessing the impact of sample taker issues underlying trends need to be eliminated. As historical mechanisms remained unchanged in screening programme A during this period any change in inadequate rate is likely to be due to the laboratory issues highlighted above. Over this period screening programme A showed a reduction of 17% whereas screening programme B showed an overall reduction of 35%. Conclusion As screening programme A showed a reduction of 17% this suggests an underlying laboratory trend over this period. To ascertain the effect of sample taker issues this must therefore be deducted from the trend of 35% giving a figure of 18% for screening programme B. It can therefore be deduced that at least 18% of the inadequate rate of 4.8% in April 21 can attributed to sample taker issues this equates besøk. to.86% additional inadequate samples. It is likely that of the balance of 82% of the rate some may still arise from sample taker issues that have yet to be addressed but laboratory issues such as reprocessing rates and technical issues will also have played a part. Addressing sample taker issues would therefore seem to offer an opportunity to reduce inadequate rates by at least 18%. References: 1.Evaluation of HPV/LBC Cervical Screening Pilot Studies Summary of Report to the Department of Health (Revised October 24) Appraisal Consultation Document: Guidance on the use of liquid-based cytology for cervical screening (Review of existing guidance number 5) - g.uk/guidance/index.jsp?action=article&r=true& o= Information and Guidance for Cervical Sample Takers - Best Practice - ource/view.aspx?rid=7219 Andel uegnede gikk kraftig ned ved implementering av VBC. Økning i andel uegnede etter noen år. -tiltak: Besøkte prøvetakere med høy andel uegnede. Kontrollgruppe uten 18 % nedgang i uegnede (fra 4,8 %) kunne tilskrives prøvetakers rolle

15 Uegnede TP avtrykk Blod, leukocytter, slim og eksplorasjonskrem konkurrer med cellene om plassen på filteret

16 ThinPrep Pap Test: Blodige prøver For sparsomt med plateepitelceller pga blod Preparering etter lysering av blod med eddiksyre Erfaring ved St.Olavs Hospital: 7-8 % blir representative etter lysering av blod

17 Blodige prøver vaskeprosedyre 1. 7 ml av cellesuspensjonen overføres til et 14 ml sentrifugeringsrør og sentrifugeres ved 3 rpm i 1 minutter 2. Hell av supernatanten 3. Tilsett 7 ml ThinPrep Cytolyt løsning til cellpelleten og vortex blandingen 4. Tilsett 7 ml 1% eddiksyre til blandingen 5. Sentrifuger raskt ved 3 rpm i 1 minuter 6. Hell av supernatanten 7. Tilsett cellepelletten til en ny PreservCyt beholder og preparer prøven i ThinPrep instrumentet

18 Andel uegnede cervixprøver i Norge LAB NR kun VBC Andel VBC ,6 2,6 3,9 2,6 4,1 11,3 3 2,5 2,9 3,3 2,9 5 2,8 2,9 2,8 7 3,2 2,9 3,3 3,1 1,3 8 5,5 4,2 5,1 8, 5,7 99,3 1 2,4 1,6 1, 1,2 1,5 33,2 11 1,2 1,2,9 1,3 12 1,8 3,3 2,3 4,5 7, 99,3 13 3,1 2,6 3,1 3,1 3, 87,6 14 2,1 2,7 3,3 2, 15 3,5 2,8 2,6 2,9 2, 6,8 16 2,2 1,9 2,3 3,2 2,1,4 17 2,1 1,4 1,3 1,1 18 2, 1,1 1,1 1,7 19 3,7 5,3 6,3 6,7 6,2 99,9 2 3,5 3,1 3,4 3,7 6,5 62,2 21 2,3 2,2 2,2 2,3 23 1,,8,9,9 1,4 6,2 26 2,3,8 1,5, Total 2,8 2,7 3, 3,4 5,5 3,2

19 Utvikling av andel uegnede ved St.Olavs Hospital Andel uegnet År Andel VBC % Andel uegnet % 1,83 2,74 5, 5,5 4,2 5,1 8, 5,7 NB. Andel uegnede i 24 (før Bethesda): 5,49 %

20 Alarmerende høy andel uegnede prøver i 211 (8, %) medførte tre tiltak: 1. Innlegg i Labnytt med info til rekvirenter 2. Byttet ut Cervexbrush med Cervexbrush Combi 3. Repeterte kriteriene for vurdering av nok plateepitelceller med bioingeniørene (cytodiagnostikerne) Resultat: Andel uegnede gikk ned fra 8, % til 5,7 %.

21 Oppsummering Andelen uegnede er høyere med ThinPrep enn SurePath og mange ThinPrep prøver må lages på nytt Prepareringsprosessen er enn så lenge mer arbeidskrevende med SurePath enn ThinPrep Ved bruk av ThinPrep er god kommunikasjon med prøvetaker essensielt. Kreftregistret kan gi statistikk over leger med høy andel uegnede som sender prøver til ditt laboratorium Hvordan kriteriene for cellularitet brukes varierer Hva skal minimumsantallet plateepitel være? 5, 1 eller 15?

22 Takk for oppmerksomheten