ALPHA JECT micro 1 PD

micro 1 PD En monovalent vaksine mot Pancreas Disease (PD) dokumentert å være effektiv, egnet og trygg å samstikke med andre PHARMAQ vaksiner.

INNHOLD 3 Pancreas Disease...4 micro 1 PD sikkerhet og effekt...6 Produktets egenskaper...14 Twinjection...15 Referanser...17 Din fiskehelsepartner... WE MAKE AQUACULTURE PROGRESS 2

DIN FISKE- HELSEPARTNER PHARMAQ, nå en del av Zoetis, er glade for å kunne tilby våre kunder bade i Norge og UK vår nye vaksine mot Pancreas Disease. Sykdommen er fortsatt en av våre aller største sykdomsutfordringer i begge markeder og påvirker laksen i store deler av sjøvannsfasen. Oppdretterne melder om signifikante økonomiske tap grunnet PD. Dette skyldes økt dødelighet, nedsatt vekst, nedklassing av fisk på slaktelinja i tillegg til at PD syk fisk også er mer utsatt for smitte av andre sykdommer og tåler håndtering og stress dårligere. micro 1 PD er et godt dokumentert produkt effektivt mot Pancreas Disease med en betydelig sikkerhetsprofil. PHARMAQ har et konstant fokus på å bringe nye innovative produkter på markedet som kan hjelpe kundene våre til en mer bærekraftig og lønnsom industi. Morten Nordstad President of PHARMAQ part of Zoetis

PANCREAS DISEASE (PD) Pancreas disease (PD) har vært den mest tapsbringende og ødeleggende virussykdommen i norsk, skotsk og irsk lakseoppdrett det siste tiår og har konsekvenser også for dyrevelferden. Sykdommen opptrer hos post smolt i hele sjøvannsfasen og gir dødelighet, dårlig almenntilstand (tap av appetitt og slapphet), redusert vekst og nedklassing ved slakt (McLoughlin et al., 2002). Infeksjonen gir nekroser i pancreas og alvorlig hjerte- og skjelettmuskel betennelse (Ferguson et al., 1986). I 2015 ble det registrert 137 PD utbrudd i Norge (Fiskehelserapporten). PD forårsakes av Salmonid Alphavirus (SAV) som man har funnet i ulike undergrupper. I Norge er SAV 3 dominerende sør for Hustadvika, mens SAV 2 er endemisk fra Hustavika og gjennom hele sør Trøndelag (Hjortaas et al., 2013). I Skotland har man funnet både SAV 1, 2, 4 og 5 som forårsaker sykdom, mens SAV 1, 4 og 6 har blitt funnet i Irland (Graham et al., 2012). SAV smitter horisontalt mellom syk fisk, og man tror at havstrømmer er den best betydningsfulle måten å spre smitte på mellom anleggene i sjø (Viljugrein et al., 2009). Intensiv overvåkning og kontroll er viktige verktøy for å reduserer konsekvensene av PD. Et eksempel er opprettelsen av SAV 3 og SAV 2 soner som myndighetene har pålagt næringen for å hindre ytterligere spredning av sykdommen. Andre tiltak er å innføre restriksjoner på transport av smolt og slaktefisk inn og ut av sonene, restriksjoner på kontakt med syk fisk og brakklegging av lokaliteter. I tillegg så er vaksinering et viktig verktøy for å forhindre smitte av PD virus. Nord for SAV 2 sonen så har myndighetene pålagt anlegg som får PD påvisning om enten å slakte fisken sin eller å transportere den inn i PD sonen (Fiskehelserapporten). 4

Typisk patologi i PD syk fisk. Venstre: En PD syk fisk sammenlignet med en frisk laks. Høyre: Typiske punktvise blødninger i indre organer. Fotograf: Trygve Poppe (PHARMAQ Analtytiq). Venstre: Rent PD virus- sett i elektronmikroskop negative stain. Fotograf: Trygve Eliassen (PHARMAQ). Høyre: Bildet viser en strukturell modell av E2 proteinet på den SAV varianten som er brukt i micro 1 PD. Det grønne området symboliserer en kjent nøytraliserende epitope. Modell: Professor Richard Eng Overvåkning og screening av PD er viktig for å kunne forebygge sykdommen best mulig.

MICRO 1 PD micro 1 PD er en monovalent vaksine til Atlantisk laks, Salmo salar L. Vaksinen inneholder inaktivert SPD virus og er dokumentert både for bruk alene og sammen med andre PHARMAQ vaksiner som inneholder inaktiverte antigen av Aeromonas salmonicida, Vibrio anguillarum O1 og O2a, Vibrio salmonicida, Moritella viscosa og Infectious Pancreas Necrosis Virus (IPNV). Vi startet utviklingen av vaksinen allerede i 2007, og vaksineformuleringen har blitt forbedret gjennom ekstensivt forskningsarbeide i årene etterpå. Effekten av vaksinen avhenger av konsentrasjone av antigen. Vi har optimalisert produktet med tanke på å redusere dødelighet, skader i hjerte og pancreas og hemmet vekst forårsaket av Pancreas Disease. micro 1 PD finnes i poser på 500 ml og 250 ml UVO med mulighet for samstikk. Dose volumet er 0.05 ml. micro 1 PD fikk innvilget markedsføringstillatelse (MA) i 2015 i alle markeder hvor vi søkte om det. En MA sikrer at produktet møter alle standarder satt av myndigheter med tanke på kvalitet, sikkerhet og effekt. 6

SIKKERHET Sikkerhetsprofilen til micro 1 PD, enten injisert alene eller sammen med micro 6 eller 2-2 er dokumentert gjennom en rekke studier gjennomført både i lab og i felt. Fisken vokser bra etter vaksinering og bivirkningsprofilen er generelt lav og innenfor normale verdier.

LOKALE BIVIRKNINGER Vi finner normale lokale bivirkninger i fisk som er samstukket med micro 1 PD og micro 6 som har gått under kommersielle forhold i to ulike feltforsøk (figur 1). Frekvens (%) 100 % 90 % 80 % 70 % 60 % 50 % 40 % 30 % 20 % 10 % 0 % Gjennomsnittlig bivirkningsscore: 3-5 måneder 1.7 8-10 måneder Slakt 1.5 1.5 0 1 2 3 4-6 Figur 1: Tallene som her er vist er en sammenslåing av alle score (n=394) samlet fra 2 ulike feltforsøk ved 3 ulike lokaliteter hvor fisk har blitt samstukket micro 6 og micro 1 PD. Melanisering og vaksinerester er veldig vanlig å finne i bukhulen hos fisk rett etter vaksinering. Lette sammenvoksninger (tilsvarende Speilberg score 1-2) er svært vanlig, moderate sammenvoksninger (tilsvarende Speilberg score 3) er vanlig, mens forekomst av svært alvorlige sammenvoksninger (tilsvarende Speilberg score 4 eller mer) er veldig skjeldne. 8

VEKST Fisk som er vaksinert med micro 1 PD i kombinasjon med micro 6 vokser like bra som fisk kun vaksinert med micro 6. 4000 3500 3000 2500 Periode 2 Slakt Gram 2000 1500 1000 500 Utsett 0 micro 6+ micro 1 PD micro 6 micro 6+ micro 1 PD micro 6 micro 6+ micro 1 PD micro 6 Figur 2: Vekt (n=100 per gruppe) ble i et feltforsøk målt 3 ganger i produksjonssyklusen. Atlantisk laks ble enten vaksinert med ALPHA JECT micro 6 i kombinasjone med micro 1 PD eller alene. Fisk fra begge gruppene gikk i samme merd under hele forsøket. Vi fant ingen forskjeller i vekst mellom gruppene på noen av tidspunktene. I andre forsøk hvor vi har sett på vekst rett etter vaksinering (6-10 uker) finner vi heller ingen forskjeller mellom gruppene.

EFFEKT Sammensetningen av micro 1 PD har blitt optimalisert for å sikre best mulig effekt av produktet. Å teste ulike vaksineprototyper i smitteforsøk i lab med hensikt å etterape et PD utbrudd i felt har vært en viktig del av dette arbeidet. Likevel er den ultimate testen for en vaksine hvordan den beskytter fisken under reelle forhold i felt. Vi har testet micro 1 PD i flere feltforsøk og vaksinen viser seg å gi god effekt. micro 1 PD gir dokumentert lavere dødelighet, mindre skader i pancreas og -hjerte og mindre vekttap under PD utbrudd både når vaksinen er gitt alene og i kombinasjon med ALPHA JECT micro 6. Visa versa påvirker heller ikke ALPHA JECT micro 1 PD effekten av micro 6. SMITTEMODELL To forskjellige PD smittemodeller hos Atlantisk laks har blitt brukt i utviklingen av ALPHA JECT micro 1 PD. Å administrere virus til fisken gjennom injeksjon (I.P.) sikrer en koordinert og forutsigbar utvikling av sykdom i fiskegruppa, hvor man får typiske kliniske tegn på sykdom og høy dødelighet i den uvaksinerte kontrollguppen. På den annen side så representerer denne måten å administrere virus på en unaturlig smittevei sammenlignet med hvordan dette foregår i naturen. Fisk som har fått I.P. smitte og deretter satt i samme tank som usmitta fisk (cohabitant smittemodell) produserer virus og vil gi resten av fisken en vannbåren smitte. Dette representerer en mer naturlig måte for fisken å bli smittet på. I kontrast til I.P. smittemodellen så får man sjelden høy dødelighet i cohabitant smittemodellene. Men sammenligning av kliniske tegn hos fisk fra de to ulike smittemodellene viser at de er høyst korrelert. Begge modeller klarer å skille ulike vaksiner med ulik grad av beskyttelse, og effekten av micro 1 PD har blitt bekreftet i begge smittemodellene (Karlsen et al., 2012). 10

REDUSERT DØDELIGHET OG LAVERE FOREKOMST AV VIRUS I FISK Vaksinering av laks med micro 1 PD alene eller i kombinasjon med ALPHA JECT micro 6 gir signifikant lavere dødelighet og lavere forekomst av virus positiv fisk og skader i hjerte og pancreas sammenlignet med kontrollfisk (figur 3). 100 % 100 % 90 % 90 % Forekomst av viralt RNA (%) 80 % 70 % 60 % 50 % 40 % 30 % 20 % Akkumulert dødelighet (%) 80 % 70 % 60 % 50 % 40 % 30 % 20 % 10 % 10 % 0 % 3 4 5 0 % 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 Uker etter smitte Dager etter smitte 1,8 1,6 micro 1 PD Adjuvant PBS Histopatologisk score 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 3 4 5 Figur 3: Tre grupper av Atlantisk laks (38g, n=40 per gruppe per tank) ble holdt i ferskvann på 12 C. Fisken ble så vaksinert enten med micro 1 PD, en vaksine uten antigen (kun adjuvant) eller PBS. Fisken ble så overført til sjø seks uker etter vaksinering og ble smittet enten med I.P.- eller cohabitant smitte. Hos den I.P. smitta fisken ble det registrert dødelighet, mens hos den cohabitant smitta fisken ble det sjekka for virusmengde i fisken (PCR) eller ved histopatologisk score, 3, 4 og 5 uker etter vaksinering (Karlsen et al., 2012). Uker etter smitte micro 1 PD Adjuvant PBS

CO-INJEKSJON Akkumulert dødelighet (%) 100 % 80 % 60 % 40 % 20 % micro 1 PD micro 1 PD + ALPHA JECT micro 6 Control 0 % 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Dager etter smitte Figur 4: God og spesifikk beskyttelse mot PD ble også funnet når micro 1 PD ble samstukket med micro 6. I dette studiet ble Atlantisk laks (n=35 per gruppe) vaksinert som vist i figuren. Fisken ble immunisert i 6 uker på 12oC og så smittet med PD (I.P.). Dødelighet ble registrert 3 uker etter smitte. 12

EFFEKT I FELT micro 1 PD gir god beskyttelse i felt minimum 15 måneder etter vaksinering (figur 5). % Gjennomsnittlig akkumulert dødelighet 14 12 10 8 6 4 2 0 11,7 Kontroll gruppe 6,7 micro 1 PD + micro 6 Figur 5: Effekten av micro 1 PD samstukket med micro 6 ble undersøkt i et stort feltforsøk i perioden 2011-13. 17 lokaliteter var med i forsøket, 16 av disse sør for Hustadvika i SAV 3 sonen og en lokalitet var nær Hustadvika i SAV 2 sonen. Kontrollgruppen var vaksinert med en komersielt tilgjengelig PD vaksine i kombinasjon med micro 6 (16 lokaliteter) eller Norvax Minova 6 (1 lokalitet). I testperioden var det tre av anleggene som hadde PD utbrudd og hadde data som kunne brukes til statistisk analyse. Dødeligheten hos fisk vaksinert med micro 1 PD var gjennomgående og signifikant lavere enn hos kontroll gruppen, noe som bekrefter studiene vi har fra lab. Det siste PD utbruddet som kom startet 15 måneder etter vaksinering, og kan støtte fakta om at vaksinen minimum har en varighet av beskyttelse på 15 måneder i felt.

MICRO 1 PD Vaksine til fisk. ATCvet-nr.: QI10A A01 INJEKSJONSVÆSKE, emulsjon til atlantisk laks: 1 dose (0,05 ml) inneh.: Formaldehydinaktivert kultur av Salmon pancreas disease virus (SPDV) stamme AL V405, RPS end 80%. Se for øvrig SPC. Egenskaper: Klassifisering: Inaktivert virusvaksine. Virkningsmekanisme: Stimulerer utvikling av aktiv immunitet mot pankreassykdom (PD). Indikasjoner: Atlantisk laks: Aktiv immunisering mot SPDV for å redusere dødelighet, lesjoner i hjerte og pankreas, samt for å redusere hemming av tilvekst forårsaket av PD. Immunitet oppnås innen 516 døgngrader etter vaksinering. Immunitetsvarighet: Minst 12 måneder etter vaksinering. Ved kliniske utbrudd av PD i felt er det dokumentert redusert dødelighet inntil 15 måneder etter vaksinering. Bivirkninger: Sammenvoksninger, melanisering og vaksinerester i bukhulen er svært vanlig etter vaksinering med oljebaserte vaksiner. Ved vaksinering alene eller i kombinasjon med en multivalent vaksine fra Pharmaq er milde sammenvoksninger (Speilberg score 1-2) svært vanlig, moderate sammenvoksninger (Speilberg score 3) vanlig, mens alvorlige sammenvoksninger (Speilberg score 4) er svært sjeldne. Forsiktighetsregler: Fisk med kliniske symptomer på sykdom skal ikke vaksineres. Vaksinering bør helst skje ved vanntemperaturer 15 C. Vaksinering ved vanntemperaturer <1 C eller >18 C er ikke anbefalt. Unngå vaksinering under smoltifisering. Særlige forhåndsregler for personer som administrerer preparatet, se pakningsvedlegget. Hvis personell ved uhell blir injisert med preparatet skal legehjelp straks søkes. med andre preparater. Det må avgjøres i det enkelte tilfelle om vaksinen skal brukes før eller etter andre preparater. Drektighet/Laktasjon: Vaksinasjon av stamfisk er ikke anbefalt, og skal bare gjøres i samsvar med nytte-/risikovurdering gjort av ansvarlig veterinær/ fiskehelsebiolog. Dosering: 0,05 ml pr. fisk med en minimumsvekt på 28 g. Administrering: Vaksinen tempereres langsomt til 15-20 C i romtemperatur og blandes godt før bruk. Vaksinen skal injiseres intraperitonealt i midtlinjen, ca. én bukfinnelengde foran basis av bukfinnen. Fisk skal bedøves før vaksinering. Det anbefales å sulte fisken i minst 48 timer før vaksinering. Overdosering/Forgiftning: Ingen unormale reaksjoner eller dødelighet er sett etter administrering av dobbel dose. Tilbakeholdelsestider: 0 døgngrader. Oppbevaring og holdbarhet: Oppbevares og transporteres nedkjølt (2-8 C). Skal ikke fryses. Beskyttes mot lys. Holdbarhet etter anbrudd av vaksinepose: 10 timer. Pakninger: Injeksjonsvæske: Til atlantisk laks: 250 ml og 500 ml pose Interaksjoner: Sikkerhets- og effektdata viser at vaksinen kan brukes sammen med Pharmaqs multivalente oljebaserte vaksiner som inneholder følgende antigener: Aeromonas salmonicida, Listonella anguillarum serotype O1 og O2a, Vibrio salmonicida, Moritella viscosa og infeksiøs pankreasnekrose virus (IPNV). Vaksinene gis ved intraperitoneal injeksjon på bedøvet fisk, enten samtidig (1 injeksjon) eller etter hverandre (2 injeksjoner). Ingen informasjon tilgjengelig vedrørende sikkerhet og effekt ved bruk sammen 14

TWINJECTION For å kunne møte kundenes behov om å samstikke micro 1 PD med en multivalent vaksine, har PHARMAQ testet ulike vaksinasjonssystemer for å trygt og sikkert kunne samstikke ulike vaksiner. En Twinjection prosedyre vil minimere håndtering og stress hos fisken og vil gi lavere operasjonelle kostnader, og vil derfor være bra både for fisken og oppdretteren. Det er åpenbart essensielt å være trygg på at fisken får riktig dose injisert. Systmet har derfor blitt testet på de vanligste vaksinasjonsmetodene brukt i dag og vil fortløpende bli testet på alle vaksinasjonsmetoder hvor det er ønsker om å bruke Twinjection. Vi vil lage spesifikke anbefalinger til hver maskin og pistol. PHARMAQ kan også tilby oss å ta ansvaret for hele vaksinajonsprosessen gjennom Nordland SettVaks om det er ønskelig. Uttesting av Twinjection teknologi.

TWINJECTION NÅ HAR DU ET VALG! Med Twinjection vil du ha en større grad av fleksibilitet til å kunne velge den vaksinekombinasjonen som passer best på ditt anlegg. Twinjection tillater to ulike vaksiner å bli injisert samtidig inn i fisken. Her visualisert med NFT 20 vaksinasjonmaskin og en manuell pistol fra Henke Sass Wolf (illustrasjon). 16

REFERANSER Ferguson HW, Roberts RJ, Richards RH, Rice DA (1986). Severe degenerative cardiomyopathy associated with pancreas disease in Atlantic salmon, Salmo salar L. Journal of Fish Diseases, 20, 95-98. Fiskehelserapporten; http://www.vetinst.no/rapporter-ogpublikasjoner/rapporter/2016/fiskehelserapporten-2015 Graham DA, Fringuelli E, Rowley HM, Cockerill D, Cox DI, Turnbull T, Rodger H, Morris D, Mc Loughlin MF (2012). Geographical distribution of salmonid alphavirus subtypes in marine farmed Atlantic salmon, Salmo salar L., in Scotland and Ireland. Journal of Fish Diseases, Oct; 35 (10):755-65 Aas-Eng A (2012). Efficacy and safety of an inactivated vaccine against Salmonid alphavirus (family Togaviridae). Vaccine 17;30 (38) :5688-94. McLoughlin MF, Nelson RN, McCormick JI, Rowley HM, Bryson DB. (2002). Clinical and histopathological features of naturally occurring pancreas disease in farmed Atlantic salmon, Salmo salar L. Journal of Fish Diseases 25: 33 43. Viljugrein H, Staalstrøm A, Molvaelr J, Urke HA and Jansen PA (2009). Integration of hydrodynamics into a statistical model on the spread of pancreas disease (PD) in salmon farming. Diseases of Aquatic Organisms Dec 22;88(1):35-44 Hjortaas MJ, Skjelstad HR, Taksdal T, Olsen AB, Johansen R, Bang- Jensen B, Ørpetveit I, Sindre H (2013). The first detections of subtype 2-related salmonid alphavirus (SAV2) in Atlantic salmon, Salmo salar L., in Norway. Journal of Fish Diseases Jan;36(1):71-4 Karlsen M, Tingbø T, Solbakk IT, Evensen, Ø, Furevik A and

18

WE MAKE AQUACULTURE PROGRESS

HEAD OFFICE Production facility PHARMAQ AS Skogmo Industriområde Industrivegen 50 7863 Overhalla, Norway Tel:+47 74 28 08 00 Fax:+47 74 28 08 01 OSLO OFFICE PHARMAQ AS Harbitzalléen 2A, 0275 Oslo, P.O.Box 267 Skøyen, N-0213 Oslo, Norway Tel: +47 23 29 85 00 Fax: :+47 23 29 85 01 customer.service@pharmaq.no Denne vaksinen er kun tilgjengelig på resept. 20