(12) Translation of european patent specification (11) NO/EP 2140006 B1 (19) NO NORWAY (51) Int Cl. C12N 15/53 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12P 7/64 (2006.01) Norwegian Industrial Property Office (21) Translation Published 2016.04.25 (80) Date of The European Patent Office Publication of the Granted Patent 2016.01.13 (86) European Application Nr. 08747327.8 (86) European Filing Date 2008.05.01 (87) The European Application s Publication Date 2010.01.06 (30) Priority 2007.05.03, US, 915733 P (84) Designated Contracting States: AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MT NL NO PL PT RO SE SI SK TR (73) Proprietor E. I. du Pont de Nemours and Company, Chestnut Run Plaza 974 Center Road P.O. Box 2915, Wilmington, DE 19805, US-USA (72) Inventor DAMUDE, Howard, Glenn, 4 Kenwick Road, HockessinDelaware 19707, US-USA ZHU, Quinn, Qun, 544 Revere Road, West ChesterPennsylvania 19382, US-USA (74) Agent or Attorney Tandbergs Patentkontor AS, Postboks 1570 Vika, 0118 OSLO, Norge (54) Title DELTA-5 DESATURASES AND THEIR USE IN MAKING POLYUNSATURATED FATTY ACIDS (56) References Cited: WO-A-98/46764 WO-A-2005/080578 WO-A-2005/118814 WO-A-2006/012325 WO-A-2007/136877 WO-A2-2007/136671
Enclosed is a translation of the patent claims in Norwegian. Please note that as per the Norwegian Patents Acts, section 66i the patent will receive protection in Norway only as far as there is agreement between the translation and the language of the application/patent granted at the EPO. In matters concerning the validity of the patent, language of the application/patent granted at the EPO will be used as the basis for the decision. The patent documents published by the EPO are available through Espacenet (http://worldwide.espacenet.com) or via the search engine on our website here: https://search.patentstyret.no/ NO/EP2140006
1 Patentkrav 5 10 15 20 25 30 1. En mikrobiell vertscelle som omfatter en vektor-konstruksjon som omfatter: (a) en nukleotidsekvens som koder for et polypeptid med Δ5-desaturaseaktivitet, hvor polypeptidet har minst 80 % aminosyresekven identitet, basert på Clustal V- metoden for sammenstilling, når sammenlignet med aminosyresekvensen som angitt i SEQ ID NO: 13; eller (b) en nukleotidsekvens som koder for et polypeptid med Δ5-desaturaseaktivitet, hvor nukleotidsekvensen har minst 80 % sekvensidentitet, basert på BLASTNmetoden for sammenstilling, sammenlignet med nukleotidsekvensen som angitt i SEQ ID NO: 12 eller SEQ ID NO: 25. 2. Mikrobiell vertscelle ifølge krav 1, hvor polypeptidet som har Δ5-desaturaseaktivitet omfatter aminosyresekvensen som angitt i SEQ ID NO: 13. 3. Mikrobiell vertscelle ifølge krav 1, hvor den mikrobielle vertscellen er valgt fra gruppen bestående av gjær, alger, bakterier, euglenoider, stramenopiler og sopp. 4. Mikrobiell vertscelle ifølge krav 3, hvor cellen er en sopp av slekten Mortierella. 5. Mikrobiell vertscelle ifølge krav 3, hvor cellen er stramenopiler valgt fra gruppen bestående av: Thraustochytrium og Schizochytrium. 6. Mikrobiell vertscelle ifølge krav 3, hvor cellen er en oljeaktig gjær. 7. Mikrobiell vertscelle ifølge krav 6, hvor den oljeholdige gjæren er valgt fra gruppen bestående av: Yarrowia, Candida, Rhodotorula, Rhodosporidium, Cryptococcus, Trichosporon og Lipomyces. 8. Mikrobiell vertscellen ifølge krav 7, hvor den oljeholdige gjæren er Yarrowia. 35 9. En fremgangsmåte for fremstilling av arakidonsyre, omfattende: a) å tilveiebringe en mikrobiell vertscelle som omfatter:
2 5 (i) en vektorkonstruksjon som omfatter et nukleotidmolekyl som koder for et Δ5-desaturasepolypeptid som har minst 80 % aminosyreidentitet i forhold til et polypeptid som har aminosyresekvensen som angitt i SEQ ID NO: 13, basert på Clustal V-metoden for sammenstilling; og, (ii) en kilde for dihomo-γ-linolensyre; 10 b) dyrking av den mikrobielle vertscellen fra trinn (a) under betingelser hvor nukleotidmolekylet som koder for Δ5-desaturasepolypeptidet blir uttrykt og dihomo-γ-linolensyren omdannes til arakidonsyre; og, c) eventuelt å gjenvinne arakidonsyren fra trinn (b). 10. En fremgangsmåte for fremstilling av eikosapentaensyre, omfattende: 15 20 25 a) å tilveiebringe en mikrobiell vertscelle som omfatter: (i) en vektorkonstruksjon som omfatter en nukleotid-molekyl som koder for et Δ5-desaturasepolypeptid som har minst 80 % aminosyreidentitet i forhold til et polypeptid som har aminosyresekvensen som angitt i SEQ ID NO: 13, basert på Clustal V-metoden for sammenstilling; og, (ii) en kilde for eikosatetraensyre; b) dyrking av den mikrobielle vertscellen fra trinn (a) under betingelser hvor nukleotidmolekylet som koder for Δ5-desaturasepolypeptidet uttrykkes og eikosatetraensyren omdannes til eikosapentaensyre; og, c) eventuelt å gjenvinne eikosapentaensyren i trinn (b). 30 35 11. Fremgangsmåten ifølge hvilket som helst av kravene 9 eller 10, hvor den mikrobielle vertscellen er en Yarrowia, og hvor Δ5-desaturasepolypeptidet omfatter SEQ ID NO: 13. 12. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 9 eller 10, hvor: a.) nukleotidmolekylet har nukleinsyresekvensen valgt fra gruppen bestående av SEQ ID NO: 12 og SEQ ID NO: 25; og, b.) vertscellen er Yarrowia lipolytica.
3 13. Et nukleinsyremolekyl som koder for Δ5-desaturase som angitt i SEQ ID NO: 26, der minst 174 kodoner av nukleinsyremolekylet er kodonoptimalisert for ekspresjon i Yarrowia.