EZ-PEC Microorganisms

Transkript

1 EZ-PEC Microorganisms EZ-PEC mikroorganismepreparater gir kvantitative prøvetakinger for antimikrobisk effektivitet og preserverende effisiensprøvetaking. BEREGNET BRUK EZ-PEC (Preservative Efficacy Challenge) Microorganisms er lyofiliserte, opptelte mikroorganismepreparater som anvendes i industrielle laboratorier. Bruken av disse mikroorganismepreparatene inkluderer kvantitative utfordringer for antimikrobal effektivitet og preserverende effisiensprøvetaking. Disse mikroorganismepreparatene kan spores til den amerikanske typekultursamlingen (ATCC ) eller andre samlinger av autentiske referansekulturer. OVERSIKT OG HISTORIKK Mange laboratorier har kvalitetskontrollprosedyrer som krever at det benyttes en spesifikk konsentrasjon for provokasjonstestingsstammen og provokasjonstestingsstammen kan bare gå igjennom subkulturdyrking et begrenset antall ganger for å hindre mutasjoner og vanskelig detekterbare endringer i atferd. Tradisjonelle metoder for å klargjøre provokasjonstestingsstammer ved spesifikke konsentrasjoner er tidkrevende og arbeidsintensive. Laboratoriene kjøper den bestemte stammen, dyrker den frem, tilbereder fortynningene, gjennomfører kolonitellinger for hver fortynning for å påvise den konsentrasjonen som skal brukes i provokasjonsprosedyren og tilbereder til sist de fortynningene av provokasjonsstammen som skal brukes. Dessuten gjøres det, for hvert trinn i dyrking av subkulturer, fenotypetesting (biokjemisk aktivitet og morfologiske undersøkelser) for å sikre at det ikke har oppstått mutasjoner eller skjedd endringer. EZ-PEC Microorganisms er et kostnadsbesparende alternativ i forhold til arbeidskrevende fortynningskolonitellingsprosedyrer. De krever ikke det utstyret som er nødvendig for å behandle og preservere forskjellige konsentrasjoner av provokasjonstestingsstammer i det lokale laboratoriet, og det gjøres rutinemessig kvalitetskontroll som dokumenterer at mutasjoner og endringer ikke har oppstått. PRINSIPP EZ-PEC Microorganisms inkorporerer en lyofiliseringsmetode som Obara og andre har skrevet om, der det anvendes et suspensjonsmedium som består av gelatin, skummet melk, askorbinsyre, og kull. Gelatinen fungerer som bærer for mikroorgansimen. Skummet melk, askorbinsyre og dekstrose beskytter mikroorganismen ved at celleveggen opprettholdes under frysetørring og lagring. Trekullet er med for å nøytralisere mulige toksiske substanser som dannes under lyofiliseringsprosessen. En proprietær teknologi produserer en forhåndsdefinert konsentrasjon av en lyofilisert mikroorganismepopulasjon. FORMULERINGSKOMPONENTER Det lyofiliserte preparatet består av: En kvantifisert mikroorganismepopulasjon Gelatin Skummet melk Askorbinsyre Dekstrose Trekull Hydratiseringsvæsken er en arbeidsoppløsning av en fosfatbuffer med ph 7,2. Væsken inneholder: Enbasisk kaliumfosfat Natriumhydroksid Deionisert vann Magnesiumklorid etter behov SPESIFIKASJONER OG YTELSE EZ-PEC Microorganisms kommer innpakket som et sett. Hvert sett består av: To (2) hetteglass som hvert inneholder ti (10) lyofiliserte pellets av en individuell mikroorganismestamme Ti (10) ampuller som inneholder 2 ml med hydraliseringsvæske; Detaljerte instruksjoner Testsertifikat UTGAVE 2008.FEB.13 Norsk Side 1 av 6

2 Ved å legge 0,5 or 1,0% av denne suspensjonen til produktet som skal utprøves vil resultatet ved den endelige prøvekonsentrasjon bli på mellom 1,0E+05 og 1,0E+06 CFU pr. ml av produktet. Dokumentasjonen av kvalitetskontrollen inneholder bl.a. et testsertifikat som bekrefter: Mikroorganismens identitet Sporbarheten til mikroorganismen mot en referansekultur At mikroorganismepreparatet er fire (4) dyrkningstrinn fra referansekulturen Den gjennomsnittlige testverdien for mikroorgansimepreparatet FORSIKTIGHETSREGLER OG BEGRENSINGER Disse produktene er kun til in-vitro bruk. Dette utstyret og videre oppvekst av disse mikroorganismene i dyrkingsmedier må anses som smittefarlig materiale. Dette utstyret inneholder mikroorganismer som under visse forutsetninger kan være sykdomsfrembringende. Det må benyttes riktig teknikk for å unngå eksponering mot og kontakt med enhver oppvekst av mikroorganismer. Det mikrobiologiske laboratoriet skal være korrekt utstyrt og ha de hjelpemidler som er nødvendige for å kunne motta, behandle, vedlikeholde, oppbevare og avhende smittefarlig materiale. Personalet i det mikrobiologiske laboratoriet skal ha den nødvendige opplæring, erfaring og kompetanse innenfor behandling, vedlikehold, oppbevaring og avhending av smittefarlig materiale. Avhending av smittefarlig materiale vil være regulert av regelverk og forvaltningsorganer. Alle laboratorier skal ha kjennskap til og overholde korrekt avhending av smittefarlig materiale. OPPBEVARING OG UTLØPSDATO Lagre EZ-PEC Microorganisms og hydratiseringsvæske ved 2 C til 8 C i originale, forseglede hetteglass. Ved korrekt oppbevaring vil de lyofiliserte mikroorganismene bibeholde spesifikasjonene og oppføre seg innenfor de angitte grenseverdiene frem til utløpsdatoen som er angitt på utstyrsetiketten. EZ-PEC Microorganisms skal ikke brukes hvis: De ikke har vært lagret på forskriftsmessig måte Det er tegn på at de har vært utsatt for overdreven varme eller fuktighet De har gått ut på dato NØDVENDIG MATERIALE SOM IKKE FØLGER MED Man trenger sterile pipetter for å inokulere materialet som skal prøves. PRODUKTGARANTI Disse produktene garanteres å tilfredsstille spesifikasjoner og ytelseskrav som er angitt og illustrert i produktvedleggene, bruksanvisningen og vedlagt litteratur. Uttrykt eller implisitt garanti er begrenset når: - Prosedyrene som er benyttet i laboratoriet ikke er i samsvar med trykte og illustrerte anvisninger og instruksjoner - Produktene benyttes til andre formål enn det som er beregnet bruk ifølge produktvedlegg, bruksanvisning og medfølgende litteratur BRUKSANVISNING A. Klargjøring av materialet 1. Den hydraliserende væsken og alle materialene som er nødvendig for prøveprosedyren og materialene som skal prøves, må være klare til bruk rett etter at hydraliseringen er blitt gjennomført. 2. Etter hydratisering av den lyofiliserte stammen MÅ provokasjonsinokuleringen(e) fullføres i løpet av tretti (30) minutter for å unngå endring i konsentrasjonen i provokasjonssuspensjonen. 3. Hydraliseringsvæsken MÅ varmes til en temperatur på mellom 34 C og 38 C før den brukes. B. Hydratisering 1. Ta glasset med de lyofiliserte kulene ut av kjølelagret (mellom 2 C og 8 C) og la den stå til den har nådd romtemperatur. 2. FØR den brukes skal hydraliserings- og fortynningsvæskene varmes opp til en temperatur på mellom 34 C og 38 C. 3. Ta ut TO (2) kuler og plasser dem i 2 ml glasset med hydraliseringsvæske med en steril pinsett. DET MÅ BENYTTES TO KULER 4. Gummiproppen settes umiddelbart på plass igjen, hetteglasset lukkes og resten av det lyofiliserte stoffet settes på plass i kjøleskap (2 C til 8 C). 5. Hetteglasset med hydratisert materiale lukkes og settes i en inkubator ved 34 C til 38 C i tretti (30) minutter, for at hydratisering kan fullføres helt. 6. Straks etter inkuberingen, skal man snurre rundt eller blande det hydraliserte materialet helt for å oppnå en homogen suspensjon og jevn fordeling av arbeidskulturstammen i den hydraliserte suspensjonen. Merknad:Kull er et nødvendig komponent i det lyofiliserte kulepreparatet. Etter at hydraliseringen er foretatt kan det skje at det fins synlige kullpartikler i suspensjonen. UTGAVE 2008.FEB.13 Norsk Side 2 av 6

3 C. Prøvetaking 1. Fortsett med prøveprosedyren i henhold til laboratoriets arbeidsprotokoll. For eksempel: For hvert 20,0 ml produkt som skal testes, fjernes det ønskete volumet (f.eks. 0,1 ml til 0,2 ml) av den godt blandete hydratiserte suspensjonen med en steril pipette og overføres til materialet som skal tested for antimikrobisk Effektivitetstesting. TEKNISKE MERKNADER Det lyofiliserte mikroorganismepreparatet, hydraliseringsvæsken, prosedyren og prosesstøtten skal være tilpasset følgende bruksområder: A. Prøvekulturen. Som det står I USP, skal sluttprøvekonsentrasjonen av den fortynnede mikroorganismesuspensjonen gi et konsentrasjonsresultat som ligger mellom 1,0E+05 og 1,0E+06 CFU pr. ml av produktet som blir utprøvd. B. Analysekontroll-volum. Som det står i USP må volumet av prøvemikroorganismen være mellom 0,5% og 1,0% av totalvolumet til preparatet som skal prøves. For eksempel, hvis det preparatet som skal prøves har et totalvolum på 20,0 ml, skal prøvevolumet være på mellom 0,1 ml og 0,2 ml. C. Eksempel på prøvekonsentrasjon. Middelanalyseverdien av EZ-PEC Microorganism er 3,5E+07 CFU/ml. Etter hydraliseringen er konsentrasjonen i mikroorganismesuspensjonen på 3,5E+06 CFU pr 0,1 ml. 0,2 ml av den hydraliserte suspensjonen (7,0E+06 CFU) som legges til 20,0 ml av materialet som skal prøves, resulterer i en endelig konsentrasjon på 3,5E+05 pr. ml. UTGAVE 2008.FEB.13 Norsk Side 3 av 6

4 FEILSØKING EZ-PEC Microorganism -preparater utsettes for en valideringstestprosedyre før de frigis fra kvalitetskontroll, for å sikre at hvert parti møter produktspesifikasjonene. Når de brukes i samsvar med instruksjonen i produktvedlegget, vil konsentrasjonen som følger hydratisering være mellom 2,0E+07 og 9,9E+07 CFU/ml. Ved å legge til 0,5 or 1,0% av denne suspensjonen til produktet som skal utprøves vil resultatet ved den endelige prøvekonsentrasjon bli på mellom 1,0E+05 og 1,0E+06 pr. ml av produktet. Hvis det observeres resultater utenfor dette området, skal følgende vurderes som mulige årsaker. All litteratur som refereres i denne seksjonen finnes på vårt nettsted på samt i vår Tekniske Brukerhåndbok. For å få en kopi av Teknisk Brukerhåndbok, kan du ringe BUGS(2847) eller sende oss en e-post på adressen info@mbl2000.com. PROBLEM MULIG ÅRSAK ANBEFALTE TILTAK LITE VEKSTUTBYTTE/ INTET VEKSTUTBYTTE 1) Bruk av feilaktig eller selektivt dyrkningsmedium. Ikke alle dyrkingsmedia støtter vekst av mikroorganismer. Vennligst konferer med mediaprodusenten om det er usikkert om mediet vil støtte mikroorganismevekst eller ikke. Hvis det brukes selektivt dyrkningsmedium kan dette hemme vekstutbytte av mikroorganismen. Se TIB.134 for ytterligere informasjon om bruk av selektive medier. 2) Uriktig inkubasjonstid, temperatur Påkrevde inkubasjonsperioder, temperaturer og atmosfæriske betingelser eller omgivelsesklima. er ikke de samme for alle mikroorganismer. Vennligst se TIB.081 for påkrevde krav for vekst for hver organisme. Kontroller også at inkubatorens termometre viser riktig avlesning. HØYT VEKSTUTBYTTE 3) Uriktig oppbevaring av hetteglassset. 4) Bruk senere enn tretti (30) minutter etter hydratiseringstrinnet. 1) Bruk senere enn tretti (30) minutter etter hydratiseringstrinnet. EZ-PEC Microorganisms må oppbevares ved 2 C til 8 C i originalhetteglassene. Desikatorpakken skal ikke fjernes. Ampullen skal gis mulighet til å nå romtemperatur før den åpnes. Hvis kalde ampuller åpnes, kan det danne seg kondens i glasset. Kombinasjonen av fukt og oksygen kan danne toksiske frie radikaler som kan redusere vekstutbyttet av lyofiliserte mikroorganismer. Som nevnt i produktvedlegget (Bruksanvisning, Avsnitt A), skal den hydratiserte mikroorganismesuspensjonen brukes innen tretti (30) minutter. Se TIB.160 for ytterligere informasjon. Som nevnt i produktvedlegget (Bruksanvisning, Avsnitt A), skal den hydratiserte mikroorganismesuspensjonen brukes innen tretti (30) minutter. Se TIB.160 for ytterligere informasjon. Hvis instruksene i dette produktvedlegget følges, og ingen av situasjonene nevnt ovenfor inntreffer, og produktutbyttet fremdeles er utenfor det nødvendige området, bes du kontakte vår tekniske avdeling (Technical Service Department) på BUGS(2847) eller epost indprdts@mbl2000.com for mer hjelp. UTGAVE 2008.FEB.13 Norsk Side 4 av 6

5 OPPRENSKNING AV SMITTEFARLIG MATERIALE Skulle det oppstå lekkasje eller søl fra utstyret ved et uhell med påfølgende oppvekst i agarmedia, vil følgende retningslinjer gjøre det enklere å foreta en opprenskning av det smittefarlige materialet. 1. Dataark for materialsikkerhet (MSDS) Alle MSDS-dokumenter for smittefarlig materiale skal arkiveres. MSDS-arkivet skal være tilgjengelig for alle ansatte. Alle ansatte skal ha kjennskap til hvor MSDS-arkivet befinner seg. 2. Verktøy for smittefarlig avfall Verktøy for smittefarlig avfall er tilgjengelig i handelen eller kan settes sammen av følgende utstyr: En litersflaske med en vandig bakteriedrepende oppløsning Et par latekshansker eller lateksfrie hansker til engangsbruk Pinsett En lukkbar sekk for smittefarlig avfall En rull eller pakke med papirhåndklær 3. Framgangsmåte Varsle ALLE som arbeider i umiddelbar nærhet av ulykkesstedet. IKKE forlat området uten følge (hvis du ikke er den eneste personen i området). Utpek en annen ansatt til å holde oppsyn med området og omdirigere ferdsel fra ulykkestedet. Etter at alle ansatte i umiddelbar nærhet er varslet, skal verktøyet for smittefarlig avfall hentes, og gå så UMIDDELBART tilbake til området. Ta på engangshanskene. Bruk pinsett og plukk opp så mye materiale som mulig og legg det forsiktig i sekken for smittefarlig avfall. Det tilsølte området dynkes med bakteriedrepende oppløsning. Hold det tilsølte området fuktig med bakteriedrepende oppløsning så lenge som angitt for den bakteriedrepende oppløsningen. Tørk opp med papirhåndklærne. Legg alle de brukte papirhåndklærne i sekken for smittefarlig avfall. Etter å ha gjort rent tar du hanskene forsiktig av og legger dem i sekken for smittefarlig avfall. Lukk igjen sekken for smittefarlig avfall. Sekken for smittefarlig avfall avhendes i samsvar med regelverket. NØKKELSYMBOLER Kode for produksjonsserie (Lot) Smittefare Biologisk risiko Katalognummer Advarsel, se medfølgende dokumentasjon Pass på, se bruksanvisningen Produsent Temperaturbegrensning Brukes innen UTGAVE 2008.FEB.13 Norsk Side 5 av 6

6 KVALITETSKONTROLL Dette produkt er utviklet, fremstilt og distribuert: I samsvar med FDAs pålegg: Forskrift for kvalitetssystem (QSR), 21CFR Part 820 I samsvar med deler av ISO 9001:2000 Kvalitetskontrollfunksjonene kan omfatte, men er ikke begrenset til: egenskaper for renhet og vekst morfologiske egenskaper biokjemisk aktivitet Analyseverdi Identiteten til mikroorganismepreparatet og sporbarhet mot en referansekultur Antall subkulturdyrkningstrinn som mikroorganismepreparatet er forflyttet fra referansekulturen Det enkelte laboratorium er ansvarlig for beslutningen om å foreta ytterligere kvalitetskontroller. REFERANSER Følgende referanser omtaler grunnlaget for lyofiliseringsmetoden som er brukt for disse mikroorganismepreparatene. 1. Y. Obara, S. Yamai, T. Nikkawa, Y. Shimoda og Y. Miyamoto J. Clin. Microbiol. 14: NETTSTED Besøk nettstedet vårt for å finne siste teknisk informasjon og produktinformasjon. ANERKJENNELSE MicroBioLogics, Inc. 217 Osseo Avenue North St. Cloud, MN USA Tlf Faks: E-post: info@mbl2000.com * Det ATCC-lisensierte deriverte symbolet, det ATCC-lisensierte deriverte ordmerket og ATCC-katalogmerkene er varemerker av ATCC. MicroBioLogics, Inc. har lisens på bruk av disse varemerkene og på salg av produkter som er utledet fra dyrkningskulturer fra ATCC. UTGAVE 2008.FEB.13 Norsk Side 6 av 6