LYFO DISK Microorganisms KWIK-STIK Microorganisms KWIK-STIK Plus Microorganisms

Transkript

1 LYFO DISK Microorganisms KWIK-STIK Microorganisms KWIK-STIK Plus Microorganisms BEREGNET BRUK LYFO DISK, KWIK-STIK og KWIK-STIK Plus Microorganisms er lyofiliserte referansekulturstammepreparater som inneholder en enkel stamme av en mikroorganisme. Disse mikroorganismepreparatene kan spores til the American Type Culture Collection (ATCC ) eller annen samling av autentiske referansekulturer. SAMMENDRAG OG BAKGRUNN Det er en absolutt nødvendighet at man har en pålitelig kilde for referansekulturstammer ved bruk i mikrobiologisk kvalitetssikringsprogrammer. Mikroorganismer med kjente og forutsigbare egenskaper anvendes i kvalitetskontroll og i opplærings- og kompetanseprogrammer. Lyofilisering er en veldokumentert metode som anbefales ved langsiktig oppbevaring av mikroorganismer. LYFO DISK, KWIK-STIK og KWIK-STIK Plus Microorganisms er lyofiliserte mikroorganismepreparater. Bruken av lyofiliserte materialer gir tilsvarende resultater som ved tradisjonelle metoder som brukes i tilberedning, lagring og vedlikehold av referansekultursamlinger. PRINSIPP LYFO DISK, KWIK-STIK og KWIK-STIK Plus Microorganisms inkorporerer en lyofiliseringsmetode som Obara og andre har skrevet om, der det anvendes et suspensjonsmedium som består av gelatin, skummet melk, askorbinsyre, og kull. Gelatinen fungerer som bæreren for mikroorganismen. Skummet melk, askorbinsyre og dekstrose beskytter mikroorganismen ved å bevare integriteten i celleveggen under frysetørringen og lagringen. Kullet er tatt med for å nøytralisere eventuelle toksiske stoffer som dannes under lyofiliseringsprosessen. BESTANDDELENE Hvert lyofilisert preparat består av: Mikroorganismene; Gelatin; Skummet melk; Askorbinsyre; Dekstrose; og Kull PRODUKTBESKRIVELSE A. LYFO DISK Microorganisms LYFO DISK Microorganisms kommer i et glass som kan tettes igjen etter at det er åpnet og som inneholder ti (10) lyofiliserte kuler fra en enkel mikroorganismestamme og et tørkemiddel for å unngå ugunstig oppsamling av fuktighet. I tillegg har LYFO DISK Microorganisms en annen egenskap. Hvert lyofilisert mikroorganismepreparat er subkultivert maksimum fire (4) ganger fra referansekulturen. B. KWIK-STIK Microorganisms Hvert KWIK-STIK -enhet inneholder en lyofilisert kule fra en enkel mikroorganismestamme, et lager med hydralisert væske og en inokuleringspensel. Hvert enhet er forseglet i en laminert pose som inneholder et tørkemiddel for å unngå ugunstig oppsamling av fuktighet. I tillegg har KWIK-STIK Microorganisms en annen egenskap. Hvert lyofilisert mikroorganismepreparat er subkultivert maksimum fire (4) ganger fra referansekulturen. C. KWIK-STIK Plus Microorganisms Innpakningen på KWIK-STIK Plus Microorganism er den samme som ved KWIK-STIK Microorganisms. I tillegg har KWIK-STIK Plus Microorganisms to andre egenskaper. Hvert lyofilisert mikroorganismepreparat er subkultivert maksimum to (2) ganger fra referansekulturen. En analyseattest (Certificate of Assay) er lagt ved og denne dokumenterer identiteten og sporbarheten ved mikroorganismepreparatet i forhold til referansekulturen, og subkultiveringen av mikroorganismepreparatet i forhold til referansekulturen. REVISION.2007.OCT.01 Norwegian Side 1 av 6

2 ADVARSLER OG BEGRENSINGER Disse produktene er kun ment til in vitro bruk. Dette utstyret og påfølgende vekst av disse mikroorganismene på et kulturmedium regnes som biologiske farlige materialer. Dette utstyret inneholder levedyktige mikroorganismer som under visse forhold kan frembringe sykdom. Passende metoder må brukes for å påse at disse ikke står ubeskyttet og at ikke noe kommer i kontakt med noen del av mikroorganismeveksten. Det mikrobiologiske laboratoriet må være utstyrt med, og ha fasilitetene for å motta, håndtere, vedlikeholde, lagre og fjerne biologiske farlige stoffer. Det mikrobiologiske personalet som bruker dette utstyret må ha opplæring i og erfaring med og må kunne vise kompetanse i å vedlikeholde, lagre og fjerne biologiske farlige stoffer. Det finnes instanser og regler som regulerer måten biologiske farlige stoffer skal fjernes på. Ethvert laboratorium må kjenne til og må fjerne biologiske farlige stoffer på riktig måte. LAGRING OG UTLØPSDATO Lagre LYFO DISK, KWIK-STIK og KWIK-STIK Plus Microorganisms ved en temperatur på mellom 2 C og 8 C i den opprinnelige, forseglede beholderen eller posen som inneholder et tørkemiddel. Hvis det lyofiliserte mikroorganismepreparatet lagres i henhold til anvisningen, vil de angitte spesifikasjonene gjelde og det vil fungere innen de grensene som er angitt, inntil utløpsdatoen. LYFO DISK, KWIK-STIK og KWIK-STIK Plus Microorganisms skal ikke brukes hvis: lagres på feil måte; finnes tegn på at det er utsatt for usedvanlig mye varme eller fuktighet; eller, er gått ut på dato. NØDVENDIG UTSYR SOM IKKE ER INKLUDERT LYFO DISK Microorganisms krever sterile glass og 0,5 ml steril Trypton-Soya agar, Brain-Heart-Infusion buljong, saltløsning, eller deionisert vann for å hydralisere det lyofiliserte preparatet. Sterile vattpinner og inokuleringsløkker trenges for å overføre det hydraliserte preparatet til en agarplate. LYFO DISK, KWIK-STIK og KWIK-STIK Plus Microorganisms krever ikke-selektive, nærings- eller anriket vekstagar for å optimalisere veksten og gjenoppretting. LYFO DISK, KWIK-STIK og KWIK-STIK Plus Microorganisms krever spesifikke inkubasjonstider og forhold for å optimalisere veksten og gjenopprettingen. Teknisk informasjonsbulletin (TIB.081) Recommended Growth Requirements gir en liste med anbefalte medier og inkubasjonskrav. Dette skrivet fins på følgende nettside: PRODUKTGARANTI Disse produktene er garantert å holde spesifikasjonene og ytelsen som beskrevet og illustrert i produktvedleggene, veiledningen og støttelitteratur. Garantien, enten utrykt eller underforstått, er begrenset når: prosedyrene som følges ved laboratoriet ikke stemmer overens med de beskrevne og illustrerte veiledningene og instrukser eller produktene brukes på andre måter enn slik de er tenkt brukt i følge produktvedleggene, instruksene eller støttelitteraturen. BRUKSANVISNING A. Prosedyren ved LYFO DISK Microorganisms 1. Ta ut LYFO DISK glasset, som har vært lagret ved en temperatur på mellom 2 C og 8 C, og la den stå uåpnet inntil den har nådd romtemperatur. 2. Ta aseptisk ut én gelatinkule fra glasset. Plasser kulen i 0,5 ml med steril Trypton-Soya agar, Brain-Heart-Infusion buljong, saltløsning eller deionisert vann. Tett STRAKS igjen glasset som inneholder tørkemiddel med gummipropp og skrulokk. Sett tilbake resten av mikroorganismekulene på lager med en temperatur på mellom 2 C og 8 C. 3. Emulgere og knus kulene med en steril pensel inntil kulepartiklene er samme størrelse og suspensjonen ser homogen ut. 4. Gjennombløt penselen STRAKS med den hydraliserte væsken og overfør materialet til et passende, ikke-selektivt, næringseller anriket agarmedium. Ved bruk av lett trykk, roteres penselen og et sirkulært område, på for eksempel 25 mm i diameter av agarmediet, inokuleres. Ved bruk av samme pensel eller steril løkke, strykes det inokulerte området ca. 10 til 20 ganger og etterpå strykes resten av agaroverflaten for isolering. 5. Inkuber STRAKS det inokulerte mediet ved en temperatur og ved forhold som passer for mikroorganismen. 6. Etter inkuberingen, velges representative velisolerte kolonier for indikerte overførsler. REVISION.2007.OCT.01 Norwegian Side 2 av 6

3 B. Prosedyrene ved KWIK-STIK og KWIK-STIK Plus Microorganism 1. Ta ut KWIK-STIK -enheten, som har vært lagret ved en temperatur på mellom 2 C og 8 C, og la posen stå uåpnet til den når romtemperatur. 2. Åpne opp posen og ta ut KWIK-STIK -enheten. 3. Ta bort den delen av etiketten som kan rives av på KWIK-STIK -enheten. Denne delen kan settes permanent på kvalitetskontrollføringene eller på primæragarmedieplaten for å merke det. 4. Legg merke til den nedre delen som har kuler og den øvre (lokket) delen som har en beholdning med hydraliseringsvæske. IKKE ta i fra hverandre enheten mens hydraliseringen pågår. 5. Få ut hydraliseringsvæsken ved å knuse ampullen. Dette gjøres ved å klype den midtre delen av ampullen i enhetens lokk. La hydraliseringsvæsken flyte gjennom penselskaftet og INN I den nedre delen av enheten der gelatinkulene befinner seg. 6. Hold enheten vertikalt med lokket øverst, og bank den nedre delen av enheten lett på benken for å få væsken til flyte bedre. 7. Klyp den nedre delen av enheten for å knuse og blande kulene i væsken inntil kulene har samme størrelse og suspensjonen ser homogen ut. 8. Gjennombløt penselen STRAKS med den hydraliserte væsken og overfør materialet til et passende, ikke-selektivt, næringseller anriket agarmedium. Ved bruk av lett trykk, roteres penselen og et sirkulært område, på for eksempel 25 mm i diameter av agarmediet, inokuleres. Ved bruk av samme pensel eller steril løkke, strykes det inokulerte området ca. 10 til 20 ganger og etterpå strykes resten av agaroverflaten for isolering. 9. Inkuber STRAKS det inokulerte mediet ved en temperatur og ved forhold som passer for mikroorganismen. 10. Etter inkuberingen, velges representative velisolerte kolonier for indikerte overførsler. 11. Gjenværende hydralisert materiale skal avhendes i overensstemmelse med laboratoriets regler for avhending av smittsomt materiale. REVISION.2007.OCT.01 Norwegian Side 3 av 6

4 Feilsøking Hvis du har vanskeligheter, kan du henvise til denne veiledningen og til Anbefalte vekstbetingelser TIB.081 PROBLEM MULIG ÅRSAK ANBEFALING 1) Hadde den lyofiliserte pelleten 1a) Lyofiliserte mikroorganismer skal holdes nedkjølt ved 2-8º C vært lagret på riktig måte? fra mottak. INGEN VEKST 2) Ble den lyofiliserte pelleten hydralisert på riktig måte? 2a) Ikke inkuber den hydraliserte suspensjonen. Bruk hydralyserte pelleter innen tretti (30) minutter. 2b) Vibrio & Shewanella arter skal hydralyseres i BHI, TSB, 0.85% saltvannsoppløsning eller Kwik-Stik væske. 3) Ble det brukt riktig dyrkningsmedium? 3a) Noen mikroorganismer krever spesielle dyrkningsmedier. Eksempel: * Bordetella pertussis viltrenge Bordet Gengou eller trekullsmedium. 3b) Anaerobe arter skal påbegynnes på anaerobe dyrkningsmedia eller preredusert agar. 3c) Det er best å påbegynne lyofiliserte mikroorganismer på ikke-selektiv agar. 4) Var mikroorganismen inkubert ved riktig temperatur? 4a) Noen mikroorganismer vil ikke vokse ved 35 grader. Eksempler: * Geobacillus stearothermophillus vil vokse ved 55 grader. * Enkelte gjærsopper foretrekker å vokse ved 25 eller 30 grader. 4b) Påse at termometeret er nøyaktig. 4c) Gjennomfør studier for å verifisere inkubatoruniformitet for å sikre uniform temperatur. 5) Var mikroorganismen inkubert ved riktige atmosfæriske betingelser? 5a) Campylobacter krever mikroaerofile betingelser. 5b) Bruk en anaerob indikator med anaerobe. KONTAMINASJON 6) Var mikroorganismen i inkubatoren lenge nok? 1) Ble den lyofiliserte mikroorganismen dyrket i vekstsuppe? 6a) Noen mikroorganismer bruker flere dager på å vokse. Eksempler: * Micromonas - 5 til 7 dager * Porphyromonas - 5 til 7 dager * Prevotella - 5 til 7 dager 1a) Kontaminanter multipliseres hurtig i vekstomgivelser. Det er best å påbegynne mikroorganismer i agar. UVENTET TESTRESULTATER 3) Var mikroorganismen gjennomgått tilstrekkelig mange subkulturer? 4) Var inokuleringen for liten? 5) Ble det brukt kontrollorganisme av riktig kvalitet? 3a) Gjør aldri tester på pelletvekst. 3b) Gjentatt subkulturdyrking kan frembringe mutasjoner. 3c) Bruk alltid frisk vekstsuppe. 4a) Kolonier av Bacteroides ureolyticus er svært små. Lag flere subkulturplater til testen. 5a) Bruk den mikroorganismen som er anbefalt av testprodusenten eller tilsvarende mikroorganisme. REVISION.2007.OCT.01 Norwegian Side 4 av 6

5 FJERNING AV BIOLOGISKE FARLIGE STOFFER Skulle lekkasje eller søl fra enheten eller påfølgende mikroorganisme vekst på agarmediet skje ved en feiltagelse, kan følgende retningslinjer trygt brukes når det gjelder materialer og prosedyrer ved fjerning av biologiske farlige stoffer. 1. HMS-datablad (HMSD) Dokumenter med alle HMSD som gjelder alle biologiske farlige stoffer må arkiveres. Disse HMSD må være tilgjengelige for alle de ansatte. Alle de ansatte må få vite hvor disse dokumentene fins. 2. Utstyr ved fjerning av biologiske farlige stoffer Utstyr som brukes ved fjerning av biologiske farlige stoffer kan kjøpes ferdig eller kan settes sammen på følgende måte. Én liters flaske med vannholdig bakteriedrepende væske; Ett par engangs- lateks og/eller lateksfrie hansker. Én pinsett; Én pose for biologiske farlige stoffer som kan lukkes igjen; og, Én stabel eller rull med papirhåndklær 3. Prosedyre Gi beskjed til ALLE som jobber i nærheten om hva som har skjedd. IKKE la området være uten oppsyn (unntatt hvis du er eneste person i området). Pek ut en annen ansatt som skal vokte over området og som holder andre borte fra området der ulykken skjedde. Etter at alle de ansatte som befinner seg i nærheten er blitt advart, henter man utstyret som brukes til fjerning av biologiske farlige stoffer og deretter går man STRAKS tilbake til ulykkesstedet. Ta på engangshanskene. Plukk opp så mye som mulige med pinsetten og legg materialet ned i posen som brukes til fjerning av biologiske farlige stoffer. Gjennombløt søleområdet med vannholdig bakteriedrepende væske. Hold søleområdet fuktig med vannholdig bakteriedrepende væske. Gjør dette så lenge som anvisningen på den bakteriedrepende væske som brukes tilsier. Tørk området med papirhåndklær. Legg alle de brukte papirhåndklærne i posen som brukes ved fjerning av biologiske farlige stoffer. Etter at fjerningen er ferdig, taes hanskene forsiktig av og plasseres i posen som brukes for biologiske farlige stoffer. Lukk igjen posen. Fjern posen i henhold til gjeldende regler og krav. SYMBOLNØKKEL Autorisert representant i EU Kode for produksjonsserie (Lot) Smittefare Biologisk risikomateriale CE Merking Katalognummer Forsiktig, se medfølgende dokumenter Pass på, se bruksanvisningen Medisinsk utstyr for in vitro-diagnostikk Produsent Termperaturbegrensning Brukes innen REVISION.2007.OCT.01 Norwegian Side 5 av 6

6 KVALITETSKONTROLL Dette produktet er utviklet, produsert og distribuert: i henhold til påbudene i FDA: Quality System Regulation; (QSR) 21CFR PArt 820;. gjeldende deler av ISO 9001:2000, samt CE Mark kravene Kvalitetskontrollen innbefatter, men er ikke begrenset til: renhet og vekstegenskaper; morfologiske egenskaper; biokjemisk aktivitet; identitet og sporbarhet ved mikroorganismepreparatet i forhold til et referansekultur; og, antall subkulturer mellom mikroorganismepreparat og referansekulturen. Ansvaret ved å ta en bestemmelse om ytterlig kvalitetskontroll ligger hos det enkelte laboratorium. REFERANSER Følgende referanse gir basisen for lyofiliseringsmetoden som brukes ved disse preparatene. 1. Y. Obara, S. Yamai, T. Nikkawa, Y. Shimoda, og Y. Miyamoto J. Clin. Microbiol. 14: Valget av referansestammekultur er bare én del av det hele ved utfordringer rundt utarbeidelsen av kvalitetskontrollprosedyrer og teknikker. Det er helt nødvendig at hvert enkelt laboratorium har retningslinjer man retter seg etter, Disse kan blant annet inkludere: 1. AOAC Compendium of Microbiological Methods. 2. Clinical Microbiology Procedure Handbook. 2. utg ASM. Washington, D.C. USA 3. FDA Bacteriological Analytical Manual. 4. Manual of Clinical Microbiology, 4de ASM, Washington, D.C. USA 5. Manual of Quality Control Procedures for Microbiology Laboratories, 3.utgave, CDC, Atlanta, GA, USA 6. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically. CLSI. 7. Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists. 8. Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests. CLSI. 9. Quality Assurance for Commercially Prepared Microbiological Culture Media. CLSI. 10. Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria. CLSI. 11. Standard Methods for the Examination of Dairy Products. 12. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. 13. US Pharmacopoeia 28 og National Formulary 23. NETTSIDE Besøk vår nettside når det gjelder aktuelle tekniske opplysninger og for å se hva som finnes av produkter. TILLEGGSOPPLYSNINGER MicroBioLogics, Inc 217 Osseo Avenue North St. Cloud, MN USA Telefon Faks E-post info@mbl2000.com MediMark Europe 11, rue Emile Zola B.P Grenoble Cedex 2, FRANKRIKE Telefon Faks E-post. info@medimark-europe.com * The ATCC Licensed Derivative Emblem, ATCC Licensed Derivative ordmerket og ATCC klatalogmerkene er varemerker som tilhører ATCC. MicroBioLogics, Inc. har lisens på å benytte disse varemerker og på selge produkter som er utledet fra ATCC cultures. REVISION.2007.OCT.01 Norwegian Side 6 av 6