Patentstyret Postboks 8160 Dept 0033 Oslo Patentavdelingen Dato 26. mars 2014 Deres ref. 200031183 Vår ref. E29031 TFU/MJU Norsk patentsøknad nr. 20031183 Vaksine - SmithKline Beecham Biologicals SA Det vises til Patentstyrets skriv av 2. oktober 2013. Endrede krav Det vedlegges et nytt kravsett som ønskes lagt til grunn for søknadens videre behandling. I dette kravsettet er krav 1 begrenset til en kombinasjon av PhtD og pneumolysin. Noen ekstra krav er inntatt for å spesifisere fremgangsmåten for detoksifisering. Basis for krav 2 finnes på side 8, linje 7-12. Basis for krav 3-4 finnes på side 7, linje 8-10 for fremgangsmåter for detoksifisering av pneumolysin. Basis for krav 5-7 finnes på side 9, linje 1 til side 10, linje 3. Basis for krav 9 finnes på side 11, linje 10-14. Kravene 7, 8 og 10 er omformulert til Swiss-type krav. Oppfinnelseshøyde Til støtte for oppfinnelseshøyde vil vi fremføre følgende argumenter: Søkeren ønsker å anvende to serier av forsøk for ytterligere å demonstrere at en kombinasjon av PhtD og pneumolysin virkelig er en meget effektiv kombinasjon av proteiner når den anvendes for å immunisere mot S. pneumoniae. For det første indikerer en musebeskyttelsesmodell at denne kombinasjonen av proteiner er mer effektiv enn hvert protein alene for beskyttelse av mus mot utfordring med S. pneumoniae. Beskyttelse indusert ved immunisering med Ply og PhtD Zacco Norway AS Haakon VII s gate 2 P.O. Box 2003 Vika NO-0125 Oslo, Norway Tel.: +47 22 91 04 00 Fax: +47 22 91 05 00 e-mail: info.norway@zacco.com www.zacco.com CVR No: NO 982 702 887 MVA European patent and trademark attorneys 1/5
Formålet med denne testen var å teste beskyttelsen som oppnås mot S. pneumoniae naso-pharyngeal kolonisering ved sub-optimale doser av PhtD, dply og kombinasjonen av begge proteiner. Grupper på 10 Balb/c hunnmus (4 uker gamle) ble immunisert intranasalt på dager 0, 14 og 28 med 10 μl av enten PhtD (0,6 μg), dply (0,2 μg), PhtD (0,6 μg) + dply (0,2 μg) eller PBS. Vaksineformuleringene administrert på dager 0 og 14 ble supplert med 0,2 μg av E. coli labilt toksin (LT) anvendt som adjuvant. Intet LT ble tilsatt til formuleringene administrert på dag 28. Mus ble utfordret ved dag 42 med 2x10 5 cfu av type 2 pneumococci (stamme D39). Nasale vaskinger ble samlet ved dag 6 etter utfordring og platet på kulturmedium for deteksjon av pneumococci. Resultatene ble uttrykt som prosentdel av kulturnegative mus og analysert med Fisher eksakt statistisk test. En signifikant (p<0,003) og forbedret beskyttelse ble indusert ved kombinasjonen av PhtD og Ply sammenlignet med hvert enkelt protein. Protection against NP carriage in mice % of culture negative mice 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 PhtD dply PhtD + dply adjuvant Data fra kliniske forsøk For det andre er kliniske data blitt tilgjengelige i den senere tid som i detalj viser det uventede resultatet at immunresponsen mot pneumolysin i immuniserte pasienter var større når pneumolysin ble kombinert med PhtD. Voksne pasienter ble immunisert med to doser av vaksiner inneholdende enten detoksifisert pneumolysin (dply) alene eller i kombinasjon med PhtD. Blodprøver ble tatt før immunisering og på dag 30 og dag 90 etter en eller to immuniseringer. Nivået av 2/5
anti-dply antistoffer ble bedømt og GMC er ble beregnet. To forskjellige formuleringer (F1 og F2) ble testet. Resultatene for de to formuleringene er vist i grafen nedenfor. Anti-dPLY GMC (LU/ml) Hver serie av tre søyler relaterer til GMC en av anti-ply antistoffer pre-immunisering, GMC av anti-ply antistoffer på dag 30 etter immunisering og GMC av anti-ply antistoffer på dag 90 etter to immuniseringer. En sammenligning av Ply F1 og Ply+PhtD F1 viser at immunresponsen mot Ply er større når Ply kombineres med PhtD på dag 30 og dag 90 prøver. Det samme gjelder den andre formuleringen når Ply F2 sammenlignes med Ply+PhtD F2. Siden alle fire sammenligninger viser en forøket anti-ply immunrespons når Ply kombineres med PhtD er det klart av PhtD øker anti-ply responsen. Nærværet av PhtD er i stand til å øke immunresponsen til den samme dosen av Ply i to forskjellige formuleringer og ved to forskjellige tidspunkter. 3/5
Oppfinnelseshøyde av krav 1 ved å anvende problem/løsnings-tilnærmelsen D1 kan anses som den nærmest liggende teknikkens stand siden den beskriver kombinasjoner av pneumokokkiske proteiner innbefattende pneumolysin. Den er rettet mot samme formål som krav 1, dvs. en kombinasjons immunogen sammensetning rettet mot S. pneumoniae. Forskjellen mellom D1 og krav 1 er addisjonen av PhtD til en kombinasjon omfattende pneumolysin. Det objektive tekniske problemet som skal løses er tilveiebringelse av en ytterligere kombinasjon av S. pneumoniae proteiner som kombineres for å fremstille en immunogen sammensetning med forbedret immunogenisitet. Løsningen på dette problemet som tilveiebringes ved krav 1 er en kombinasjon av PhtD og pneumolysin. Det ville ikke ha vært åpenbart for en fagperson med kjennskap til læren i D1 at kombinasjonen av pneumolysin og PhtD ville fremkalle en forbedret immunrespons. Læren i D1 er at noen kombinasjoner av protein (for eksempel PdB og PsaA) fremkalte bare det samme nivået av beskyttelse som de enkelte proteinene alene (se D1 figur 2). Derfor ville fagpersonen ikke forvente å generere en forbedret immunrespons ved å kombinere to proteiner valgt tilfeldig i en immunogen sammensetning. For å nå frem til kombinasjonen ifølge krav 1, ville fagpersonen måtte avgjøre at PdB skulle bevares i kombinasjonen fremfor de andre virulente faktorene nevnt i D1 (PspA og PsaA) og kombinere PdB med et av de fire proteinene omtalt i D2. Etterpåklokskap gjør det enklere å sette sammen denne kombinasjonen av proteiner, ved prioritetstidspunktet fantes det imidlertid ingen lære verken i D1 eller D2 som kunne oppfordre til denne doble seleksjonen. D1 konkluderer med å foreslå at «the protective efficacies of combinations including other recently characterized virulence-associated proteins of S. pneumonia, such as CbpA bør testes (D1, side 3032, høyre kolonne). En oversikt over pneumokokkiske virulensfaktorer fra juni 2001 (Jedrzejas 2001, D5) beskriver strukturen og funksjonen av kjente virulensfaktorer ved tidspunktet sammenfallende med søknaden. PspA, hyuronan, pnemolysin, autolysin, PsaA, kolinbindende protein A og neuraminidase er nevnt og følgelig kan disse være proteiner som D1 overveier ved denne uttalelsen. PhtD er ikke foreslått som et egnet protein. Tilsvarende beskriver ikke D2 at noen av proteinene nevnt er pneumokokkiske virulensfaktorer. D2 antyder heller ikke at PhtA, PhtB, PhtD eller PhtE bør kombineres med proteiner fra andre familier. Den nærmeste referansen til en kombinasjon i D2 er for blandinger av PhtX proteiner: A vaccine or vaccine composition, in accordance with the present invention may include one or more of the hereinabove described polypeptides or active fragments thereof. When employing more than one polypeptide of active fragment, such two of more polypeptides and/or active fragments may be used as a physical mixture or as a fusion of two or more polypeptide or active fragments D2 side 9, linjer 24-29. 4/5
Det finnes ingen antydninger om at ytterligere kombinasjoner, så som med pneumolysin, bør gjøres. Foreliggende søknad identifiserer PhtD som et utmerket immunogen for inkorporering i en immunogen sammensetning og foreslår den fordelaktige kombinasjonen av pneumolysin og PhtD. Denne kombinasjonen er ikke foreslått i noen representanter for den tidligere kjente teknikken. Spesielt finnes det ingen lære i den kjente teknikken som demonstrerer at Ply og PhtD kan kombineres for å fremstille en immunogen sammensetning med forbedret immunogenisitet. Et hovedbidrag ved foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe ytterligere resultater vedrørende immunogenisiteten av PhtD. Mens D2 tilveiebrakte resultater hvor Pht proteiner ble immunisert i mus som enkle rekombinante proteiner, utvider oppfinnelsen kunnskapen til immunresponsen av mennesker av forskjellige aldre overfor PhtD i sammenheng med den fullstendige S. pneumoniae bakterien. Dette er en kombinasjon av kapsulære polysakkarider og mange andre proteinkomponenter. Søknaden viser utmerkede resultater for PhtD i denne sammenheng som angitt ovenfor. For eksempel viser tabell 1 på side 21 en GMC på 19 μg/ml for PhtD, tilnærmet 10 ganger høyere enn det observert for NR1xR2, Sp91 og Ply (2,3-3,5 μg/ml), når eldre pasienter ble eksponert for S. pneumoniae. Søknaden demonstrerer derfor for første gang at PhtD er et protein som bør vurderes for anvendelse sammen med kjente virulensfaktorer i en immunogen sammensetning. Uten læren i søknaden ville det ikke ha vært åpenbart for fagpersonen å gjøre en kombinasjon av PhtD og pneumolysin, og selv uten fordelen av de etterinnsendte data mener vi derfor at oppfinnelseshøyde bør anerkjennes for krav 1. De etterinnsendte data demonstrerer ytterligere de forbedrede egenskapene av den pneumolysin- og PhtD- holdige immunogene sammensetningen som ikke er beskrevet i den kjente teknikken. På bakgrunn av de etterinnsendte data blir det følgelig enda klarere at krav 1 oppfyller kravet til oppfinnelseshøyde. Vi håper at Behandlende medlem finner å kunne dele dette synet, og at søknaden i neste omgang vil kunne klargjøres for patentmeddelelse. Med vennlig hilsen, Zacco Norway AS Vedlegg: Nye patentkrav 5/5