TSE status hos forskjellige arter

TSE: Oppdatering internasjonalt og nasjonalt. Diagnostiske utfordringer ved Nor98 og andre atypiske tilfeller. SYLVIE L. BENESTAD, TORFINN MOLDAL, PETTER HOPP OG BJØRN BRATBERG Veterinærinstituttet. TSE er en forkortelse for Transmissible Spongiform Encephalopathies og betegner en gruppe neurodegenerative sykdommer som har en lang inkubasjonstid og er alltid er fatale. En annen betegnelse for TSE er prionsykdommer. TSE status hos forskjellige arter Sykdommen hos sau og geit, skrapesyke eller scrapie, har eksistert hos sau i hele Europa i over 250 år. I dag er scrapie spredt over hele verden, unntatt New Zealand og Australia. Scrapie rammer stort sett dyr mellom 2 og 4 år gamle. Symptomene kan variere, men er ofte karakterisert av nervøse symptomer og kløe og ullavfall. Scrapie er eksperimentelt overførbar til andre småfe, storfe, primater, katter og mus. Bovin spongiform encefalopati (BSE, kugalskap) er det største problemet blant TSE med epidemien som rammet storfe i Storbritannia i 1986. Det er ennå ikke kjent om utgangspunktet for epidemien var en scrapie-infisert sau eller en sporadisk BSE ku. Det infiserte materialet ble spredt til et økende antall storfe smittet via kjøttbeinmel. I 1980-81 ble rutinene for produksjon av kjøttbeinmel endret i Storbritannia (endret fettekstraksjonsmetoder og bruk av lavere temperatur) slik at scrapiesmittestoff kan ha overlevd og spredt seg. Toppen av epidemien ble nådd i 1992 med over 35.000 tilfeller. Pr i dag er diagnosen stilt med sikkerhet hos over 182 000 dyr i Storbritannia mot omlag 6000 i resten av Europa og verden (Japan, Canada, Israel ). Antall BSE tilfeller er kraftig redusert i de siste årene, og dette er resultat av bekjempelsestiltak som kjøttbeinmelforbud og forbyggende tiltak SRM reglene som ble implementert overalt i Europa. I de siste 2 årene har Chronic wasting Disease (CWD) hos hjort blitt påvist hos et økende antall. CWD sprer seg lett fra dyr til dyr og rammer ville og tamme dyr. CWD er påvist i flere nye områder i USA og Canada, i delstater som Colorado, Nebraska og Wyoming i USA og naboregioner i Canada. CWD er foreløpig ikke diagnostisert hos europeiske hjortedyr. Transmissible Mink Encephalopathy (TME) har spredt seg i noen amerikanske gårder sannsynligvis på grunn av fôring med infiserte småfe- og i noen tilfeller, storfeskrotter. TME har vist seg å være eksperimentelt overførbar til sau geit og hamster.

1600 1400 1475 1200 1000 800 940 927 600 400 350 503 474 200 0 1 133 2 13 1 1 1 121 14 2 2 76 0 20 18 5 Tyskland Østerrike Belgia Canada Danemark Spania Finland Frankrike Hellas Irland Israel Italia Japan Liechtenstein Luxemburg Nederland Norge Polen Portugal Slovakia Slovenia Sveits Tschekkia 15 Figur 1. Kumulert antall BSE tilfeller per land utenfor UK (nov 2004). UK har totalt 182 716 tilfeller. BSE-agenset har krysset artsbarrieren ved å smitte katter og dyrehagedyr i kattefamilien (tiger, puma). Omtrent 100 katter er diagnostisert med Feline Spongiform Encephalopahy (FSE) i UK og noen få utenfor UK bl.a. et tilfelle i Norge i 1994. FSE er pr i dag sjeldent diagnostisert. I 1996 ble det kjent at det var høyst sannsynlig at unge mennesker som døde som følge av døde av en spesiell variant av Creutzfelt-Jakob sykdom (vcjs), hadde vært smittet via konsum av BSE-infisert storfeprodukter. Poding på mus med smittestoff fra BSE-storfe, som FSE katter, gir samme inkubasjonstid og samme lokalisering av hjernelesjoner (vakuoler) som poding med materiale fra de humane tilfellene av vcjs. TSE-sykdommene er dødelige og det finnes ingen behandling, og frykten for en massiv epidemi har siden det vært tilstede i Storbritannia og i resten av Europa. I dag er antallet vcjs offer mye lavere enn antatt, med i underkant av 160 dødsfall. I motsetning til BSE, er det ikke påvist sammenheng mellom forekomst av scrapie hos sau og CJS hos menneske. CJS forekommer med lik prevalens i New Zealand som aldri har hatt scrapie som i andre land hvor scrapie er vanlig. Hos menneske utgjør den sporadiske formen av Creutzfeldt-Jakob sjukdom (CJS) minst 85% av alle tilfeller av prionsjukdommer. Verden rundt er den årlige insidensen på ca ett tilfelle per million innbygger. CJD opptrer også i arvelig form

(10-15% av tilfellene) som Gerstmann-Sträussler-Scheinker (GSS) og fatal familiær insomnia (FFI). Disse arvelige formene er knyttet til mutasjoner i prionproteingenet. Iatrogen CJD resulterer hovedsakelig fra behandling med humant veksthormon eller etter corneatransplantasjon og transplantasjon av dura mater fra døde mennesker eller ved overføring via infiserte kirurgiske instrumenter. Den mest eksotiske prionsjukdommen hos menneske er imidlertid kuru. Kuru opptrådte hovedsakelig blant kvinner og barn på Papua New Guinea. Den oppstod sannsynligvis på grunn av at et tilfelle av sporadisk CJD ble videreført blant befolkningen via rituell kannibalisme (begravelsesritualene tilsa at kvinnene og barna skulle spise avdødes hjernen). Disse ritualene ble stoppet for ca 40 år siden, og de siste Kuru tilfellene opptrer nå, slik at man vet at inkubasjonstiden kunne være opp til 40 år. I dag er Kuru er omtrent utryddet. Situasjon i Norge I Norge er scrapie diagnostisert siden 1981 (Bratberg med fl. 2000, Hopp med fl. 2000), og prevalensen er lav, et resultat av strenge forvaltingsprosedyrer. BSE har aldri vært diagnostisert i landet, og Norge er en av de få europeiske land hvor risikoen for å ha BSE er vurdert som meget lav. Ingen tilfelle av vcjd er registrert i Norge. Etiologi (prionprotein) Vevsforandringer ved TSE er karakterisert av vakuolisering i hjernevev og celledød. Et eget kroppsprotein, prion protein (PrP), omdannes til en unormal form (scrapie prion protein PrPSc) og akkumuleres i nervesystemet. Fordi dette proteinet ser ut til å være tett assosiert med infektivitet ble ordet prion laget (INfectious PROtein) hvor i og o ble byttet om for å få ordet til å klinge bedre. Derfor er hele sykdomsgruppen som også kalt for prionsykdommer. Prionproteinet er hittil eneste markør for påvisning av sykdommen. Scrapiediagnostikk Inntil 1990-tallet var diagnosen basert på observasjon av kliniske symptomer og påvisning av forandringer i hjernen. Senere ble mer sensitive metoder utviklet for å påvise scrapie prionprotein (PrPSc) ved hjelp av immuntenikker ved immunhistokjemi, western blot og Elisa, i sentralnervesystemet og i noen tilfeller i lymfatisk vev. Immunologisk baserte metoder gjør det mulig å påvise sykdommen før dyr viser symptomer. Sensitivitet og spesifisitet er økt med tilgang til spesifikke antistoffer og nye og forbedrede metoder.

Diagnostiske utfordringer ved Nor98 og andre atypiske tilfeller. Det er vært kjent lenge at det finnes flere scrapiestammer hos sau. Den økende testsensitiviten resulterer i at flere tilfeller av atypiske scrapietilfeller er blitt diagnostisert. Den første atypiske scrapie type ble oppdaget i Norge i 1998 og ble derfor kalt Nor98. Nor98 skiller seg klart fra klassisk scrapie på mange områder. Forskjellene er summert i tabell 1. Tabell 1. Forskjeller mellom Nor98 og klassisk scrapie Klassisk type Nor98 type Alder 3 år 6 år Geografi Rogaland, Hordaland, Sogn Spredt og Fjordane, Nordland PrP genotyper Med VRQ AHQ/ARQ/ARR. Ikke hos VRQ Symptomer Kløe, ullavfall, nedstemthet, Ataxi, går i ring ataxi Histopatologi (vakuoler) Forandringer først i forlengede marg Forandringer i lillehjerne og storhjerne Epidemiologi Flere dyr i en flokk (avhengig Et dyr i en flokk av genotyper) Prionprotein 18Kd Ekstra 12Kd bånd Lymfeknuter Påvist PrPSc Ikke påvist PrPSc Diskusjon I oktober 2003 ble det kjent at Italia, Frankrike og Japan hadde påvist BSEtilfeller som avvek fra klassisk BSE. Det var første gang man snakket om muligheten om flere BSE-stammer. Det er fortsatt ukjent om de skyldes nyoppdagete BSE-stammer eller om de kunne representere naturlig oppstått sporadisk BSE. Muligheten for at BSE har smittet over til sau og geit er av stor interesse på grunn av at BSE-agenset, som representerer en potentiell fare for mennesker, er mye mer spredt i organismen til småfe enn storfe. En geit i Frankrike er nå mistenkt for BSE og resultatet av undersøkelsene av dette isolatet, bl.a. poding av transgene mus, er forventet i begynnelsen av 2005. Nor98 scrapietypen har diagnostiske utfordringer som gjør at Nor98 sannsynligvis ble oversett i mange år. Den er nå påvist i de fleste europeiske land, selv om den til meget nylig ble betraktet i noen land som mistenkelig men ikke bekreftet.

De atypiske scrapietilfellene rammer sauer med en PrP genotype som sjeldent er assosiert med klassisk scrapie (Benestad med fl. 2003, Buschmann med fl. 2004 a og b, Orge med fl. 2004, Gavier-Widen med fl. 2004, Onnasch med fl. 2004), og sauene som er mest mottakelige for klassisk scrapie ser ut til å være uaffiserte av Nor98 (Moum med fl. 2004). I noen land som Norge, Sverige og Portugal, hvor nesten alle scrapie tilfellene er av Nor98 type, er EU direktivene som bl.a. omfatter avlstiltak mot klassisk scrapie, svært lite egnet i forhold til Nor98 (Baylis 2004). Referanser Baylis M, McIntyre KM, 2004. Transmissible spongiform encephalopathies: Scrapie control under new strain. Nature, 432, 810-1. Benestad SL, Sarradin P, Thu B, Schönheit J, Tranulis MA og Bratberg B, 2003. Cases of scrapie with unusual features in Norway. Vet Rec, 153, 202-8. Bratberg B, Krogsrud J, Benestad SL og Thu B, 2000. Første verifiserte besetningsutbrudd av scrapie hos norskfødt sau. Nor Vet Tidsskr, 112, 376-80. Buschmann A, Luhken G, Schultz J, Erhardt G, Groschup MH, 2004. Neuronal accumulation of abnormal prion protein in sheep carrying a scrapie-resistant genotype (PrPARR/ARR). J Gen Virol, 85,2727-33. Buschmann A, Biacabe AG, Ziegler U, Bencsik A, Madec JY, Erhardt G, Luhken G, Baron T, Groschup MH, 2004. Atypical scrapie cases in Germany and France are identified by discrepant reaction patterns in BSE rapid tests. J Virol Methods, 117, 27-36. Gavier-Widen D, Nöremark M, Benestad S, Simmons M, Renström L, Bratberg B, Elvander M, af Segerstad CH, 2004. Recognition of the Nor98 variant of scrapie in the Swedish sheep population. J Vet Diagn Invest, 16, 562-7. Hopp P, Bratberg B og Ulvund MJ, 2000. Skrapesjuke hos sau i Norge; historikk og epidemiologi. Nor Vet Tidsskr, 112, 368-75. Moum T. Olsaker I, Hopp P, Moldal T, Valheim M, Moum T og Benestad SL, 2005. Polymorphisms at codons 141 and 154 in the ovine prion protein gene are associated with scrapie Nor98. J Gen Virol, 86, 231-5. Onnasch H, Gunn HM, Bradshaw BJ, Benestad SL, Bassett H, 2004. Two Irish cases of scrapie resembling Nor98. Vet Rec, 155, 636-7. Orge L, Galo A, Machado C, Lima C, Ochoa C, Silva J, Ramos M, Simas J, 2004. Identification of putative atypical scrapie in sheep in Portugal. J Gen Virol, 85, 3487-91.