(12) Translation of european patent specification (11) NO/EP 214002 B1 (19) NO NORWAY (1) Int Cl. C12N 1/11 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 1/113 (20.01) C12N 1/88 (2006.01) Norwegian Industrial Property Office (21) Translation Published 201.06.22 (80) Date of The European Patent Office Publication of the Granted Patent 201.01.07 (86) European Application Nr. 08828079.7 (86) European Filing Date 2008.03.26 (87) The European Application s Publication Date 20.01.20 (30) Priority 2007.03.30, US, 909074 P (84) Designated Contracting States: AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MT NL NO PL PT RO SE SI SK TR (73) Proprietor EnGeneIC Molecular Delivery Pty Ltd., Building 2, 2 Sirius Road Lane Cove West, Sydney NSW 2066, AU-Australia (72) Inventor BRAHMBHATT, Himanshu, 96 Prairie Vale RoadBossley Park, Sydney, NSW 2176, AU-Australia MACDIARMID, Jennifer, 8 Lombard StreetGlebe, Sydney, NSW 2037, AU-Australia HULF, Toby, 7 North Street, CastleCary BA7 7AU, GB-Storbritannia (74) Agent or Attorney Plougmann & Vingtoft, Postboks 03 Sentrum, 04 OSLO, Norge (4) Title Bakterielt avledede, intakte miniceller som omfatter plasmidfri funksjonell nukleinsyre for in vivo-levering til pattedyrceller (6) References Cited: WO-A-2004/022771 WO-A-2006/021894 YANAGIHARA KATSUNORI ET AL: "Effects of short interfering RNA against methicillin-resistant Staphylococcus aureus coagulase in vitro and in vivo." THE JOURNAL OF ANTIMICROBIAL CHEMOTHERAPY JAN 2006, vol. 7, no. 1, January 2006 (2006-01), pages 122-126, XP00218418 ISSN: 030-743 GELLER B L ET AL: "Antisense Phosphorodiamidate Morpholino Oligomer Inhibits Viability of Escherichia coli in Pure Culture and in Mouse Peritonitis" JOURNAL OF ANTIMICROBIAL CHEMOTHERAPY, OXFORD UNIVERSITY PRESS, GB, vol., 4 May 200 (200-0-04), pages 983-988, XP003008448 ISSN: 030-743 HARTH G ET AL: "Treatment of Mycobacterium tuberculosis with antisense oligonucleotides to glutamine synthetase mrna inhibits glutamine synthetase activity, formation of the poly-lglutamate/glutamine cell wall structure, and bacterial replication." PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA 4 JAN 2000, vol. 97, no. 1, 4 January 2000 (2000-01-04), pages 418-423, XP00218881 ISSN: 0027-8424 MACDIARMID JENNIFER A ET AL: "Reversal of drug resistance in cancer: Target delivery of sirna and drugs in vivo via biologically derived nanoparticles." PROCEEDINGS OF THE AMERICAN ASSOCIATION FOR CANCER RESEARCH ANNUAL MEETING, vol. 48, April 2007 (2007-04), page 1371, XP00137093 & 98TH ANNUAL MEETING OF THE AMERICAN- ASSOCIATION-FOR-CANCER-RESEARCH; LOS ANGELES, CA, USA; APRIL 14-18, 2007
ISSN: 0197-016X MACDIARMID JENNIFER A ET AL: "Bacterially derived 400 nm particles for encapsulation and cancer cell targeting of chemotherapeutics" CANCER CELL,, vol. 11, no., 1 May 2007 (2007-0-01), pages 431-44, XP00207684 MACDIARMID JENNIFER A ET AL: "Sequential treatment of drug-resistant tumors with targeted minicells containing sirna or a cytotoxic drug", NATURE BIOTECHNOLOGY, NATURE PUBLISHING GROUP, NEW YORK, NY, US, vol. 27, no. 7, 1 July 2009 (2009-07-01), pages 643-61, XP00289674, ISSN: 87-016, DOI:.38/NBT.147 Mark E. Davis ET AL: "Evidence of RNAi in humans from systemically administered sirna via targeted nanoparticles", Nature, vol. 464, no. 7291, 1 April 20 (20-04-1), pages 67-70, XP0094641, ISSN: 0028-0836, DOI:.38/nature0896
Enclosed is a translation of the patent claims in Norwegian. Please note that as per the Norwegian Patents Acts, section 66i the patent will receive protection in Norway only as far as there is agreement between the translation and the language of the application/patent granted at the EPO. In matters concerning the validity of the patent, language of the application/patent granted at the EPO will be used as the basis for the decision. The patent documents published by the EPO are available through Espacenet (http://worldwide.espacenet.com) or via the search engine on our website here: https://search.patentstyret.no/ NO/EP214002
Bakterielt avledede, intakte miniceller som omfatter plasmidfri funksjonell nukleinsyre for in vivo-levering til pattedyrceller 1 Patentkrav 1. Sammensetning omfattende (a) en flerhet av intakte, bakterielt avledede miniceller, hvor hver minicelle av nevnte flerhet omfatter regulatorisk RNA som er pakket i nevnte minicelle, og (b) en farmasøytisk akseptabel bærer derfor, hvor det er et fravær av nevnte miniceller av et konstrukt for in situ-uttrykk av nevnte regulatoriske RNA, hvor nevnte regulatoriske RNA er valgt fra gruppen bestående av sirna, mirna og shrna, og hvor nevnte flerhet inneholder en terapeutisk effektiv mengde av det nevnte regulatoriske RNA. 1 2. Sammensetning ifølge krav 1, hvor nevnte regulatoriske RNA er målrettet mot RNA-transkripsjonen som koder for et protein som bidrar til legemiddelresistens, apoptoseresistens eller neoplastisitet. 20 3. Blanding ifølge krav 1, hvor nevnte regulatoriske RNA er målrettet mot transkripsjonen av P-glykoprotein, MDR-2 eller MDR-3. 2 4. Sammensetning ifølge krav 1, hvor nevnte regulatoriske RNA er målrettet mot transkripsjonen av MRP2, BCR-ABL, STI-71 resistensassosiert protein, lungeresistensrelatert protein, syklooksygenase-2, nukleær faktor kappa, XRCC1, ERCC1, GSTP1, mutant β-tubulin eller en vekstfaktor. 30. Sammensetning ifølge krav 1, hvor nevnte regulatoriske RNA er målrettet mot en transkripsjon av Bcl-2, Bcl-XL, A1/Bfl 1, fokal adhesjonskinase eller p3- protein. 6. Sammensetning ifølge krav 1, hvor nevnte regulatoriske RNA er målrettet mot en transkripsjon av β-katenin, PKC-α, C-RAF, K-Ras, DP97 DEAD-boks RNAhelikase, cdk1, DNMT1, FLIP, C-Sfc, 3BPI, polycomb-gruppeprotein EZH2, ErbB1, HPV-16 E og E7, fortilin og MCI1P, KSP, DIP13α, MBD2, p21, KLF4,
2 tpt/tctp, SPK1 og SPK2, P300, PLK1, Trp3, Ras, ErbB1, VEGF eller BAG-1. 7. Sammensetning ifølge krav 1, videre omfattende et legemiddel. 8. Sammensetning ifølge krav 7, hvor nevnte regulatoriske RNA er målrettet mot RNA-transkripsjonen som koder for et protein som bidrar til resistens mot nevnte legemiddel. 9. Sammensetning ifølge krav 8, hvor legemiddelet er pakket i en intakt, bakterielt avledet minicelle.. Sammensetning ifølge krav 9, hvor nevnte regulatoriske RNA og nevnte legemiddel er pakket i den samme minicellen. 1 11. Sammensetning ifølge krav 1, videre omfattende en bispesifikk ligand. 20 12. Sammensetning ifølge krav 11, hvor nevnte bispesifikke ligand omfatter en første arm som bærer spesifisitet for en minicelle-overflatestruktur og en andre arm som bærer spesifisitet for en ikke-fagocyttisk pattedyrcelle-overflatereseptor. 13. Sammensetning ifølge krav 1 eller krav 12, hvor nevnte regulatoriske RNA er sirna. 2 14. Sammensetning ifølge krav 12, hvor pattedyrcelle-overflatereseptoren er i stand til å aktivere reseptormediert endocytose av nevnte minicelle. 1. Sammensetning ifølge krav 11, hvor nevnte ligand omfatter et bispesifikt antistoff eller antistoffragment. 30 16. Sammensetning ifølge krav 1, hvor sammensetningen inneholder mindre enn omtrent 1 kontaminerende morbakteriecelle per 9 miniceller. 3 17. Sammensetning ifølge krav 1, hvor sammensetningen inneholder mindre enn omtrent 1 kontaminerende morbakteriecelle pr miniceller.
3 18. Sammensetning ifølge krav 1, hvor sammensetningen inneholder mindre enn omtrent 1 kontaminerende morbakteriecelle pr 11 miniceller. 19. Sammensetning ifølge krav 1 for bruk som et legemiddel. 20. Sammensetning ifølge krav 19, hvor nevnte regulatoriske RNA er shrna. 21. Sammensetning ifølge krav 19, hvor nevnte regulatoriske RNA er sirna. 22. Sammensetning ifølge krav 19 for anvendelse i behandlingen av legemiddelresistens eller apoptoseresistens. 1 23. Sammensetning ifølge krav 19 for bruk ved behandling av kreft eller neoplastisitet, ytterligere omfattende en bispesifikk ligand, idet nevnte bispesifikke ligand omfatter en første arm som bærer spesifisitet for en minicelleoverflatestruktur og en andre arm som bærer spesifisitet for en ikke-fagocyttisk pattedyrcelle-overflatereseptor. 20 24. Sammensetning ifølge krav 23, hvor nevnte kreft er valgt fra gruppen bestående av magekreft, urinveiskreft, blærekreft, overialkreft, brystkreft, kreft i tykktarmen og kreft i tykktarmens slimhinne. 2 2. Sammensetning ifølge krav 19, hvor nevnte legemiddel er for anvendelse i kombinasjon med et legemiddel hvor nevnte regulatoriske RNA er målrettet mot transkripsjonen av et protein som bidrar til resistens overfor nevnte legemiddel. 26. Sammensetning ifølge krav 2, hvor legemiddelet er pakket i en intakt, bakterielt avledet minicelle. 30 27. Sammensetning ifølge krav 26, hvor nevnte regulatoriske RNA og nevnte legemiddel er pakket i den samme minicellen. 3 28. Fremgangsmåte for formulering av miniceller med sammensetningen ifølge krav 1, karakterisert ved ko-inkubasjon i buffer (A) av en flerhet av intakte, bakterielt avledede miniceller med (B) plasmidfri, regulatoriske RNA, for derved å
4 oppnå miniceller som inneholder nevnte regulatoriske RNA, hvor det regulatoriske RNA er valgt fra gruppen bestående av sirna, mirna og shrna. 29. Sammensetning ifølge krav 28, hvor nevnte regulatoriske RNA er shrna. 30. Sammensetning ifølge krav 28, hvor nevnte regulatoriske RNA er sirna. 31. Fremgangsmåte ifølge krav 29, hvor mengden av sirna som er til stede i nevnte miniceller som inneholder nevnte sirna er slik at miniceller rommer minst omtrent 1,3 µg sirna. 32. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 28 til 31, hvor inkubasjonen utføres i bufret saltløsning.