Rapport från genetisk övervakning av varg i Sverige 2003/2004

Rapport från genetisk övervakning av varg i Sverige 2003/2004 Av: Øystein Flagstad, Malin Johansson, Ceilia Wärdig, Anna-Karin Sundqvist og Hans Ellegren Evolutionsbiologisk Center Uppsala Universitet

BAKGRUNN Ulv i Norge og Sverige tilhører en felles bestand med utberedelse på tvers av riksgrensen. Hovedutberedelsen har siden 1980-tallet vært konsentrert til de sørskandinaviske skogtraktene i Värmlands og Dalarnas län i Sverige og i Hedmark fylke i Norge. Bestandsovervåkningen av ulv skjer derfor i nært samarbeid på tvers av landegrensene. Under tellingen vinteren 2004 ble bestanden estimert til å telle ca 100 individer (Wabakken et al. 2004). Hele bestanden kan føres tilbake til tre dyr, som alle var immigranter fra øst (Vila et al 2003). Nyere forskning har vist at det er mulig å identifisere individer basert på DNA isolert fra ekskrementer. Dette åpner opp for en ny metodisk tilnærming i bestandsovervåkningen, som kan supplere de tradisjonelle metodene basert på sporing og registrering av familiegrupper. Ved å samle inn ekskrementer fra de ulike revirene, kan man gjennom moderne DNA-teknologi kartlegge hvor mange individer som finnes i det angitte området og analysere slektskapet mellom de ulike individene. I denne rapporten vil vi redegjøre for analysen av materiale samlet inn i Sverige i 2003 og 2004. Vi vil legge vekt på antall ulike individer og slektskap mellom individer innenfor de ulike familiegruppene. METODIKK Sampling og laboratoriearbeid Totalt 180 prøver samlet inn i Västerbotten, Jämtland, Dalarna, Värmland, Väster- Götaland, Örebro, og Gävleborg i 2003 og 2004 ble sendt inn til analyse (Appendix 1). I tilfeller av vellykket ekstraksjon av ulvespesifikt kjerne-dna, har vi gjennomført genotyping på tvers av 19 mikrosatelittmarkører som følger: (c2001, c2006, c2010, c2017, c2054, c2079, c2088 and c2096 (Francisco et al. 1996), vwf (Shibuya et al. 1994), u109, u173, u225, u250 and u253 (Ostrander et al. 1993) and PEZ01, PEZ03, PEZ05, PEZ06 and PEZ12 (Perkin Elmer, Zoogen; FHCRC Dog Genome Project) Siden isolater fra ekskrementer som oftest har en meget lav DNA konsentrasjon er det vesentlig for metodens robusthet å kjøre et antall replikater for hver prøve. Basert på resultatene fra tidligere pilotstudier for bl.a. jerv, har vi valgt å legge følgende kriterier til grunn for robust genotyping. Et individ som er homozygot (dvs. har én genetisk variant) for et locus, må vise dette i tre uavhengige replikater for at dette skal aksepteres som et autentisk resultat. Et individ som er heterozygot (dvs. har to ulike genetiske varianter) for et locus, må vise et slikt mønster i minst to uavhengige replikater for at individet skal aksepteres som heterozygot for dette locuset. Dette betyr i klartekst at alle individuelle prøver må kjøres i minst 2-3 replikater for hvert locus. Dersom noe som helst tvil skulle ligge til grunn etter gjennomføring i henhold til disse kriteriene, er ytterligere replikater blitt gjennomført for de aktuelle prøvene. Alle prøver som gav ulvespesifikt kjerne-dna ble også kjønnsbestemt ved hjelp av to kjønnsbundne DNA-markører (en på X-kromosomet og en på Y-kromosomet). Tre uavhengige replikater ble kjørt for alle prøver ved kjønnsbestemmelsen. Etter endt mikrosatelittanalyse og kjønnsbestemmelse ble de genetiske profilene til alle individuelle prøver sammenlignet. Prøver som var identiske på tvers av alle loci samt representerte samme kjønn, ble klassifisert som representanter for ett og samme individ. 1

Dataanalyse - immigrasjon og slektskap mellom individer Den skandinaviske ulvebestanden er genetisk differensiert fra bestandene i Finland og Russland (Vila et al. 2003). Man kan dermed ved hjelp av hvert enkelt individs genotype bestemme sannsynligheten for om det har sin opprinnelse i Skandinavia eller om det er en immigrant fra øst. Vi har brukt metoden til Pritchard et al. (2001) for å bestemme opprinnelsen til hvert av de analyserte individene. Slektskap mellom individer ble bestemt ved hjelp av metoden beskrevet av Marshall et al. (1998). Informasjon om antatt status til de ulike prøvene (f.eks. antatt mor / antatt unge), ble brukt aktivt og testet ved hjelp av DNA-profilene til de ulike prøvene. RESULTATER OG DISKUSJON Suksessrate og genotypningskvalitet Det ble samlet inn totalt 180 prøver hvorav de fleste var spillningsprøver. Ti av totalt 166 spillningsprøver viste seg å komme fra en annen art enn ulv (8 rev, 2 hund). 88 av de resterende 156 prøvene var av god nok kvalitet til å genotypes for mikrosatelitter. Dette gir en suksessrate på 56 % for spillningsprøver, en tilsvarende suksessrate som vi har hatt på jerv siden vi startet opp denne formen for analyse i år 2000. Sju av 11 blodspor samlet fra snø (64 %) fungerte, men ingen av de to urinprøvene. Tabell 1 Suksessrate for alle innsamlede prøver Spillning Urin Blod Vävnad fungerer negativ Fungere negativ fungerer negativ fungerer negativ 88 r 78 0 r 2 7 4 1 0 56 % 0 % 64 % 100 % Kvaliteten på de genetiske analysene er jevnt over bra, og de fleste fungerende prøver har en lav feilprosent (<10 %), dvs at genotypningsfeil oppstår for mindre enn 10 % av de uavhengige replikatene. Med en lav feilprosent vil genotypningsfeil enkelt kunne detekteres gjennom replikerte analyser. For enkelte prøver er imidlertid feilprosenten en god del høyere, slik at vi totalt ender opp med en feilprosent på 20,9 %. Den største andelen av genotypningsfeilene er såkalte allelic dropouts [dvs. genotypningsfeil der kun det ene av to alleler (genetiske varianter) detekteres i analysen]. En høy dropoutrate kan ha alvorlige konsekvenser for de videre analysene. For det første kan to prøver som kommer fra samme individ ende opp med ulike genotyper i analysen. Disse prøvene vil således tolkes som om de representerer to ulike individer. Videre kan slike genotypningsfeil påvirke slektskapsanalyser, slik at faktiske foreldre/avkoms-relasjoner ikke blir detektert i analysen. En høy dropoutrate behøver likevel ikke bety at vi ender opp med feil i det endelige datasettet. Siden vi kjører et stort antall replikater for alle prøver, vil dropouts i de aller fleste tilfeller oppdages underveis. For noen av prøvene våre har vi kjørt inntil 11 fungerende replikater for et enkelt locus, og gjennomsnittet ligger på mellom 4 og 5 replikater per locus. Analysene våre tyder på at vi har lyktes med å eliminere de fleste genotypningsfeil gjennom en slik replikasjonsstrategi. For det første virker identiteten til de ulike prøvene intuitivt fornuftig (dvs prøver som er samlet svært nær hverandre representerer ofte det samme individet). I tillegg har vi detektert foreldre/avkoms- 2

relasjoner med stor grad av sikkerhet, noe som ikke ville vært tilfelle med en høy feilprosent i det endelige datasettet. Antall ulike individer og bestandstilhøriget Figur 1-8 viser den geografiske fordelingen til alle fungerende prøver, samt hvilket individ og kjønn de representerer (se Appendix 1 for mer detaljerte opplysninger). De 95 fungerende prøvene (spillning, blod, vävnad) representerte 43 ulike individer (17 hunner og 25 hanner, 1 ukjent). Våre analyser viser at alle de 44 individene har sin opprinnelse i den Skandinaviske ulvepopulasjonen, og vi har således ingen nye immigranter i dette materialet. Ti av de 44 individene er representert i vår interne database bestående av døde ulver, radiomerkede dyr, samt individer detektert fra tidligere ekskrementanalyser (Tabell 2). Tabell 2 Alle individer som er representert i vår interne database fra tidligere Individ Län Identisk med Kommentar 1 (M) S V125 (rapport 11/04) 5 (F) O V03-07 19 (F) O V02-12 Faecesprøve fra Värmland, (Mars 2004) Radiomerket individ Dals-Ed; voksen hunn, født 2000(?) Radiomerket individ Glaskogen; voksen hunn, sannsynligvis født 1997 41 (M) T V98-04 Radiomerket som valp i Leksand 1998 20 (F) S V02-06 Radiomerket som valp individ; S. Finnskog-Nyskoga 23 (M) W V111 (rapport sept 2003) Faecesprøve fra Dalarna 15 (M) AC V121 (rapport 07/04) Faecesprøve fra Västerbotten 42 (F) W V00-04 Radiomerket som valp i Leksand 1998 4 (M) S V123 (rapport 08/04) Faecesprøve fra Skärfjäll 27 (M) S V123 (rapport 08/04) Faecesprøve fra Skärfjäll Ser vi på de individene som er representert ved flere prøver, er disse stort sett samplet relativt nær hverandre. Noen få unntak finnes dog. I denne sammenhengen kan man spesielt nevne individ 11 (Figur 2), som har beveget seg flere hundre kilometer fra desember 2003 mars 2004. Dette individet ble av felt-personell observert i Sundsvall og senere Gävle, og ble karakterisert som en vandringsvarg (Appendix 1; Prøve VS04-140). Vi har totalt 6 observasjoner på denne ulven. Desember 2003 oppholdt den seg i nærheten av Sundsvall. Den vandret så sørover, og oppholdt seg i Januar 2004 i Gävleborgs län. Siden beveget den seg nordover igjen, og ble i slutten av februar og begynnelsen av mars funnet igjen i Jämtlands län. 3

Slektskap mellom individer Slektskap mellom individer ble analysert innenfor 5 familiegrupper: (1) Kilsbergen, (2) Furudal, (3) Ockelbo, (4) Filipstad, (5) Ed-Halden (Tabell 3). I Kilsbergen ser det ut til at vi har samplet både alfahannen og alfahunnen, samt 4 avkom. I Furudal og Ockelbo er det sannsynlig at vi har samplet alfahunnen og henholdsvis 6 og 3 avkom. Alle de 13 ungene i disse tre familiegruppene er samplet før april 2004. De stammer derfor sannsynligvis fra yngling i 2003, som ble registrert for alle tre familiegrupper (Wabakken et al. 2004). Noen av dem kan også være fra tidligere ynglinger i de respektive revirene. Tabell 3 Alle svenske familiegrupper som var representert i prøvematerialet, og som således kunne testes ved slektskapsanalyser. Revir Figur Mor a) Avkom Far a) Kilsbergen 8 8 7, 12, 22 26 Furudal 4 31 14, 17, 28, 37, 43, 44 ikke samplet Ockelbo 3 33 21, 32, 34 ikke samplet Filipstad 7 ikke samplet 1, 6, 9 ikke samplet Ed-Halden 6 5 40 U02-08 a) Alle foreldre/avkoms-relasjoner hadde et signifikansnivå på p > 0.95 bortsett fra relasjonen mellom individ 33 og 34, samt relasjonen mellom individ 22 og 26. Disse to foreldre/avkoms-relasjonene hadde et signifikansnivå på 0.80 < p < 0.95. I Ed-Halden foreligger det en svært sannsynlig foreldre/avkoms-relasjon mellom individ 5 og 40, med individ 5 som den mest sannsynlige moren. Siden individ 5 er identisk med V03-07 (Tabell 2), bekrefter dette langt på vei at hun er alfahunnen i reviret. Individ 39 er ubeslektet i forhold til individene 5 og 40. Det viser seg at den gamle alfahannen (U02-08; sannsynlig far for individ 40; se Tabell 3) ble skutt i mai 2003. Individ 39 kan således være en ny hann som er i ferd med å innlemmes i reviret. Et nytt valpekull kan være født i 2004, men dette er foreløpig ikke bekreftet (Wabakken et al. 2004). I Filipstad er slektskapsrelasjonene mer uklare. Her har vi samplet 3 individer, som alle synes å være beslektet. En foreldre/avkoms-relasjon kan imidlertid utelukkes for alle parvise kombinasjoner av disse individene. Det dreier seg således mest sannsynlig om tre søsken. Slektskapsrelasjoner i den skandinaviske ulvebestanden kan være problematiske å påvise i og med at alle individer til en viss grad er i slekt med hverandre (3 founders). For eksempel kan det være problematisk å skille helsøskenstatus fra foreldre/avkomstatus. Vi føler likevel at de presenterte slektskapsdataene har en relativt høy grad av sikkerhet, og konfidensnivået ligger over 95% for de aller fleste foreldre/avkomsrelasjoner (Tabell 3). Revirmarkerende par For seks av de sju revirmarkerende par som ble registrert i Sverige vinteren 2004 (Wabakken et al. 2004), er minst et individ representert i ekskrementmaterialet. For revir Henvålen i Jämtland var hannen representert (Individ 27; Figur 2). Begge revirmarkerende individer ble avlivet Feb 2004 etter fellingstillatelse. For revir Amungen var både hannen og hunnen representert (Individene 10 og 13; Figur 4). For revirene Halgån og Liljendal var henholdsvis hunnen (individ 20) og hannen (individ 4) representert (Figur 5). For revir Kroppefjäll var både hannen og hunnen 4

representert (Individene 25 og 36; Figur 6). Også for revir Uttersberg var både hannen og hunnen representert (Individene 18 og 30; Figur 7). KONKLUSJON Vurdert ut i fra de presenterte dataene, ser det ut som denne typen av noninvasive monitoring kan bidra med viktig informasjon for overvåkningsarbeidet på ulv i årene framover, og således fungere som et verdifullt supplement til tradisjonell sporing og yngleregistrering. I og med at det fortsatt er et relativt begrenset antall familiegrupper i Skandinavia (11 vinteren 2003/2004) er situasjonen relativt oversiktlig, og vi bør i løpet av to-tre innsamlingssesonger ha relativt god oversikt over de ulike familiegruppene. Samplingsstrategien som er brukt ser generelt ser det ut til å gi ganske god dekning innenfor de ulike familiegruppene, og også for de revirmarkerende parene. I forhold til det som ble anslått fra bestandsregistreringen vinteren 2003/2004, ser det ut til at vi har en dekningsprosent på godt over 50% for de fleste familiegruppene. For tre familiegrupper ser det ut til at vi har samplet bortimot alle individer (Ockelbo, Furudal, Kilsbergen). Likevel har vi bare funnet to sannsynlige alfahanner i materialet vårt (Kilsbergen + ny hann i Ed-Halden). Det kunne derfor være ønskelig med en enda tettere sampling i revirene. En god oversikt over alfaparene vil være av betydning for detaljert overvåkning av bestanden i årene framover. Når det gjelder resultatene fra slektskapsanalysene synes vi de er relativt oppløftende. Som nevnt ovenfor, kan det være problematisk å skille helsøskenstatus fra foreldre/avkom-status. Det kan derfor være vanskelig å tilbakeføre utvandrede ulver til det reviret de ble født, og vi har valgt å droppe denne typen betraktninger for det foreliggende materialet. Med en god og kontinuerlig oversikt over alfaparene, vil denne typen analyser forenkles betraktelig. REFERANSER Francisco LV, Langston AA, Mellersh CS, Neal CL Ostrander EA (1996) A class of highly polymorphic tetranucleotide repeats for canine genetic mapping. Mammalian Genome 7, 359 362. Marshall, TC, Slate J, Kruuk L, Pemberton JM (1998) Statistical confidence for likelihood-based paternity inference in natural populations. Mol Ecol 7, 639-655. Ostrander, EA, Sprague GF, Rine J (1993) Identification and characterization of dinucleotide repeat (ca)n markers for genetic-mapping in dog. Genomics 16, 207 213. Pritchard JK, Stephens M, Donnelly P (2001) Inference of population structure using multilocus genotype data. Genetics 155, 945-959. Shibuya H, Collins BK, Huang TH, Johnson GS (1994) A polymorphic (AGGAAT)n tandem repeat in an intron of the canine von Willebrand factor gene. Anim Genet 25, 122. Vilà C, Sundqvist A-K, Flagstad Ø, Seddon J, Björnerfeldt S, Kojola I, Casulli A, Sand H, Wabakken P, Ellegren H (2003) Rescue of a severely bottlenecked wolf (Canis lupus) population by a single immigrant. Proc R Soc Lond B Biol Sci 270, 91-97. Wabakken P, Aronson Å, Sand H, Strømseth TH, Kojola I (2004) Ulv i Skandinavia: Statusrapport for vinteren 2004. Høgskolen i Hedmark; Oppdragsrapport nr. 5 2004. 5

VS04-124 15 VS04-135 15 15 15 VS04-129 15 Västerbotten km 0 50 100 Figur 1 Alle fungerende prøver fra Västerbotten. Blå=hanner; Rød=hunner. Tallene angir hvilket individ som er representert. 6

Mars 2004 11 11 Feb 2004 27 11 Des 2003 Gävleborg, Västernorrland og Jamtlands län km 0 50 100 11 Jan 2004 11 Jan 2004 11 Figur 2 Fungerende prøver fra Jämtland, Västernorrland og Gävleborgs län. Blå=hanner; Rød=hunner. Tallene angir hvilke individer som er representert. 7

Revir Ockelbo (~4 ulver) VS04-034 21 VS04-038 33 VS04-023 32 21 VS04-027 34 VS04-039 VS04-164 Gävleborgs län km 0 25 50 Figur 3 Fungerende prøver fra sørlige Gävleborgs län. Blå=hanner; Rød=hunner. Tallene angir hvilke individer som er representert. Antall ulver i revir Ockelbo er hentet fra Wabakken et al. (2004). VS04-110 14 14 43 VS04-115 28 28 28 VS04-132 37 44 17 VS04-048 17 VS04-048 17 17 VS04-048 VS04-020 31 Revir Furudal (9-11 ulver) Östra Dalarna VS04-193 13 13 VS04-092 VS04-181 16 Figur 4 Fungerende prøver fra östra Dalarnas län. Blå=hanner; Rød=hunner. Tallene angir hvilke individer som er representert. Antall ulver i revir Furudal er hentet fra Wabakken et al. (2004). 8 VS VS04 13 VS04-184 VS04-025 13 10 10 VS04-182 VS04-137 13 VS04-077 10 VS04-081 10 VS04-083 13 km VS04-087 0 25 50

VS04-150 VS04-166 23 23 VS04-002 VS04-044 VS04-040 VS04-054 3 3 3 3 38 VS04-133 35 VS04-052 20 VS04-116 20 4 4 4 4 42 Norra Värmland & Dalarna km 0 50 100 Figur 5 Fungerende prøver fra västra Dalarna og norra Värmlands län. Blå=hanner; Rød=hunner. Tallene angir hvilke individer som er representert. 9

2 VS04-049 VS0 VS04-013 19 VS04-032 5 40 VS04-065 VS04-063 VS04-062 5 39 Revir Ed-Halden (~6 ulver) 25 VS04-037 VS04-057 VS04-045 36 25 Värmland & Västre Götaland km 0 50 100 Figur 6 Fungerende prøver fra Värmland og Västra Götalands län. Blå=hanner; Rød=hunner. Tallene angir hvilke individer som er representert. Antall ulver i revir Ed-Halden er hentet fra Wabakken et al. (2004). 10

4 4 4 4 1 6 1 VS04-125 VS04-105 VS04-086 VS04-078 VS04-073 6 9 VS04-036 VS04-064 1 6 9 9 6 Revir Filipstad; (~7 ulver) 24 VS04-113 41 VS04-104 30 18 18 18 VS04-187 24 VS04-158 VS04-001 2 VS04-041 Revir Kilsbergen; (se Figur 8) 8 VS04-076 VS04-070 8 Östra Värmland & Örebro län km 0 25 50 Figur 7 Fungerende prøver fra östra Värmland og Örebros län. Blå=hanner; Rød=hunner. Tallene angir hvilke individer som er representert. Antall ulver i revir Filipstad er hentet fra Wabakken et al. (2004). 11

VS04-042 22 VS04-068 7 7 VS04-076 Revir Kilsbergen (6-7 ulver) 8 VS04-098 26 VS04-028 16 22 22 VS04-094 VS04-043 12 12 12 VS04-088 km Centrala Örebro län 0 2,5 5 Figur 8 Fungerende prøver fra centrala Örebros län. Blå=hanner; Rød=hunner. Tallene angir hvilke individer som er representert. Antall ulver i revir Kilsbergen er hentet fra Wabakken et al. (2004). 12

Appendix 1 Detaljoversikt over alle innsamlede prøver. Individnummer og kjønn er angitt for alle fungerende prøver. EBC-nr Avsändare DNA-profil Individ Kön insamlar nr. VS04-036 Nelly Grönberg + 1 M 04-53 VS04-125 Lars Furuholm + 1 M 04-60 VS04-154 Nelly Grönberg + 1 M 04-54 VS04-041 Mats Rapp + 2 M 04-196 VS04-049 Therese Lundell + 2 M 04-110 VS04-044 Per Larsson + 3 F 04-104 VS04-133 M M? Se prov 04-190? + 3 F 04-191 VS04-147 Per Larsson + 3 F 04-109 VS04-159 Urban Mossberg Per Larsson + 3 F 04-190 VS04-053 Lars-Axel Magnusson + 4 M 04-102 VS04-056 Lars-Axel Magnusson + 4 M 04-103 VS04-095 Mats Rapp + 4 M 04-186 Insaml. Datum Län, plats Typ av prov Kommentarer 03-09 Sandsjömossen spillning revir: filipstad, 1spårlöpa Verkar vara osäkert om prov 1 eller 5 och om koordinaterna stämmer. 03-08 S spillning Se blankett 03-09 S, Sandsjömossen spillning revir:filipstad 02-10 S Imman spillning 1 spårlöpa 03-18 S, Ulvsbyn spillning 03-25 spillning Tik i tisjön 04-10 spillning B-prov 03-25 spillning 04-10 S(W), SV Digerberget W län spillning 1 spårlöpa, Barmark väg 02-20 W, spillning 1 spårlöpa, hane insamlat längs samma spårlöpa som 04-102 men efter väg. Kan vara 02-20 W, spillning annan individ. 01-09 W/S, Fjällrämmen spillning 1 spårlöpa, revir:tyngsjö öst 13

VS04-096 Mats Rapp + 4 M 04-187 VS04-062 Kent-Åke Gustavsson + 5 F 04-69 VS04-183 Kent-Åke Gustavsson + 5 F 04-72 VS04-064 Nelly Grönberg + 6 M 04-52 VS04-069 Nelly Grönberg + 6 M 04-57 VS04-074 Lars Furuholm + 6 M 04-58b VS04-105 Dagmar Jonsson + 6 M 04-182 VS04-068 William Lundin + 7 M 04-77 VS04-076 William Lundin + 7 M 04-89 VS04-070 William Lundin + 8 F 04-76 VS04-098 William Lundin + 8 F 04-80 VS04-073 Lars Furuholm + 9 F 04-58a VS04-075 Lars Furuholm + 9 F 04-58c VS04-078 Dagmar Jonsson + 9 F 04-174 Peter Edholm, Arne VS04-086 Mortensen + 9 F 04-177 VS04-077 Åke Aronson + 10 M 04-170 VS04-081 Åke Aronson + 10 M 04-167 01-09 W/S, Fjällrämmen spillning 1 spårlöpa, revir:tyngsjö öst 02-10 O, Solittjärn Toftdal spillning 2 spårlöpor, revir: Ed-Halden 03-02 O blod 03-09 S, S. Sandsjömossen spillning 4 spårlöpor, revir: Filipstad 03-01 S, S. Sandsjömossen spillning 4 spårlöpor, revir: Filipstad ev samma koordinater som 04-58a, 03-08 S, spillning revir: Filipstadsreviret 01-03 Filipstadsreviret spillning Filipstadsreviret 01-01 Bredtjärnen spillning 6 spårlöpor 12-30 T, spillning 6 spårlöpor revir: Kilsbergen 08-02 T, Hemsjön spillning 01-14 T, Hemsjön spillning 6 spårlöpor 03-08 S, spillning 3 spårlöpor, revir Filipstad ev samma koordinater som 04-58a, 03-08 S, spillning revir: Filipstadsreviret 01-03 spillning revir: Filipstad 03-08 spillning revir: Filipstad flera spårlöpor men sannolikt bara 2 02-11 W, spillning djur. 02-11 W, Bingsjö-Dådran spillning Revir :Balungen. Möjligen nytt par. 14

VS04-083 Åke Aronson + 10 M 04-166 VS04-084 Lennart Nilsson + 11 M 04-176 VS04-140 Tommy Forsström + 11 M 04-152 VS04-164 Roland Näslund + 11 M 04-209 VS04-176 Artur Olsson + 11 M 04-189 VS04-195 Lars Svanberg + 11 M VS04-199 Lars Svanberg + 11 M Dan Wemer, Anita Eriksson, VS04-088 William Lundin + 12 F 04-173 VS04-099 Anita Eriksson, Dan Wemer + 12 F 04-183 Dan Wemer, Anita Eriksson, VS04-101 William Lundin + 12 F 04-184 VS04-025 Hans Hedblom + 13 F 04-198 VS04-087 Sture Nordlund + 13 F 04-171 VS04-092 Åke Aronson + 13 F 04-93 VS04-182 Hans Hedblom + 13 04-197 VS04-184 Åke Aronson + 13 04-91 VS04-193 Åke Aronson + 13 04-92 02-11 W, Bingsjö-Dådran spillning Västernorrland, Solberg, 12-22 Njurunda spillning 1 spårlöpa 01-06 X, spillning 01-10 X, Lingbo/Klubbäcken spillning 01-23 X Gävleborg, Slättfors spillning 1 spårlöpa flera spårlöpor men sannolikt bara 2 djur. Revir: Balungen Vandringsvarg Sundsvall-Gävle, Iggesund Vandringsvarg! Ensam varg, 1 spårlöpa Provet är från samma? Varg som prov 040228 stam????? (A1)=040228, se VS04-199 / SA 03-03 Z spillning 02-28 Z 01-02 Kilberget spillning 01-02 Kilsbergen spillning 01-02 Kilsbergen spillning Pellasflyten ca 7km norr om 02-20 Dådren spillning 2 spårlöpor, revir: Bingsjö 01-26 W, Tänger spillning 1 spårlöpa 03-06 W, spillning 02-26 Dalarna blod 02-19 W blod 03-07 W blod Varg som kom österifrån (Fernsele? Västernorrland) 2 spårlöpor, Nytt par? (Bingsjöparet) eller Furudalsparet? Nya Löpan. Ej blod i urin, utan bloddroppar utmed spårlöpan. Ev ny parbildning. Blod i vargspår men blod i älgspår fanns också på platsen varför det kan vara älgblod 15

VS04-110 Mats Rapp + 14 M 04-140 VS04-132 Mats Rapp + 14 M 04-156 VS04-124 Ulf Eskilsson + 15 M 04-42 VS04-129 Lars Danielsson + 15 M 04-43 VS04-135 Tord Gustavsson + 15 M 04-45 VS04-155 Tord Gustavsson + 15 M 04-44 VS04-175 Lars Danielsson + 15 M 04-40 VS04-156 Lena Berg + 16 M 04-116 VS04-160 Lena Berg + 17 M 04-125 08-15 Ore älv spillning revir: furudal 08-25 Fililngsåsen, Furudal spillning Barmark flera plus 01-27 AC spillning 02-02 AC spillning 02-16 AC spillning 02-16 AC spillning 02-02 AC spillning hane 09-11 W spillning 09-11 W spillning Rendez vousplats 1, 9-11 vargar Rendez vousplats 1, 9-11 vargar VS04-170 Lena Berg + 17 M 04-117 VS04-172 Lena Berg + 17 M 04-121 09-11 W spillning 09-11 W spillning Rendez vousplats 1, 9-11 vargar Rendez vousplats 1, 9-11 vargar VS04-174 Lena Berg + 17 M 04-120 VS04-162 Kent Sköld, Maria Levin + 18 F 04-31 VS04-185 Nils Johansson + 18 F 0437a 09-11 W spillning 02-14 T spillning 02-16 T blod Rendez vousplats 1, 9-11 vargar Spillningen i prov 04-30,04-31, 04-32 och 04-33 kan komma från två olika individer. Vet ej om blod samlats från urin eller skadad tass. Blankett skriven av Åke Aronsson 16

VS04-186 Nils Johansson + 18 F 0437b VS04-187 Åke Aronson + 18 F 04-36 VS04-032 Kent-Åke Gustavsson + 19 F 04-67 VS04-052 Per Larsson + 20 F 04-105 VS04-091 Per Larsson + 20 F 04-106 VS04-027 Roland Näslund + 21 M 04-202 VS04-034 Leif Holst + 21 M 04-199 VS04-042 William Lundin + 22 F 04-87 VSC 04- VS04-043 William Lundin + 22 F 86 VS04-150 Alf Nordin + 23 M 04-150 VS04-166 Alf Nordin + 23 M 04-145 VS04-113 Mats Rapp + 24 M 04-155 VS04-158 Lasse Larsson + 24 M 04-108 VS04-037 Kent-Åke Gustavsson + 25 M 04-66 VS04-057 Kent-Åke Gustavsson + 25 M 04-61 VSC 04- VS04-028 William Lundin + 26 M 90 02-16 T blod 02-16 T blod Vet ej om blod samlats från urin eller skadad tass. Blankett skriven av Åke Aronsson Ej blod i urin utan från tass/ben. Skador höger framfot, sannolikt hona 12-30 O, Klingarudstjärn Laxarby spillning revir: Glaskogen 10-29 S, Stackelåsen spillning insamlat på barmark 10-29 S, Stackelåsen spillning 01-21 Gävleborg, öster Gopen efter väg spillning 2 spårlöpor 01-16 Gävleborg, revir:ockelbo spillning 4 spårlöpor 09-09 Bredtjärnstorp spillning 08-05 S.Tolsboda spillning 12-08 W spillning 12-04 W, spillning insamlat på barmark, revir:kilsbergen? troligen valp, insamlat på barmark, revir:kilsbergen?, 1 spårlöpa 04-145 och 04-146 från samma spårlöpa. Karta bifogad. 02-10 S, N Blåsjön spillning revir:stadr?, 2 spårlöpor 03-15? spillning 02-16 O, Svingsjön Kroppefjäll spillning 03-08 O, Hästestruten Kroppefjäll spillning 1 spårlöpa 08-26 T, N.Tolsboda spillning Anmäld som trolig varg, mycket osäker på art! 1 spårlöpa Revir: Nilsbergen? Troligen hanen, insamlat på barmark 17

VS04-197 Lars Liljemark + 27 M VS04-115 Lena Berg + 28 F 04-132 VS04-145 Lena Berg + 28 F 04-122 VS04-161 Lena Berg + 28 F 04-118 11-11 Z spillning 10-25 W, spillning 09-11 W, spillning 09-11 W spillning ev valpspillning, 9-10 spårlöpor. På blanketten står 2004 men det ska Rendez vousplats 1, 9-11 vargar Rendez vousplats 1, 9-11 vargar VS04-194 + 29 M V1157/04 VS04-177 Kent Sköld, Maria Levin + 30 M 04-30 VS04-020 Pär Johansson + 31 F W 040207 VS04-023 Leif Holst + 32 M 04-200 VS04-038 Leif Holst + 33 F 04-206 VS04-039 Leif Holst + 34 M 04-207 VS04-040 Lars-Axel Magnusson + 35 M 04-194 VS04-045 Kent-Åke Gustavsson + 36 F 04-63 VS04-048 Lena Berg + 37 F 04-113 VS04-054 Lars-Axel Magnusson + 38 M 04-101 09-10 Täby vävnad 02-14 T spillning Spillningen i prov 04-30,04-31, 04-32 och 04-33 kan komma från två olika individer. 02-07 W, Humofjärn, Furudal spillning 2 spårlöpor, alfaparet, ny hona?? 01-16 Gävleborg, Katrineberg spillning 4 spårlöpor, revir: Ockelbo Gävleborg, Vägbanan mellan 11-21 Katrineberg och Tönsen spillning revir: ockelbo 03-26 Gävleborg, Katrineberg spillning 4 spålöpor 01-18 W spillning 03-08 O, Pöltjärnarna Kroppefjäll spillning 09-11 W spillning Rendez vous-plats 1, 9-11 vargar 02-20 W, spillning 1 spårlöpa 18

VS04-063 Kent-Åke Gustavsson + 39 M 04-73 VS04-065 Kent-Åke Gustavsson + 40? 04-71 VS04-104 Björn Ljunggren + 41 M 04-188 VS04-116 Nisse Pers + 42 F 04-133 VS04-141 Lena Berg + 43 F 04-119 VS04-021 Leif Holst - 04-205 VS04-022 Leif Holst - 04-203 VS04-024 Leif Holst - 04-204 VS04-030 Sture Nordlund - 04-163 VSC 04- VS04-031 Nelly Grönberg + Rev 55 VSC 04- VS04-033 William Lundin - 79 prov2 03-02 O, Heråälven Dals-Ed spillning 5 spårlöpor. Revir: Ed-Halden O, Norr Torbjörnsmossen 03-02 Dals-Ed spillning 5 spårlöpor, revir: Ed-Halden 01-03 Ulriksbergsreviret? spillning Ulriksbergsreviret? 04-?? W, spillning 09-11 W, spillning Rendez vousplats 1, 9-11 vargar Gävleborg, Vägbanan mellan 11-21 Katrineberg och Tönsen spillning 4 spårlöpor, revir: Ockelbo 01-16 Gävleborg, Katrineberg spillning 4 spårlöpor Gävleborg, Vägbanan mellan 11-21 Katrineberg och Tönsen spillning 4 spårlöpor, revir: Ockelbo Förmodat revir: Filipstad, 02-09 Tungsjö, Halgån? spillning 2 spårlöpor VS04-026 Arne Mortensen - 04-195 VS04-029 William Lundin - 04-78 - Förmodat revir: Nilsbergen spillning 5 spårlöpor 02-10 W, Bingsjö spillning 2 spårlöpor? VS04-035 Leif Holst - 04-201 VS04-046 Kent-Åke Gustavsson - 04-68 VS04-047 Åke Aronson - 04-94 VS04-050 Lena Berg - 04-114 03-09 Sandsjömossen spillning 01-12 T, Rödsimmen spillning Gävleborg, Vägbanan mellan 11-21 Katrineberg och Tönsen spillning revir: Ockelbo O,Kvarnhusbäcken Gärdsjö 12-30 Laxarby spillning 1 spårlöpa vid kadaver-okänt antal djur som varit och ätit 2 spårlöpor, Nytt par? (Bingsjöparet) eller Furudalsparet? 03-06 W, spillning Älder löpan till parningsplatsen. 09-11 W, spillning Rendez vous-plats 1, 9-11 vargar 19

VS04-051 Lena Berg - 04-115 VS04-055 Kent-Åke Gustavsson - 04-64 VS04-058 Per Larsson - 04-107 VS04-059 Kent-Åke Gustavsson - 04-70 VSC 04- VS04-060 William Lundin - 81 VS04-061 Kent-Åke Gustavsson - 04-62 VS04-066 Lars Furuholm - 04-59 VSC 04- VS04-067 Nelly Grönberg - Rev 56 VS04-071 William Lundin + Hund 04-82 VS04-072 Kent-Åke Gustavsson - 04-65 VSC 03- VS04-079 Rune Sto??e - 13 VS04-080 Börje Dahlén - 04-169 VS04-082 William Lundin - 04-180 Dan Wemer, Anita Eriksson, VS04-085 William Lundin + Rev 04-172 VS04-089 Linda Andersson - 04-175 VS04-090 Börje Dahlén - 04-168 VS04-091 Per Larsson - 04-106 09-11 W, spillning Rendez vous-plats 1, 9-11 vargar 02-16 O, Svingsjön Kroppefjäll spillning 01-22 spillning Nyskogahanen? 03-02 O, Heråälven Dals-Ed spillning 5 spårlöpor. Revir: Ed-Halden 01-13? T, N.Tolsboda spillning Kilsbergen 02-14 03-08 S, spillning 03-09 S, S. Sandsjömossen spillning 01-12 T, Bredtjärnstorp spillning 6 spårlöpor O, Svingsjön Höhsäter 02-16 Färgelanda spillning 12-03 BD, spillning O, Bunesjön Kroppefjäll Högsäter spillning 2 spårlöpor, revir:kroppefjäll 11-29 spillning 01-02 Kilsberget spillning 01-03 Kilsbergen spillning 01-03 Ö Storfors spillning 11-29 spillning 10-29 S, Stackelåsen spillning ev samma koordinater som 04-58a, revir: Filipstadsreviret revir: Filipstad, okänt antal individer Gamla Tyngsöreviret. Från hane i (nyetablerat?) par. Plockat vid vägkant. Gamla Tyngsöreviret. Sannolikt från tiken. Plockat vid vägkant. 20

VS04-093 William Lundin - 04-84 VSC 04- VS04-094 William Lundin - 75 VS04-095 Mats Rapp - 04-186 VS04-096 Mats Rapp - 04-187 VS04-097 Lena Berg - 04-130 Peter Edsholm, Arne VS04-100 Mortensen - 04-178 VS04-102 Mats Rapp - 04-185 VS04-103 Kjell Johansson - 04-179 VS04-106 Dagmar Jonsson - 04-181 VS04-107 Sture Nordlund - 04-143 VS04-108 Sture Nordlund - 04-153 VS04-109 Sture Nordlund - 04-154 VS04-111 Mats Rapp - 04-141 VS04-112 Mats Rapp - 04-142 VS04-114 Mats Rapp - 04-144 VS04-117 Mats Rapp + Rev 04-135 VS04-118 Inge Woxmark - 04-134 VS04-119 Mats Rapp - 04-136 01-12 T, Bredtjärnstorp spillning 6 spårlöpor 6 spårlöpor, troligen valp, revir: 01-01 T, Svinfallet spillning killsbergen 01-09 W/S, Fjällrämmen spillning 1 spårlöpa, revir:tyngsjö öst 01-09 W/S, Fjällrämmen spillning 1 spårlöpa, revir:tyngsjö öst 10-04 W spillning Ben spillning vuxet djur. 03-05 Filipstadsreviret spillning 01-09 W/S, Fjällrämmen spillning 1 spårlöpa, revir:tyngsjö öst 01-02 S. St. Hättsjön (Svarta hålet) spillning Vargspillning på väg 01-03 Filipstadsreviret spillning Filipstadsreviret 03-29 X, Gammel Homna spillning Lostiken?, 1 spårlöpa 02-14 Voxna Bruk spillning 1 spårlöpa 02-15 Voxna Bruk spillning 1 spårlöpa 08-15 Furudal spillning revir: furudal, barmark +15 08-15 Ore älv spillning revir: furudal, valpspillning? 08-15 Furudal spillning valp?,barmark +15 08-15 Furudal spillning valpspillning (räv?), barmark +15. Tillvaratagen av Gerd 0250-22186, 04-02 W, spillning Spillningen har legat ett tag. 08-15 W, Ore älv. spillning 21

VS04-120 Mats Rapp - 04-137 VS04-121 Lena Berg - 04-129 VS04-122 Mats Rapp - 04-138 VS04-123 Mats Rapp - 04-139 VS04-126 William Lundin - 04-83 VS04-127 Kent-Åke Gustavsson - 04-74 VS04-128 Kurt Sköld, Maria Levin - 04-32 VS04-130 Lars-Axel Magnusson + Rev 04-193 VS04-131 William Lundin - 04-85 VS04-134 Lena Berg - 04-126 VS04-136 Lena Berg - 04-128 VS04-137 Sture Nordlund - 04-158 VS04-138 Alf Nordin + Rev 04-151 VS04-139 Jörgen Johansson - 04-165 VS04-142 Lena Berg - 04-131 08-15 Furudal spillning Barmark +15. 09-11 W, spillning Rendez vous-plats 1, 9-11 vargar 08-15 Furudal spillning 04-138 och 04-139 hittade på samma ställe men olika färg på spillningen. 2 olika individer? 04-138 och 04-139 hittade på samma ställe men olika färg på 08-15 Furudal spillning spillningen. 2 olika individer? 01-12 T, Bredtjärnstorp spillning 6 spårlöpor 02-16 O, Svingsjön Kroppefjäll spillning Spillningen i prov 04-30,04-31, 04-32 och 04-33 kan komma från två 02-14 T spillning olika individer. 01-18 W, spillning 01-10 T, Rödsimmen spillning revir: Kilsbergen, 3 spårlöpor 09-11 W, spillning Rendez vousplats 1, 9-11 vargar 09-11 W, spillning Rendez vousplats 1, 9-11 vargar 02-10 W, spillning 1 spårlöpa 12-22 W, spillning Dalarna W, "Studentvägen" 05-21 Venjan-Mora spillning 09-11 W, spillning Rendez vousplats 1, 9-11 vargar 22

VS04-143? - 04-159 09-29 spillning VS04-144 Lars-Axel Magnusson - 04-192 01-18 W, spillning VS04-146 Mats Rapp - 04-147 08-15 Furudal spillning Barmark +15 furudal VS04-148 Mats Rapp - 04-148 08-15 Furudal spillning Barmark +15 furudal VS04-149 Lena Berg - 04-149 08-17 W spillning VS04-151? - 04-164?? spillning VS04-152? - 04-160?? spillning VS04-153 Roland Näslund - 04-208 11-21 Gävleborg, Spångsund Mosjön spillning revir: ockelbo VS04-157 Nelly Grönberg - 04-51 03-09 S, Sandsjöälven spillning revir:filipstad, 2 spårlöpor VS04-162 Kent Sköld, Maria Levin - 04-31 02-14 T spillning Spillningen i prov 04-30,04-31, 04-32 och 04-33 kan komma från två olika individer. VS04-163 Lena Berg - 04-127 VS04-165 Alf Nordin + Rev 04-146 VS04-167 Sture Nordlund - 04-162 VS04-168 Lena Berg - 04-123 VS04-169? + Rev 04-157 09-11 W spillning 12-04 W, spillning 02-09 Skäfttjärn spillning 1 spårlöpa 09-11 W spillning 02-19 Byråsen spillning Rendez vousplats 1, 9-11 vargar Osäkert om varg. Osäkert om spillning, sekret eller urin pga regn. Extraherat som spillning. 04-146 och 04-145 från samma spårlöpa. Karta bifogad. Rendez vousplats 1, 9-11 vargar 23

VS04-171? - 04-161 VS04-173 William Lundin - 04-88 VS04-178 Kent Sköld, Maria Levin - 04-33 VS04-179 Lars Danielsson - 04-39 VS04-180 Lars Danielsson - 04-41 VS04-181 PJ - 04-210 VS04-184 Åke Aronson - 04-91 09-29? spillning revir: Kilsbergen, 3 spårlöpor, 07-20 T, Kilsgergen spillning Barmark 02-14 T blod (?) 01-30 AC urin Troligtvis en hane. 01-26 AC urin Urinerar hukande. 01-10 W blod Ej blod i urin, utan bloddroppar 02-19 W blod utmed spårlöpan. Ev ny parbildning. Förmodat revir: Nyskoga, Antal VS04-188 Per Larsson - 04-111 01-08 Värmland blod spårlöpor vid spårningen: 2 VS04-189 Anders Salomonsson - Nr 1 10-01 spillning Varg eller räv? VS04-190 Alf Nordin - Nr 2 06-15 spillning VS04-191 Alf Nordin + Hund Nr 3 06-21 spillning VS04-192 Johan Månsson - 08-17 C (Uppsala län) Korsgården spillning VS04-196 - blod VS04-198 Lars-Gunnar Wagenius - 11-10 Z spillning 24