Bioforsk Rapport Bioforsk Report Vol. 5 Nr

Like dokumenter
Bioforsk Rapport Bioforsk Report Vol. 5 Nr

Populasjonsovervåkning av brunbjørn (Ursus Arctos)

Populasjonsovervåking av brunbjørn :

Populasjonsovervåking av brunbjørn

Populasjonsovervåking av brunbjørn :

Populasjonsovervåking av brunbjørn

Populasjonsovervåking av brunbjørn

Populasjonsovervåking av brunbjørn

Populasjonsovervåking av brunbjørn

Bioforsk Rapport Bioforsk Report Vol. 10 nr

Populasjonsovervåkning av brunbjørn :

Populasjonsovervåkning av brunbjørn :

Bioforsk Rapport Bioforsk Report

Bioforsk. Report. mulige analyse

Overvåking og kartlegging av lys ringråte i norsk matpotetproduksjon

Populasjonsovervåkning av brunbjørn :

Påføring av tjære som tapsforebyggende tiltak i reindrifta

Genetisk analyse av brunbjørn i Hedmark

Effektive dyrkingssystemer for miljø og klima

Statusrapport for prosjektet: Metodeutvikling for studier av bjørners predasjon på klauvdyr. 1 november Ole-Gunnar Støen

DNA analyse av sporprøver fra brunbjørn, Øst-Finnmark 2007

AREALKRAV TIL EN HUNNBJØRNBESTAND MED 20 YNGLINGER ÅRLIG I NORGE

Populasjonsovervåkning av brunbjørn :

Resultater av bjørnehårfeller i reinbeitedistrikt Beahceveai/Pasvik 5A/5C i 2016

BJØRNE- EKSKREMENTER. - innsamling til DNA analyser

Bioforsk Rapport Vol. 1 Nr

Statusrapport for prosjektet: Metodeutvikling for studier av bjørners predasjon på klauvdyr. 1 november Gro Kvelprud Moen og Ole-Gunnar Støen

Fosforstatus på dyrka mark i Vannområde Morsa.

Effektive dyrkingssystemer for miljø og klima

Dato: Antall sider (inkl. denne): 7. Resultater fra innsamling av ekskrementer og hår fra bjørn til DNAanalyse,

Populasjonsovervåkning av jerv ved hjelp av ikke-invasiv DNA analyse.

NINA Minirapport 337 DNA-analyser av jerv i Sogn og Fjordane vinteren 2010/2011

Family groups of brown bears in Sør Varanger, Norway

Overvåking og kartlegging av lys ringråte i norsk matpotetproduksjon

Påvisning av bjørn og andre rovdyr i reinbeitedistrikt Beahceveai/Pasvik 5A/5C

Analyse av nasjonale prøver i regning,

Notat. Resultater fra innsamling av ekskrementer og hår fra bjørn til DNAanalyse, Den som måtte ha interesse av det. Statens Naturoppsyn i Troms

WWF etterlyser plan for oppnåelse av bestandsmål for bjørn i Norge

Bjørneekskrementer innsamling til DNA analyser

Ansvaret for formidling, drift og utvikling av Nasjonalt overvåkingsprogram for rovvilt Jonas Kindberg Leder - Rovdata

Ansvaret for formidling, drift og utvikling av Nasjonalt overvåkingsprogram for rovvilt Morten Kjørstad Leder - Rovdata

Bioforsk Rapport Vol. 3 No

Revidert karakterisering av vannforekomster i jordbruksområder

Molekylære metoder i medisinsk mikrobiologi.

KYSTTORSK OG SKREI I LOFOTEN 2009

FIG 1 Geografisk fordeling av alle prøver; gul = fungerende, rød = ikke-fungerende

Populasjonsovervåkning av brunbjørn : Rapport for Sør-Varanger, Finnmark for 2004 og 2005

Kartlegging av E. coli hos sau resultater fra prøver samlet inn i 2006

Hurtigtesten som utføres per i dag. Åpent møte 7 januar 2008 Gentesting ved bryst- og eggstokkreft

Influensaovervåking , uke 7

Handlingsplan mot Campylobacter spp. hos slaktekylling

Handlingsplan mot Campylobacter spp. hos slaktekylling

Faglig kontaktperson under eksamen: 1.aman. Hans K. Stenøien ( )

Estimert innsamlet beløp husvis pr

Bestandsstatus for bjørn, jerv, ulv, gaupe og kongeørn

Skrantesjuke (CWD) på villrein sykdommen og prøvetaking. Oslo 4. juli 2017 Jørn Våge, Knut Madslien, Petter Hopp, Sylvie Benestad, Turid Vikøren

Klamydia i Norge 2012

Vurdering av skade på myrflangre (Epipactis palustris)på Haugerudmyra i Lier

Kartlegging av E. coli hos sau resultater fra prøver samlet inn i 2007

Blir vi sprø av å drikke melk? Kristin Holvik Seniorforsker, Avd. kroniske sykdommer og aldring, FHI 6. februar 2019

Spredt avløp i jordbrukslandskapet

Klinisk molekylærmedisin (4): Indirekte diagnostikk ved koblingsanalyser

MSI erfaringer fra Tromsø

Handlingsplan mot Campylobacter spp. hos slaktekylling

Metodeutvikling for studier av bjørners predasjon på klauvdyr

I dette notatet presenterer vi statistikk om spesialpedagogisk hjelp i barnehagen og spesialundervisning på grunnskolen og i videregående opplæring.

Influensaovervåking , uke 6

ÅRSRAPPORT fra. Nasjonalt referanselaboratorium for Francisella tularensis

Vår ref. Tabell 1. Prøver og lokaliteter Lokalitet/merking Saksnummer Vår merking Undersøkt materiale*

Innsamling av frø fra artsrike enger i Grimstad, Bykle og Flekkefjord

Influensaliknende sykdom/influenza-like illness Uke/Week

3M Food Safety 3M Molecular Detection System. Patogentesting. Enkelt og greit

Foryngringer i den svenske gaupebestanden i 2005 belyst fra genetisk analyse av spillning

Drepte i vegtrafikken

Om tabellene. Januar - februar 2019

Personer med nedsatt arbeidsevne. Fylke og alder. Tidsserie måned

Om tabellene. Januar - mars 2019

Personer med nedsatt arbeidsevne. Fylke og alder. Tidsserie måned

Personer med nedsatt arbeidsevne. Fylke og alder. Tidsserie måned

Personer med nedsatt arbeidsevne. Fylke og alder. Tidsserie måned

Om tabellene. Januar - mars 2018

Bruk av genteknologiske analyser ved diagnostikk av luftveisinfeksjoner. Gardermoen Svein Arne Nordbø

Påviste og mistenkte tilfeller av Pancreas disease (PD) januar - desember 2009

Om tabellene. Januar - desember 2018

Kartografi for AR5. Knut Bjørkelo, Anne Nilsen, Jostein Frydenlund. Divisjon for kart og statistikk NIBIO RAPPORT VOL. 3 NR.

Drepte i vegtrafikken

Praktisk dyrking av molte

Statistikk uførepensjon per 31. desember 2010 Notatet er skrevet av

Handlingsplan mot Campylobacter spp. hos slaktekylling

Overvåking og bruk av diagnostiske tester.

Fravær i videregående skole skoleåret

Utviklingen i uførediagnoser per 31. desember 2012 Notatet er skrevet av Jostein Ellingsen og Marianne Næss Lindbøl,

Analyse av nasjonale prøver i engelsk 2013

Høring om endring av rovviltforskriften felles plattform

Rovdata. Rovviltnemnd Bodø 30. Mai Jonas Kindberg Leder - Rovdata. ROVDATA

Utviklingen i antall uførepensjonister, 31. mars 2011 Notatet er skrevet av

Klamydia og lymfogranuloma venerum (LGV) i Norge 2013

«Stillingsannonser i norske kommuner» - oppsummering av utførte medieanalyser

Fraværet i videregående stabiliserer seg - analyse av foreløpige fraværstall

Resistent lakselus - kvifor er det eit problem og korleis diagnostisere resistens?

Transkript:

Bioforsk Rapport Bioforsk Report Vol. 5 Nr. 191 2010 Utvikling av en multipleks mitokondrie-dna test spesifikk for elg, rein, rødrev, mårhund og grevling Analyse av 406 ekskrementer negative for brunbjørn-dna fra innsamlingen til overvåkning av brunbjørn i Norge i 2009 Hans Geir Eiken, Mari Bergsvåg, Per M. Knappskog, Siv Grete Aarnes, Paul E. Aspholm, Ingvild Wartiainen og Snorre B. Hagen Bioforsk Jord og miljø, Svanhovd www.bioforsk.no

Hovedkontor/Head office Frederik A. Dahls vei 20 N-1432 Ås Tel.: (+47) 40 60 41 00 post@bioforsk.no Bioforsk Svanhovd Bioforsk Jord og miljø Svanhovd N-9925 Svanvik Tel.: (+47) 46 41 36 00 svanhovd@bioforsk.no Tittel/Title: Utvikling av en multipleks mitokondrie-dna test spesifikk for elg, rein, rødrev, mårhund og grevling. Analyse av 406 ekskrementer negative for brunbjørn-dna i fra innsamlingen til overvåkning av brunbjørn i Norge i 2009. Forfatter(e)/Author(s): Hans Geir Eiken, Mari Bergsvåg, Per M. Knappskog, Siv Grete Aarnes, Paul E. Aspholm, Ingvild Wartiainen og Snorre B. Hagen Dato/Date: Tilgjengelighet/Availability: Prosjekt nr./project No.: Saksnr./Archive No.: 30.12.10 Åpen 4310022-03 Arkivnr Rapport nr./report No.: ISBN-nr./ISBN-no: Antall sider/number of pages: 191/2010 978-82-17-00742-5 25 1 Antall vedlegg/number of appendices: Oppdragsgiver/Employer: Direktoratet for naturforvaltning Kontaktperson/Contact person: Hans Geir Eiken Stikkord/Keywords: Mitokondrie DNA, ekskrementer rødrev, elg, rein, grevling, mårhund, brunbjørn Mitochondrial DNA, feces, Red fox, Moose, Reindeer, Badger, Raccoon dog, Brown bear Fagområde/Field of work: Molekylær økologi Molecular ecology Sammendrag: Mitokondrielt DNA (mtdna) forekommer i høyt kopitall i celler, og viser sekvenser med høy spesifisitet for ulike arter. Vi har utviklet en multiplex PCR analyse for mtdna for rødrev (Vulpes vulpes), elg (Alces alces), rein (Rangifer tarandus), grevling (Meles meles) og mårhund (Nyctereutes procyonoides). Multipleks mtdna assayet ble anvendt til analyse av 406 bjørne-negative ekskrementer fra innsamlingen til overvåkning av brunbjørn i Norge i 2009. Vi har tidligere rapportert påvisning av brunbjørn-dna i 573 (58 %) av 980 ekskrementprøver fra denne innsamlingen i felten i 2009. Multipleks mtdna testen viste at elg (9,2 %) og rødrev (4,5 %) var de hyppigst forekommende forvekslingsartene i denne feltinnsamlingen. I tillegg ble det påvist grevling, rein og mårhund i et mindre antall prøver. Blandinger av to eller tre arter ble påvist i 35 prøver (3,6 %), og årsaken til dette kan være påvisning av byttedyr-dna i ekskrementene fra kjøttetere. I så fall er andelen rødrevekskrementer blant forvekslingene høyere (6,7 %) enn det som er påvist med enkelt arts bestemmelse alene (4,5 %). En mulig tilblanding av DNA fra byttedyr i ekskrement prøvene kan også ha ført til at mtdna testen viser litt for mange elg og rein, men uten at denne andelen kan bestemmes i denne studien. Samlet viser denne studien at arten kunne bestemmes for 768 (78 %) av 980 ekskrementer samlet inn i Norge i 2009. Summary: Mitochondrial DNA exists in high copy number in cells and shows sequences of high specificity for different species. We have developed a multiplex PCR analysis for mtdna for red fox (Vulpes vulpes), moose (Alces alces), reindeer (Rangifer tarandus), badger(meles meles) and raccoon dog (Nyctereutes procyonoides).the multiplex mtdna assay for the five species was applied to the

Innholdsfortegnelse 1. Sammendrag... 2 2. Innledning... 3 3. Material og Metode... 4 4. Resultater... 5 5. Diskusjon... 8 6. Referanser... 10 7. Appendiks 1... 11

1. Sammendrag Mitokondrielt DNA (mtdna) forekommer i høyt kopitall i celler, og viser sekvenser med høy spesifisitet for ulike arter. Vi har utviklet en multiplex PCR analyse for mtdna for rødrev (Vulpes vulpes), elg (Alces alces), rein (Rangifer tarandus), grevling (Meles meles) og mårhund (Nyctereutes procyonoides). Multipleks mtdna assayet ble anvendt til analyse av 406 bjørne-negative ekskrementer fra innsamlingen til overvåkning av brunbjørn i Norge i 2009. Vi har tidligere rapportert påvisning av brunbjørn-dna i 573 (58 %) av 980 ekskrementprøver fra denne innsamlingen i felten i 2009. Multipleks mtdna testen viste at elg (9,2 %) og rødrev (4,5 %) var de hyppigst forekommende forvekslingsartene i denne feltinnsamlingen. I tillegg ble det påvist grevling, rein og mårhund i et mindre antall prøver. Blandinger av to eller tre arter ble påvist i 35 prøver (3,6 %), og årsaken til dette kan være påvisning av byttedyr-dna i ekskrementene fra kjøttetere. I så fall er andelen rødrevekskrementer blant forvekslingene høyere (6,7 %) enn det som er påvist med enkelt arts bestemmelse alene (4,5 %). En mulig tilblanding av DNA fra byttedyr i ekskrement prøvene kan også ha ført til at mtdna testen viser litt for mange elg og rein, men uten at denne andelen kan bestemmes i denne studien. Samlet viser denne studien at arten kunne bestemmes for 768 (78 %) av 980 ekskrementer samlet inn i Norge i 2009. 2

2. Innledning Bestandsovervåkning av brunbjørn (Ursus arctos) i Norge og Sverige er basert på innsamling av ekskrementprøver i felt med påfølgende DNA-analyse av prøvene. DNA-analysen for individbestemmelse er basert på multiple STR (Short Tandem Repeats) med høy informasjonsverdi (Eiken et al. 2009). I innsamlingen i Norge i 2009 var 58 % av ekskrementprøvene positive for brunbjørnindivider (Wartiainen et al. 2010), mens i en tilsvarende innsamling i Västerbotten i Sverige samme år ble det påvist brunbjørn i hele 74 % av prøvene (Eiken et al. 2010). De mange negative prøvene har likevel aktualisert spørsmålet om i hvilken grad innsamling av ekskrementer fra andre arter innvirker på resultatet. I tillegg er det vanskelig å evaluere DNA-metodenes sensitivitet på grunn av denne usikkerheten. I 2006 utførte vi en mitokondrie-dna (mtdna) test for rødrev (Vulpes vulpes) på 435 bjørne-negative ekskrementprøver fra Norge, og 17 % av disse var positive for rødrev (Bjervamoen&Eiken 2007). Mitokondrie DNA foreligger i et stort antall kopier per celle, og representerer således også en mye mer sensitiv test enn DNAanalyse basert på det kjerne-dna som er utgangspunktet for STR-analysen og identitetsbestemmelsen. Cytokrom b genet i mtdna viser liten variasjon imellom individer av samme art, men samtidig noe variasjon mellom arter, og har derfor vært brukt til å lage artsspesifikke DNA-tester. Tobe & Linacre presenterte i 2008 et muliplex assay for 18 ulike pattedyr basert på Cytokrom b -genet. Vi har i denne studien brukt denne kunnskapen for å lage et nytt mtdna mulipleks assay spesifikt for artene rødrev, elg (Alces alces), rein (Rangifer tarandus), grevling (Meles meles) og mårhund (Nyctereutes procyonoides). Prosjektet for å utvikle artsspesifikke DNA-tester for rødrev, elg, rein, grevling og mårhund ble gjort på oppdrag fra Direktoratet for naturforvaltning i Norge og Länsstyrelsen i Västerbotten i Sverige. Vi har i en tidligere rapport i år beskrevet utviklingsarbeidet og anvendelsen av mtdna-tester for fem arter på 344 brunbjørnnegative ekskrementer fra innsamlingen i Västerbotten i Sverige i 2009 (Eiken et al. 2010). I denne rapporten beskrives anvendelsen av mtdna testen for de fem artene på 406 brunbjørn-negative ekskrementer fra innsamlingen i Norge i 2009. Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 3

3. Materiale og metode 3.1 DNA-analyse for brunbjørn DNA ble renset fra 980 ekskrementprøver, og tilstedeværelsen av bjørne-dna ble testet med to spesifikke DNA-analyser (STR-markører). Det ble analysert for kjønn og genotyper for 8 STR-markører (MU05, MU09, MU10, MU23, MU50, MU51, MU59, og G10L). Analysen ble utført i henhold til beskrivelse i akkreditert prosedyre. En detaljert metodebeskrivelse fås ved henvendelse til laboratoriet (metode MH101). Resultatet for bjørne-positive ekskrementprøver (n=573) og negative prøver (n=407) er beskrevet i Bioforsk rapport nr. 72-2010 (Wartiainen et al. 2010). 3.2 Multipleks mtdna assay Universelle primere og spesifikke primere for PCR-amplifisering av cytokrom b genet i mtdna ble laget og satt sammen etter en modifisert fremgangsmåte etter Tobe & Linacre (2008). For artene mårhund, elg og rein ble helt nye, spesifikke PCR-primere konstruert i Oligo (Medprobe) og testet mot Genbank (BLAST, NCBI) for spesifisitet. Multipleks PCR ble utført etter en modifisert protokoll etter Tobe&Linacre (2008). FAM-merkede PCR produkter av spesifikk størrelse ble analysert på en ABI 3130xl Genetic Analyzer (kapillær elektroforese) (se Fig. 1). Rødrev Rein Mårhund Elg Grevling Fig. 1. Multiplex PCR-amplifisering av cytokrom b genet i mtdna for fem ulike arter. Panelet viser resultatet av kapillær elektroforese med spesifikke topper (blå og grønne fylte topper) for hver art (ca 1pg templat DNA), røde topper uten fyll viser størrelsesmarkør. 4

4. Resultater Utvikling av et multipleks mtdna-assay for artene rødrev, elg, grevling, rein og mårhund ble utført etter en modifisert fremgangsmåte etter Tobe & Linacre (2008). Det var mulig å utføre assayet i en PCR reaksjon med en enkelt fluorecence-farge (se Materiale og Metode). Multipleks assayet ble testet ned til >1 pg templat DNA i en blanding fra alle fem artene (se Fig. 1). I tillegg ble multipleksassayet testet med DNA fra ekskrementprøver. Alle primersett var spesifikke for ønsket art, og ga negative resultat i analyse der DNA fra andre arter ble tilsatt som templat (resultat ikke vist). Alle kontroller uten DNA eller kontroller som inneholdt bjørne-dna var negative i alle forsøk med multipleks assayet. Det ble i 2009 samlet inn 980 ekskrementprøver i Norge, og av disse var 573 positive for bjørne-dna (58 %). Av de 407 negative prøvene fra innsamlingen ble 406 prøver testet for artene rødrev, elg, grevling, rein og mårhund med multipleks mtdna-assayet (se Tabell 1 og Appendiks 1). Alle kontroller uten DNA eller med bjørne-dna var blanke i undersøkelsen. Tabell 1: Resultat fra multipleks mtdna-analyse av 406 1 brunbjørn-negative ekskrementer fra innsamlingen i Norge i 2009 sammenlignet med resultatene fra innsamlingen i Västerbotten samme år. Art Antall Andel (%)av negative prøver i Norge i 2009 (n=406 1 ) Andel (%) av alle prøver i Norge i 2009 (n=980) Västerbotten (%) i 2009 (n=1341) Elg 90 22,2 9,2 4,4 Rødrev 44 10,8 4,5 7,2 Grevling 15 3,7 1,5 1,2 Rein 9 2,2 0,9 0,2 Mårhund 2 0,5 0,2 0 Blanding av arter 35 8,6 3,6 4,5 Uidentifisert art 211 52,0 21,5 8,1 Totalt 406 100,0 41,4 25,6 1 Totalt var det 407 negative prøver i innsamlingen i 2009, men kun 406 er med i denne studien ut fra at en prøve i ettertid er vurdert til å være fra annet materiale enn ekskrementer. Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 5

Elg var den arten som hyppigst kunne påvises i innsamlingen i 2009 med 9,2 % av prøvene. Rødrev ble påvist i 4,5 % av prøvene, mens grevling, rein og mårhund kunne påvises i et mindre antall prøver (0,2-1,5 %). Sammenligner vi med den tilsvarende innsamlingen i Västerbotten samme år kan vi se at det er elg og rødrev er i motsatt rekkefølge, dvs. at rødrev er den hyppigste blant de negative prøvene og elg er nr. 2 i Västerbotten (se Tabell 1). Totalt var 195 prøver (48 %) av de 406 uidentifiserte ekskrementprøvene positive for andre arter i multipleks mtdna assayet. En kombinasjon av to ulike arter ble påvist i 34 prøver, mens i en prøve var en blanding av tre ulike arter (Tabell 2, Appendiks 1). For alle de 35 blandingsprøvene ble eksperimentet gjentatt en gang til, men med det samme resultatet for alle prøvene. Rødrev var representert i 28 av de 35 blanda prøvene, og rødrev-elg kombinasjonen var den hyppigste. Utenom rødrev-kombinasjonene var der 3 prøver hver av grevling og mårhund i kombinasjon med elg eller rein. Tabell 2. Multipleks mtdna assay: Resultater fra analyse av blanding av ulike arter i 35 av 406 ekskrementprøver Blanding mtdna Antall(n=35) Rødrev-Elg 22 Rødrev-Grevling 3 Rødrev-Mårhund 2 Grevling-Elg 3 Mårhund-Elg 2 Mårhund-Rein 1 Rein-Elg 1 Rødrev-Elg-Mårhund 1 Total 35 6

Den fylkesvise fordelingen av arter (Tabell 3) er kun i mindre grad avvikende fra fordelingen for landet som helhet med elg som vanligst og rødrev som nr. 2. Av mindre forskjeller kan det nevnes at for Nordland og Nord-Trøndelag er elg og rødrev omtrent likt representert. Fylkene Nordland, Sør-Trøndelag og Oppland har ellers betydelig høyere andel artsbestemte prøver enn landsgjennomsnittet, men for disse fylkene er også tallmaterialet lite. Tabell 3. Multipleks mtdna assay: Fylkesvis fordeling av påviste arter i negative prøver 2009 Hedmark Oppland Alle fylker Elg 28 6 8 14 13 16 5 90 Rev 7 2 7 16 2 9 1 44 Grevling 0 0 1 7 5 1 1 15 Rein 3 1 2 1 1 0 1 9 Mårhund 0 0 1 0 0 1 0 2 Art Finnmark Troms Nordland Nord- Trøndelag Sør- Trøndelag Rødrev- Elg Andre blandinger 10 0 4 3 2 3 0 22 5 1 2 1 0 4 0 13 Uidentifisert art 62 27 9 64 14 31 4 211 Totalt 115 37 34 106 37 65 12 406 Elg og rødrev er påvist i alle fylker i disse bjørne-negative ekskrementprøvene (Tabell 3). Videre er grevling ikke påvist alene som art i Finnmark og Troms, mens rein ikke er påvist i Hedmark. Mårhund er kun påvist alene som art i Nordland og Hedmark, men viser også i to blandingsprøver med elg fra Hedmark og i en blandingsprøve med rein fra Troms (Appendiks 1). I tillegg viser mårhund i tre prøver i blanding med rødrev, og alle disse prøvene er fra Vest-Finnmark. Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 7

5. Diskusjon Multipleks mtdna assayet for de fem artene gav et entydig resultat med kjente DNAkontroller, og assayet sin sensitivitet var betydelig lavere enn 1 picogram DNA. Assayet var negativt med bjørne-dna, og enkeltvis var alle mtdna-artstestene negative for DNA fra de andre artene. I den gruppen ekskrementer fra innsamlingen i Norge i 2009 som var negative for STRer spesifikke for bjørn, kunne testen påvise andre arter for ca. halvparten av prøvene (195 av 406). Elg (9,2 %) og rødrev (4,5 %) var de hyppigst forekommende forvekslingsartene i innsamlingen. Innsamlingen vi har studert her ser ut til å ha en vesentlig lavere andel ekskrementer fra rødrev enn vi fant i en tilsvarende innsamling i Norge i 2006, som hadde hele 17 % ekskrementer positive for rødrev (Bjervamoen & Eiken 2007). Grevling, rein og mårhund var også representert blant forvekslingsartene, men i mindre antall. I en tilsvarende innsamling i Västerbotten samme år var rødrev vanligere som forvekslingsart enn elg (Eiken et al. 2010), men likevel utgjorde disse to artene til sammen hovedandelen av bestemte arter for bjørne-negative ekskrementer i begge undersøkelsene. En mindre andel av de bjørne-negative prøvene (3,6 %) viste et blandingsresultat, der en kombinasjon av to, og i et tilfelle 3 arter kunne påvises med testen. Ut fra testen alene kan dette resultatet ikke forklares. Det kan være flere ulike årsaker til at flere enn en art forekommer i en slik test, og vi har gjort følgende vurderinger: i) Påvisning av byttedyr i ekskrementer: I en nylig publisert studie er det sannsynliggjort at mtdna fra vertebrat-byttedyr kan påvises som lav-kopi DNA i ekskrementer fra dvergsjimpanse (Pan paniscus) og gorillaer (Gorilla gorilla) (Hofreiter et al. 2010). Tidligere kontrollforsøk med mating av tamme sjøløver viser lignende resultater (Deagle et al. 2005). Ut fra dette tror vi at påviste byttedyr i ekskrementene er den mest sannsynlige årsaken til våre funn av mer enn en art i en mindre andel av prøvene. I så fall er det sannsynliggjort at kjøtteterene i kombinasjon med elg og rein er fra de førstnevnte. Potensielt er da andelen av de tre artene kjøttetere noe høyere enn det Tabell 1 viser, og korrigerer vi for dette blir de summerte resultatene som følger: Rødrev utgjør 6,7 % (n = 44 + 22), grevling utgjør 1,8 % (n = 15 + 3) og mårhund utgjør 0,5 % (n = 2 + 3) av de innsamla ekskrementprøvene. Et lite antall prøver (n = 6) er en kombinasjon mellom disse tre kjøttetende artene, og her kan ikke opphavet bestemmes. I tillegg åpner dette en liten mulighet for at prøver med relativt svake topper av elg og rein allikevel kan være lav kopi DNA tilblandinger av byttedyr i ekskrementer fra brunbjørn, selv om de to STR-testene har vært negative (se material og metoder). Det kan også være snakk om andre kjøttetere som testen ikke inkluderer. I fremtidige mtdna tester bør kanskje et mtdna assay spesifikt for brunbjørn inkluderes i denne type studier, selv om prøvene er negative med vanlig PCR og at risikoen for oversmitting øker (se pkt. ii) under). De fleste resultatene som er positive for elg og rein i denne studien har mye templat DNA renset opp fra ekskrementene (resultater ikke vist), men likevel er mangelen på resultater fra et spesifikt brunbjørn mtdna assay en svakhet ved studien. Det er derfor mulig at andelen av elg og rein kan være litt lavere enn vist i tabell 1, men uten at denne andelen kan bestemmes. I materialet finnes et eksempel på en rein-elg prøve, og en av flere mulige forklaring på en slik prøve kan være forekomst av DNA fra byttedyr i ekskrementet uten at kjøtteter arten er bestemt. 8

ii) iii) Oversmitting i laboratoriet: mtdna foreligger i >1000 ganger så mange kopier som kjerne-dna, og således er risikoen for oversmitting fra andre prøver forhøyet i forhold til vanlig STR-analyse. Kontroller uten DNA kjøres for hver 11. prøve for å ha kontroll med oversmitting. I disse eksperimentene har alle kontroller vært negative. I tillegg har det vært tatt med positive kontroller for hver av de fem artene samt bjørn i hvert eksperiment, uten at tilblanding har vært observert. Eksperimentene utføres adskilt fra annen aktivitet, og de samme rutinene for PCR som for akkrediterte analyser legges til grunn. Vi bruker heller ikke DNA fra de fem nye artene rutinemessig i vårt laboratorium som er spesialisert på brunbjørn. Basert på dette tror vi sannsynligheten for oversmitting er liten, men muligheten kan selvsagt aldri utelukkes helt. Oversmitting ved innsamling: Ved håndtering av blod og vev av andre arter før innsamling av ekskrementer og ved overføring til plastpose kan oversmitting fra annen art være mulig. Teoretisk kan dette forekomme ved slakting av elg /rein og håndtering av kjøtt med påfølgende innsamling av ekskrementer. Oversmitting er en særlig risiko i en slik sammenheng siden vev og blod inneholder mye større mengder DNA enn ekskrementer. Vi tror likevel at sannsynligheten for slik oversmitting er liten med gode innsamlingsrutiner. Samlet viser dette arbeidet at for 768 ekskrementer av de 980 ekskrementene fra innsamlingen fra Norge i 2009 var mulig å bestemme arten (573 brunbjørn og 195 annen art og 1 ikke-ekskrement), dvs. DNA-ekstraksjonen og DNA-analysen har fungert for 78 % av prøvene. De 211 prøvene som gjenstår som uidentifisert art (22 %) i innsamlingen i Norge i 2009 kan være fra andre arter enn de fem vi har undersøkt for her. Prøvene kan også ha så dårlig DNA eller lavt kopitall av DNA at mtdna assayet ikke har fungert. Samme analyse av innsamlingen i Västerbotten samme år viser et noe bedre resultat (92 %), og rødrev som den hyppigste forvekslingsarten i stedet for elg som denne studien viser. Det er vanskelig å spekulere i årsakene til dette, men resultatet kan gjenspeile forskjeller i rutiner i innsamling og lagring av prøver. Det er også en mulighet for at uidentifiserte prøver kan være fra brunbjørn ut fra at mtdna-assayet er en mer sensitiv test enn STR-testene (se også pkt. i) over). En mtdna test for brunbjørn bør derfor også utvikles og brukes i slike studier, selv om dette krever strenge forholdsregler for oversmitting i laboratoriet. Vi mener rapporten viser at mtdna-tester spesifikke for utvalgte arter vil være til nytte for både forvaltning og forskning i fremtiden. Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 9

6. Referanser Bjervamoen S. G. og Eiken H.G 2007. Populasjonsovervåkning av brunbjørn 2005-2008. DNA-test for rødrev (Vulpes vulpes) utført på brunbjørn-negative eksrementprøver fra 2006. Bioforsk rapport 74:1-12. Deagle B.E., Tollit D.J., Jarman S.N., Hindell M.A., Trites A.W., Gales N.J. 2005. Molecular scatology as a tool to study diet: analysis of prey DNA in scats from captive Steller sea lions. Mol Ecol 14:1831-42. Eiken H. G., Andreassen, R. J., Kopatz, A., Bjervamoen, S. G., Wartiainen, I., Tobiassen, C., Knappskog, P. M., Aspholm, P. E., Smith, M. E., Aspi, J. 2009. Population data for 12 STR loci in Northern European brown bear (Ursus arctos) and application of DNA profiles for forensic casework. Forensic Science International: Genetic Supplement Series 2:273-274. Eiken H.G., Bergsvåg M., Knappskog P.M., Aarnes S.G., Aspholm P.E., Wartiainen I., Hagen S.B. 2010. Utvikling av en multipleks mitokondrie-dna-test spesiifikk for elg, rein, rødrev, mårhund og grevling. Analyse av 344 ekskrementer negative for brunbjørn-dna fra innsamlingen til overvåkning av brunbjørn i Västerbotten i 2009. Bioforsk rapport 126:1-21. Hofreiter M., Kreuz E., Eriksson J., Schubert G., Hohmann G. 2010. Vertebrate DNA in fecal samples from Bonobos and Gorillas: Evidence for meat consumption or artefact? PLoS ONE 5(2): e9419. doi:10.1371/journal.pone.0009419. Tobe S. S. and Linacre A.M. 2008. A multiplex assay to identify 18 European mammal species from mixtures using the mitochondrial cytochrome b gene. Electrophoresis 29:340-347. Wartiainen, I., Tobiassen, C., Brøseth, H., Bergsvåg M, Aarnes S. G., Eiken, H. G. 2010. Populasjonsovervåkning av brunbjørn 2009-2012: DNA analyse av prøver samlet i Norge i 2009. Bioforsk rapport 58: 1-51. 10

7. Appendiks 1 Appendix 1. Artsspesifikk mtdna-analyse av 406 brunbjørn-negative prøver fra innsamlingen i Norge i 2009. Svanhovd ID Strekkode Resultat Tilblanding FunnDato År Fylke (-09) BF001 B00013894 Rev Elg 21.04.2009 2009 Øst Finnmark BF004 B00013865 Elg 25.04.2009 2009 Øst Finnmark BF006 B00013867 Elg 25.04.2009 2009 Øst Finnmark BF007 B00013868 Elg 25.04.2009 2009 Øst Finnmark BF009 B00012939 N 27.04.2009 2009 Troms BF013 B00012943 N 27.04.2009 2009 Troms BF020 B00011677 Elg 29.04.2009 2009 Øst Finnmark BF028 B00013878 N 30.04.2009 2009 Øst Finnmark BF035 B00011699 Rev 02.05.2009 2009 Øst Finnmark BF039 B00011703 N 02.05.2009 2009 Øst Finnmark BF046 B00011710 Elg 02.05.2009 2009 Øst Finnmark BF051 B00011726 Elg 02.05.2009 2009 Øst Finnmark BF053 B00011711 Elg 03.05.2009 2009 Øst Finnmark BF057 B00011113 N 15.05.2009 2009 Troms BF058 B00011889 N 15.05.2009 2009 Troms BF060 B00011891 N 15.05.2009 2009 Troms BF063 B00013911 N 07.05.2009 2009 Øst Finnmark BF064 B00013912 N 07.05.2009 2009 Øst Finnmark BF067 B00013909 Elg 16.05.2009 2009 Øst Finnmark BF070 B00012821 Elg 24.05.2009 2009 Øst Finnmark BF071 B00018590 N 24.05.2009 2009 Øst Finnmark BF072 B00012802 Elg 24.05.2009 2009 Øst Finnmark Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 11

BF073 B00018591 Elg 24.05.2009 2009 Øst Finnmark BF074 B00012822 Elg 24.05.2009 2009 Øst Finnmark BF077 B00012808 N 24.05.2009 2009 Øst Finnmark BF082 B00011731 Rev Elg 24.05.2009 2009 Øst Finnmark BF083 B00011732 Rev 24.05.2009 2009 Øst Finnmark BF084 B00011733 Rev Elg 25.05.2009 2009 Øst Finnmark BF085 B00011734 Elg 02.06.2009 2009 Øst Finnmark BF088 B00011672 N 03.06.2009 2009 Øst Finnmark BF086 B00011735 Elg 02.06.2009 2009 Øst Finnmark BF090 B00011737 Rev 17.06.2009 2009 Øst Finnmark BF091 B00011741 Elg 16.06.2009 2009 Øst Finnmark BF093 B00011738 Rev Elg 05.06.2009 2009 Øst Finnmark BF094 B00011686 N 24.06.2009 2009 Øst Finnmark BF097 B00011692 N 24.06.2009 2009 Øst Finnmark BF099 B00011681 N 24.06.2009 2009 Øst Finnmark BF103 B00011690 N 24.06.2009 2009 Øst Finnmark BF111 B00012843 N 29.06.2009 2009 Øst Finnmark BF112 B00012662 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF113 B00012800 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF114 B00012663 N 29.06.2009 2009 Øst Finnmark BF115 B00012600 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF116 B00012801 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF117 B00012661 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF118 B00012664 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF121 B00012824 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF122 B00012583 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF123 B00012794 N 22.06.2009 2009 Øst Finnmark BF125 B00012841 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF127 B00012599 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark BF129 B00012840 N 27.06.2009 2009 Øst Finnmark 12

BF130 B00012587 N 21.06.2009 2009 Øst Finnmark BF132 B00016110 Elg 14.06.2009 2009 Sør Trøndelag BF133 B00012114 N 23.05.2009 2009 Sør Trøndelag BF135 B00012116 N 22.05.2009 2009 Sør Trøndelag BF143 B00011791 N 10.07.2009 2009 Øst Finnmark BF144 B00013886 N 13.07.2009 2009 Øst Finnmark BF145 B00013887 N 13.07.2009 2009 Øst Finnmark BF146 B00011794 N 11.07.2009 2009 Øst Finnmark BF147 B00011795 N 10.07.2009 2009 Øst Finnmark BF148 B00011796 N 15.07.2009 2009 Øst Finnmark BF149 B00011770 N 18.07.2009 2009 Øst Finnmark BF150 B00011771 N 20.07.2009 2009 Øst Finnmark BF151 B00011772 N 19.07.2009 2009 Øst Finnmark BF152 B00011773 N 17.07.2009 2009 Øst Finnmark BF157 B00014433 Elg 08.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF158 B00014434 Elg 08.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF160 B00014307 Elg 20.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF166 B00015812 N 21.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF167 B00011687 Elg 23.07.2009 2009 Øst Finnmark BF168 B00011778 Elg 23.07.2009 2009 Øst Finnmark BF169 B00011779 Elg 23.07.2009 2009 Øst Finnmark BF170 B00013890 N 27.07.2009 2009 Øst Finnmark BF174 B00100954 N 27.07.2009 2009 Øst Finnmark BF186 B00100819 N 14.08.2009 2009 Øst Finnmark BF187 B00100816 N 19.08.2009 2009 Øst Finnmark BF188 B00100817 N 19.08.2009 2009 Øst Finnmark BF189 B00100818 Elg 19.08.2009 2009 Øst Finnmark BF190 B00100822 Elg 19.08.2009 2009 Øst Finnmark BF192 B00100823 Elg 19.08.2009 2009 Øst Finnmark BF193 B00100824 Elg 09.08.2009 2009 Øst Finnmark Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 13

BF198 B00011685 Elg 25.08.2009 2009 Øst Finnmark BF199 B00100826 N 27.08.2009 2009 Øst Finnmark BF201 B00100828 N 27.08.2009 2009 Øst Finnmark BF205 B00100839 Elg 22.08.2009 2009 Øst Finnmark BF206 B00100838 Elg 22.08.2009 2009 Øst Finnmark BF207 B00100837 Elg 22.08.2009 2009 Øst Finnmark BF214 B00100842 N 13.09.2009 2009 Øst Finnmark BF215 B00100843 N 14.09.2009 2009 Øst Finnmark BF217 B00014848 Rein 20.05.2009 2009 Nordland BF218 B00014842 N 08.07.2009 2009 Nordland BF219 B00014844 Rev 23.07.2009 2009 Nordland BF221 B00010881 N 14.08.2009 2009 Nordland BF222 B00014841 N 16.08.2009 2009 Nordland BF223 B00003595 Rein 22.08.2009 2009 Nordland BF224 B00014847 Elg 23.08.2009 2009 Nordland BF225 B00014873 N 24.08.2009 2009 Nordland BF226 B00014875 N 26.08.2009 2009 Nordland BF227 B00014871 N 26.08.2009 2009 Nordland BF228 B00014880 N 31.08.2009 2009 Nordland BF231 B00014865 Elg 04.09.2009 2009 Nordland BF232 B00014864 Elg 04.09.2009 2009 Nordland BF233 B00014831 Rev 06.09.2009 2009 Nordland BF234 B00015215 Rev Elg 24.05.2009 2009 Sør Trøndelag BF236 B00012108 N 27.06.2009 2009 Sør Trøndelag BF237 B00015210 N 28.06.2009 2009 Sør Trøndelag BF238 B00015191 N 06.07.2009 2009 Sør Trøndelag BF239 B00015192 Rev 07.07.2009 2009 Sør Trøndelag BF240 B00016223 N 09.07.2009 2009 Sør Trøndelag BF242 B00015207 N 04.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF243 B00015224 Elg 07.08.2009 2009 Sør Trøndelag 14

BF244 B00015209 N 07.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF245 B00015217 Elg 07.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF246 B00015208 Elg 06.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF247 B00015206 Elg 18.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF248 B00015205 Elg 18.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF249 B00016210 Elg 18.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF252 B00015202 Elg 24.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF254 B00015201 Elg 28.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF255 B00015216 Rein 29.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF256 B00015212 N 06.09.2009 2009 Sør Trøndelag BF258 B00011474 Elg 20.09.2008 2008 Sør Trøndelag BF265 B00012932 N 27.07.2009 2009 Troms BF266 B00010747 Rein / Mårhund 10.08.2009 2009 Troms BF267 B00012931 N 27.07.2009 2009 Troms BF268 B00010748 N 10.08.2009 2009 Troms BF269 B00010750 N 10.08.2009 2009 Troms BF270 B00012955 Rein 10.08.2009 2009 Troms BF271 B00010754 N 10.08.2009 2009 Troms BF272 B00010751 N 10.08.2009 2009 Troms BF273 B00010749 N 10.08.2009 2009 Troms BF274 B00010752 N 10.08.2009 2009 Troms BF279 B00100854 N 17.09.2009 2009 Øst Finnmark BF281 B00014665 Elg / Grevling 20.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF286 B00016255 N 20.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF290 B00015796 N 13.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF291 B00015814 N 25.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF292 B00016254 N 07.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF294 B00016253 N 02.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF295 B00015795 N 10.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF296 B00023123 N 01.08.2009 2009 Nord Trøndelag Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 15

BF299 B00015801 N 20.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF304 B00014454 N 16.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF307 B00015793 Rev 08.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF308 B00014453 N 16.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF312 B00014457 N 19.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF313 B00017379 N 13.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF314 B00014455 N 19.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF315 B00023006 Elg 07.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF318 B00014452 N 14.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF321 B00023028 Elg 07.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF323 B00013194 N 19.05.2009 2009 Nord Trøndelag BF324 B00017365 N 04.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF326 B00014311 N 14.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF328 B00015820 Rev 19.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF330 B00014465 Rev 29.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF331 B00014472 N 29.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF332 B00014451 N 27.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF342 B00013190 N 13.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF344 B00023002 Elg 07.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF348 B00023126 Rev 14.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF352 B00016252 N 11.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF353 B00016256 N 07.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF354 B00016257 N 11.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF355 B00014657 Elg 02.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF360 B00014466 Elg 25.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF361 B00014308 N 07.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF362 B00014881 N 30.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF366 B00016269 N 06.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF368 B00016265 N 15.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF369 B00016261 N 27.07.2009 2009 Nord Trøndelag 16

BF372 B00016262 N 15.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF381 B00014667 N 31.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF383 B00014467 N 28.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF384 B00016233 Rev 27.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF389 B00014656 Rev 02.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF394 B00014659 Rev 04.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF397 B00014668 Rev 31.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF399 B00016251 N 13.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF400 B00023124 Rev 14.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF401 B00014658 Rev 04.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF408 B00013914 N 20.07.2009 2009 Øst Finnmark BF409 B00012810 N 21.07.2009 2009 Øst Finnmark BF412 B00012674 Rev 10.08.2009 2009 Øst Finnmark BF413 B00012672 N 10.08.2009 2009 Øst Finnmark BF415 B00012676 Rein 26.08.2009 2009 Øst Finnmark BF416 B00012677 Rein 26.08.2009 2009 Øst Finnmark BF417 B00012680 N 13.07.2009 2009 Øst Finnmark BF418 B00012679 N 07.07.2009 2009 Øst Finnmark BF419 B00012681 N 17.07.2009 2009 Øst Finnmark BF422 B00011255 N 11.06.2009 2009 Hedmark BF427 B00015079 Elg 13.08.2009 2009 Hedmark BF429 B00014612 N 11.07.2009 2009 Hedmark BF430 B00014609 N 23.07.2009 2009 Hedmark BF431 B00016487 N 21.08.2009 2009 Hedmark BF432 B00014607 N 06.08.2009 2009 Hedmark BF433 B00014610 Elg 17.07.2009 2009 Hedmark BF435 B00015030 N 28.07.2009 2009 Hedmark BF436 B00014605 N 22.07.2009 2009 Hedmark BF437 B00014611 Elg 17.07.2009 2009 Hedmark BF438 B00015078 N 08.09.2009 2009 Hedmark Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 17

BF441 B00014604 N 30.06.2009 2009 Hedmark BF443 B00011256 N 11.06.2009 2009 Hedmark BF444 B00015230 Elg 02.07.2009 2009 Hedmark BF445 B00000426 N 10.04.2009 2009 Hedmark BF446 B00000427 N 10.04.2009 2009 Hedmark BF450 B00003934 Elg 20.07.2009 2009 Hedmark BF453 B00015031 Elg 29.07.2009 2009 Hedmark BF454 B00011257 Elg / Mårhund 17.06.2009 2009 Hedmark BF457 B00015012 Grevling 02.08.2009 2009 Hedmark BF458 B00016134 Elg 23.03.2009 2009 Hedmark BF461 B00005477 Rev 30.08.2009 2009 Hedmark BF462 B00015278 Elg 21.08.2009 2009 Hedmark BF463 B00015878 N 19.07.2009 2009 Hedmark BF464 B00007051 Rev 08.10.2007 2007 Hedmark BF465 B00003888 N 14.08.2009 2009 Hedmark BF471 B00014606 N 06.08.2009 2009 Hedmark BF472 B00015876 N 19.07.2009 2009 Hedmark BF475 B00006006 Elg 08.10.2007 2007 Hedmark BF476 B00003313 Rev 12.05.2009 2009 Hedmark BF478 B00006007 Rev (Elg) 05.10.2007 2007 Hedmark BF480 B00000791 Rev 25.09.2007 2007 Hedmark BF481 B00015014 N 29.07.2009 2009 Hedmark BF482 B00014615 Elg 17.08.2009 2009 Hedmark BF483 B00015013 N 13.08.2009 2009 Hedmark BF486 B00003312 Elg 15.04.2009 2009 Hedmark BF489 B00015232 Elg 10.08.2009 2009 Hedmark BF491 B00014608 N 07.07.2009 2009 Hedmark BF492 B00003311 N 15.04.2009 2009 Hedmark BF494 B00003935 Elg 20.07.2009 2009 Hedmark BF497 B00016485 Mårhund 25.08.2009 2009 Hedmark 18

BF499 B00000793 Rev 17.09.2007 2007 Hedmark BF501 B00000425 N 09.04.2009 2009 Hedmark BF506 B00019052 N 27.09.2009 2009 Øst Finnmark BF508 B00019048 N 25.09.2009 2009 Øst Finnmark BF510 B00100831 N 28.09.2009 2009 Øst Finnmark BF511 B00100861 Elg 19.09.2009 2009 Øst Finnmark BF518 B00100864 N 05.10.2009 2009 Øst Finnmark BF529 B00012703 N 10.09.2009 2009 Vest Finnmark BF543 B00011452 N 25.09.2009 2009 Øst Finnmark BF544 B00012585 N 29.09.2009 2009 Troms BF562 B00012598 N 12.08.2009 2009 Øst Finnmark BF564 B00012597 N 12.08.2009 2009 Øst Finnmark BF566 B00012574 Rev 26.10.2009 2009 Øst Finnmark BF581 B00013919 Elg / Rein 07.09.2009 2009 Øst Finnmark BF582 B00013933 Rein 12.09.2009 2009 Øst Finnmark BF583 B00013922 Elg 10.09.2009 2009 Øst Finnmark BF584 B00013934 Elg Rev 21.09.2009 2009 Øst Finnmark BF585 B00013936 Grevling Elg 08.10.2009 2009 Øst Finnmark BF586 B00018563 Rev / Elg 11.05.2009 2009 Vest Finnmark BF588 B00014780 Rev / Elg 03.09.2009 2009 Vest Finnmark BF591 B00018783 Rev 14.09.2009 2009 Vest Finnmark BF592 B00018781 Rev Elg 15.09.2009 2009 Vest Finnmark BF593 B00018782 Rev Elg 14.09.2009 2009 Vest Finnmark BF594 B00017762 Rev Mårhund 02.10.2009 2009 Vest Finnmark BF595 B00017751 Rev Elg / Mårhund 05.09.2009 2009 Vest Finnmark BF596 B00017750 Rev Mårhund 05.09.2009 2009 Vest Finnmark BF600 B00003287 N 10.04.2009 2009 Hedmark BF604 B00010583 N 22.06.2009 2009 Hedmark BF609 B00003284 Elg 07.04.2009 2009 Hedmark BF610 B00003913 Rev 07.08.2008 2008 Hedmark Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 19

BF621 B00010584 N 20.06.2009 2009 Hedmark BF622 B00006643 Grevling 24.09.2009 2009 Oppland BF624 B00006689 Rev 25.08.2009 2009 Oppland BF626 B00016052 N 20.09.2009 2009 Oppland BF629 B00016050 Rein 15.09.2009 2009 Oppland BF630 B00006685 N 01.05.2009 2009 Oppland BF632 B00006686 Grevling 06.08.2008 2008 Oppland BF633 B00006684 Elg 10.05.2009 2009 Oppland BF635 B00016051 Elg 04.09.2009 2009 Oppland BF636 B00016032 N 07.08.2009 2009 Oppland BF637 B00016031 Elg 08.09.2009 2009 Oppland BF638 B00016036 Elg 27.09.2009 2009 Oppland BF639 B00016037 Elg 20.09.2009 2009 Oppland BF642 B00016033 N 20.08.2009 2009 Oppland BF653 B00011900 Elg 18.09.2009 2009 Troms BF657 B00010499 Elg 16.08.2009 2009 Troms BF659 B00018040 Rev 27.09.2009 2009 Troms BF660 B00018483 Rev 10.09.2009 2009 Troms BF663 B00011870 N 25.07.2009 2009 Troms BF664 B00010289 N 25.07.2009 2009 Troms BF666 B00010287 Elg 30.07.2009 2009 Troms BF669 B00010288 N 16.08.2009 2009 Troms BF673 B00011901 Elg 18.09.2009 2009 Troms BF677 B00011912 N 09.09.2009 2009 Troms BF681 B00018484 N 07.08.2009 2009 Troms BF682 B00018079 N 26.09.2009 2009 Troms BF684 B00018091 N 26.09.2009 2009 Troms BF687 B00011911 N 04.07.2009 2009 Troms BF691 B00011871 N 25.07.2009 2009 Troms BF694 B00011903 N 15.09.2009 2009 Troms 20

BF698 B00017445 N 06.07.2009 2009 Troms BF700 B00011910 N 12.07.2009 2009 Troms BF702 B00018102 Elg 18.10.2009 2009 Troms BF706 B00018341 Elg 28.09.2009 2009 Troms BF707 B00011904 N 15.09.2009 2009 Troms BF711 B00021392 Grevling 15.06.2009 2009 Sør Trøndelag BF713 B00012125 Elg 08.09.2009 2009 Sør Trøndelag BF714 B00003207 Grevling 10.10.2009 2009 Sør Trøndelag BF716 B00012127 Grevling 10.09.2009 2009 Sør Trøndelag BF717 B00003204 Elg 03.11.2009 2009 Sør Trøndelag BF718 B00021391 Rev Elg 19.09.2009 2009 Sør Trøndelag BF723 B00003203 Grevling 28.09.2009 2009 Sør Trøndelag BF725 B00003208 Rev 15.09.2009 2009 Sør Trøndelag BF727 B00012126 N 19.09.2009 2009 Sør Trøndelag BF728 B00012012 N 20.08.2009 2009 Sør Trøndelag BF729 B00003223 Elg 04.10.2009 2009 Sør Trøndelag BF730 B00021360 N 15.07.2009 2009 Sør Trøndelag BF732 B00012128 Elg 23.05.2009 2009 Sør Trøndelag BF733 B00021340 N 26.09.2009 2009 Sør Trøndelag BF735 B00003249 Grevling 03.11.2009 2009 Sør Trøndelag BF736 B00033042 N 12.09.2009 2009 Sør Trøndelag BF747 B00016383 Rev 26.09.2009 2009 Hedmark BF750 B00003030 Rev Elg 08.09.2009 2009 Hedmark BF751 B00015430 Rev Elg 29.09.2009 2009 Hedmark BF752 B00030501 Rev 23.09.2009 2009 Hedmark BF756 B00032688 Rev 19.10.2009 2009 Hedmark BF757 B00015076 N 24.09.2009 2009 Hedmark BF759 B00015038 Elg 09.10.2009 2009 Hedmark BF762 B00030525 N 27.09.2009 2009 Hedmark BF763 B00003029 Rev Grevling 30.08.2009 2009 Hedmark Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 21

BF765 B00030226 N 25.07.2009 2009 Hedmark BF767 B00015039 Elg Rev 15.10.2009 2009 Hedmark BF772 B00030505 Rev 31.08.2009 2009 Hedmark BF776 B00015040 Elg 01.07.2006 2006 Hedmark BF777 B00003035 Rev 03.09.2009 2009 Hedmark BF778 B00015231 Elg 14.09.2009 2009 Hedmark BF780 B00011276 N 01.10.2009 2009 Hedmark BF784 B00030345 Elg 08.10.2009 2009 Hedmark BF787 B00030232 N 04.07.2009 2009 Hedmark BF788 B00031920 N 26.09.1009 2009 Hedmark BF792 B00015277 Grevling Elg 15.09.2009 2009 Hedmark BF796 B00030202 N 29.09.2009 2009 Hedmark BF802 B00016167 Grevling 10.10.2008 2008 Hedmark BF803 B00030344 Elg Mårhund 08.10.2009 2009 Hedmark BF806 B00000698 Rev 11.09.2009 2009 Hedmark BF809 B00030788 Rev 26.09.2009 2009 Hedmark BF811 B00014849 Rev Elg 09.09.2009 2009 Nordland BF812 B00023791 N 13.09.2009 2009 Nordland BF813 B00023768 Rev Grevling 17.09.2009 2009 Nordland BF814 B00023789 Rev 05.11.2009 2009 Nordland BF815 B00023792 Rev 17.09.2009 2009 Nordland BF816 B00023769 Elg 13.09.2009 2009 Nordland BF818 B00014872 Rev 15.09.2009 2009 Nordland BF820 B00014862 Rev Elg 16.09.2009 2009 Nordland BF821 B00014858 N 16.09.2009 2009 Nordland BF822 B00003584 Elg 02.10.2009 2009 Nordland BF824 B00014874 Grevling 04.08.2009 2009 Nordland BF825 B00023790 Elg 11.08.2009 2009 Nordland BF826 B00014857 Elg 03.09.2009 2009 Nordland BF827 B00023795 Rev Elg 06.08.2009 2009 Nordland 22

BF835 B00019957 N 26.04.2009 2009 Nord Trøndelag BF853 B00023217 N 26.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF854 B00023216 N 04.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF856 B00023207 N 11.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF857 B00023223 Rein 16.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF859 B00023206 N 04.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF860 B00023208 N 13.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF864 B00023224 N 16.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF865 B00014413 N 05.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF866 B00014332 Elg 29.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF870 B00023228 N 16.10.2009 2009 Nord Trøndelag BF873 B00023229 Rev Elg 17.10.2009 2009 Nord Trøndelag BF877 B00023142 N 19.10.2009 2009 Nord Trøndelag BF884 B00014324 Elg 05.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF887 B00016525 N 20.05.2009 2009 Nord Trøndelag BF889 B00023032 N 23.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF892 B00023135 N 17.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF903 B00023204 N 24.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF907 B00023201 N 28.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF909 B00023212 N 17.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF913 B00023214 Grevling 06.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF915 B00014891 N 21.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF917 B00023209 N 04.10.2009 2009 Nord Trøndelag BF921 B00019807 Elg 21.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF933 B00014889 N 21.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF937 B00014328 N 15.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF938 B00014316 Elg 14.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF940 B00014318 N 12.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF948 B00014317 N 12.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF949 B00014885 N 10.08.2009 2009 Nord Trøndelag Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 23

BF950 B00016273 N 16.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF952 B00023138 N 17.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF954 B00023145 N 19.06.2009 2009 Nord Trøndelag BF956 B00016969 Elg 22.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF963 B00023076 Rev 08.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF965 B00017404 N 17.10.2009 2009 Nord Trøndelag BF970 B00017407 N 29.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF971 B00023233 Rev 13.10.2009 2009 Nord Trøndelag BF972 B00017346 N 24.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF973 B00023235 Rev 27.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF974 B00023234 Rev 20.10.2009 2009 Nord Trøndelag BF975 B00023232 Grevling 18.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF976 B00023230 Rev 18.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF977 B00023255 N 12.07.2009 2009 Nord Trøndelag BF978 B00023080 Rev Elg 02.11.2009 2009 Nord Trøndelag BF979 B00013595 Grevling 16.11.2009 2009 Nord Trøndelag BF980 B00023077 Rev Elg 02.11.2009 2009 Nord Trøndelag BF982 J00008716 Grevling 12.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF983 B00023231 Rev 20.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF985 B00014499 N 12.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF986 B00014500 Grevling 12.08.2009 2009 Nord Trøndelag BF987 B00023078 Elg 02.11.2009 2009 Nord Trøndelag BF989 B00023254 Grevling 18.09.2009 2009 Nord Trøndelag BF991 B00100873 N 19.11.2009 2009 Øst Finnmark BF994 B00012687 Rev 13.09.2009 2009 Øst Finnmark BF997 B00023760 Rev 23.08.2009 2009 Nordland BF998 B00010705 Mårhund 14.06.2009 2009 Nordland BF1000 B00010706 Elg 20.07.2009 2009 Nordland BF1001 B00023761 Rev Grevling 15.09.2009 2009 Nordland BF1002 B00023759 Rev / Elg 01.09.2009 2009 Nordland 24

BF1003 B00023799 Rev 27.09.2009 2009 Nordland BF1004 B00014742 Rev Elg 18.09.2009 2009 Vest Finnmark BF1005 B00014741 N 16.09.2009 2009 Vest Finnmark BF1006 B00013504 Grevling 06.09.2009 2009 Nord Trøndelag Eiken et al. Bioforsk Rapport vol. 5 nr. 191 2010 25