Resistensbestemmelse av gonokokker. Martin Steinbakk Avd. for bakteriologi og infeksjonsimmunologi, Div. for smittevern, FHI

Transkript

1 Resistensbestemmelse av gonokokker Martin Steinbakk Avd. for bakteriologi og infeksjonsimmunologi, Div. for smittevern, FHI

2 Neisseria gonorrhoeae G-negativ diplokokk Kravstor 11 arter Neisseria koloniserer mennesket. Bare 2 er ordinære patogene meningokokker og gonokokker N. gonorrhoeae forårsaker gonoré som gir en seksuelt overførbar infeksjon (SOI) som på norsk også kalles «dryppert» (engelsk "The Clap," which is derived from the French word "clapier," meaning "brothel")

3 Noen «spesielle» egenskaper hos gonokokker Gir lite («ingen?») immunitet Reinfeksjon mulig (og vanlig i enkelte miljø) Fakultativ intracellulær mikrobe Finnes ofte både ekstra og intracellulært ved infeksjon Genoverføring mellom gonokokker og til/fra andre mikrober vanlig Transformasjon og konjugasjon Det er observert horisontal genoverføring fra menneske til gonokokker N. gonorrhoeae has surface proteins called Opa proteins, which bind to receptors on immune cells. In so doing, N. gonorrhoeae is able to prevent an immune response. The host is also unable to develop an immunological memory against N. gonorrhoeae which means that future reinfection is possible. N. gonorrhoeae can also evade the immune system through a process called antigenic variation, in which the N. gonorrhoeae bacterium is able to alter the Opa proteins that adorn its surface. The many permutations of surface proteins make it more difficult for immune cells to recognize N. gonorrhoeae and mount a defense

4 Antall tilfeller av gonore i Norge etter smittemåte Homosex menn Heterosex menn Heterosex kvinner Totalt 368 meldte tilfelle

5 ** Kvinne Mann * 485 Totalt *347 (61%) MSM, **Data per 1/

6 Antall tilfeller Gonore blant menn som har sex med menn i Norge. Meldt MSIS : Median alder 31 (18-65), 71 % smittet i Oslo 2010: Median alder 31 (16-66), 73 % smittet i Oslo 2009: Median alder 32 (18-64), 71 % smittet i Oslo

7 Gonore i Norge etter bostedsfylke - meldt MSIS Fylke Tot % Rate Østfold ,0 34,0 Akershus ,4 63,0 Oslo ,4 275,7 Hedmark ,6 9,5 Oppland ,8 13,3 Buskerud ,6 31,3 Vestfold ,8 38,6 Telemark ,1 17,6 Aust-Agder ,9 26,0 Vest-Agder ,5 26,9 Rogaland ,4 41,9 Hordaland ,4 54,5 Sogn og Fjordane ,8 21,8 Møre og Romsdal ,0 23,3 Sør-Trøndelag ,7 40,0 Nord-Trøndelag ,6 12,3 Nordland ,4 28,3 Troms ,5 47,3 Finnmark ,0 40,0 Total ,0 63,5

8 Meldte tilfeller av gonore 2001 tom 1/ Fylke Østfold Akershus Oslo Hedmark Oppland Buskerud Vestfold Telemark Aust-Agder Vest-Agder Rogaland Hordaland Sogn og Fjordane Møre og Romsdal Sør-Trøndelag Nord-Trøndelag Nordland Troms Finnmark Totalt

9 Smittested perioden Smittested Norge Ukjent Utlandet Totalt

10

11 Resistensforhold Gonore meldt MSIS (tom) Ukjent PPNG+kinolon PPNG Kinolon Ingen

12 Gonore hos MSM etter påvisningsmetode meldt MSIS Nukleinsyrepåvisning (PCR, LCR mv) Mikroskopi Dyrkning

13 Overvåkning av antibiotikaresistens og epidemiologi i Norge til nå Antibiotikaresistens NORM 2005 og 2010 og årlig fra 2013 Norge deltar i EURO-GASP via Mikrobiologisk avdeling, OUS Ullevål EURO-GASP (European Gonococcal Antimicrobial Surveillance Program) Epidemiologi Anonym melding til MSIS (personbasert) Ingen molekylær stammekarakterisering FHI tildelt referansefunksjon for gonokokker fra sept 2015, aktiv fra 1/1-16

14

15

16 S R

17

18

19

20

21 Sterkt reduserte muligheter for behandling av gonore Penicilliner Betalaktamase+ og endret PBP. Nesten ingen isolater S (<5%) Tetracykliner >60% resistens (< 20% S) Kinoloner (Ciprofloxacin) >60% resistens (<40% S) Makrolider Bare azitromycin aktuelt (og nå anbefalt av WHO), men < 60% S Spectinomycin Fortsatt aktivt, men vanskelig å få tak i. Resistensutvikling et problem Cefalosporiner Ceftriaxon im. eller iv. (orale cefalosporiner duger ofte ikke) Ceftriaxon 99% S, Cefixim 88% S

22 2012 Guidelines Gc 2012 European Guideline on the Diagnosis and Treatment of Gonorrhoea in Adults Revision date: 1 November 2012 Proposed date for review: 1 November 2014 Recommended treatments for uncomplicated N. gonorrhoeae infections of the urethra, cervix and rectum in adults and adolescents when the antimicrobial sensitivity of the infection is unknown. Ceftriaxone 500 mg intramuscularly (IM) as a single dose together with azithromycin 2 g as single oral dose Nasjonal retningslinje for antibiotikabruk i primærhelsetjenesten (kommer snart) Ceftraixon 0,5 g i.m.

23 Ønsket opplegg f.o.m Alle funn meldes MSIS som tidligere Ønske om Nominativ meldeplikt Alle isolat samles nasjonalt Resistensbestemmelse Utføres ved FHI og OUS Ullevål (egne isolat) OBS! Isolat følges med personopplysninger Det utarbeides metode for dyrkning av alle NAAT-positive prøver Samarbeid med OUS - Kan Eswab i Amies medium brukes!? Epidemiologisk karakterisering av isolater utføres ved FHI MLST, porb sekvensering og WGS som mål Det etableres nasjonal stammebank

24 Resistensbestemmelse Medium GC agar base (BD) 1% isovitalex Inokulum 0,5 McFarland i MH buljong (swab og rotator) Inkubering 35 ºC, CO2, t Fra Ringtest-rapport 2013 Når det gjelder resistensbestemmelse er det uklart hvilke medier som er benyttet ved de ulike laboratoriene. OUS, Ullevål benytter GC agar base med 1% Vitox (etter anbefaling fra WHO Collaborating Centre for Gonorrhoea & Other STIs, National Reference Laboratory for Pathogenic Neisseria, Örebro University Hospital, SE Örebro, Sweden). Erfaringen er at andre medier ofte ikke påviser lavgradig resistens mot 3. generasjons cefalosporiner (Gaute Syversen, personlig meddelelse). Slik resistens skyldes oftest mutasjoner i pena-genet (som koder for PBP2), men også andre mekanismer kan være årsak til cefalosporin-resistens.

25

26

27 Lab Penicillin G MIC Ampicillin MIC Cefotaxim MIC Ceftriaxon MIC Cefixim MIC Ciprofloxacin MIC Ofloxacin MIC Azitromycin MIC Tetracyklin MIC Spectinomycin MIC Erytromycin MIC Doxycyklin MIC Aztreonam MIC Betalaktamase Tabell Resistensbestemmelse N. gonorrhoeae 1 S 0,125 S 0,047 S 0,006 R 8 S 0,5 S 0,5 2 R 2 R R 0,25 S 0,125 S 0,032 R >32 I 1 S 32 3 I 0,25 S 0,016 S 0,016 R >32 R 1 S 8 4 I 0,5 R 0,25 R 0,125 R 16 S 0,25 R 2 Neg 5 R 1,5 R 0,75 S 0,047 S 0,047 R 16 R 2 6 I 1 I S 0,064 R >=32 R 4 S 8 R I 0,5 Neg 7 I 0,5 S 0,032 R 4 Neg 8 9 I S 0,032 S 0,064 R 4 I 0,5 R 2 S 16 Neg R 2 R 0,25 R 0,25 R >32 R 1 R 3 S 16 Neg 12 I 1 I R 0,25 S 0,06 R >32 I 0,5 I 1 R 8 Neg 13 I 1 R 0,25 S 0,25 R >32 I 0,38 R 1,5 Neg 14 I 0,25 S 0,004 S 0,016 R 32 R 1 S 4 Neg 15 I 1 R 0,25 R R 32 I 1 Neg 16 R 2 R 0,125 R >32 Neg 17 S 0,5 S 0,016 R 12 Neg 18 R 2 R S <0,016 R >32 Neg 19 I 0,5 I R 0,25 S 0,032 R 8 I 0,5 R 2 S 8 Neg 20 I 0,5 I S 0,125 S <0,016 S 0,0064 R 8 S 0,25 I 1 Neg 21 I 0,5 I 0,75 S 0,016 R 16 I 0,38 S 3 22 I 0,5 I 0,125 R 0,25 R 8 S 0,25 R 2 Neg 23 I 0,5 I S 0,047 R >32 I 0,5 R 2 S 12 Neg 24 R 2 R S 0,125 R 0,5 R 32 S 16 Neg OUS/FHI R 2 R 0,25 R 0,5 R >32 R 1 R 4 S 16 Neg

28 Penicillin G MIC 2 mg/l Ceftriaxon MIC 0,25 mg/l Cefixim MIC 0,5 mg/l

29

30 Beta-laktamasetest Nitrocefin Kløverblad Acidometrisk agar