VRE-utbrudd ved St.Olavs Hospital Vancomycinresistente enterokokker. Smittevern St. Olavs Hospital HF

Transkript

1 VRE-utbrudd ved St.Olavs Hospital Vancomycinresistente enterokokker Marthe Lind Kroknes Spesialbioingeniør Andreas Radtke Smittevernlege Smittevern St. Olavs Hospital HF

2 Enterokokker Enterokokker er i den normale tarmfloraen hos alle mennesker Kan utvikle resistens av ulike årsaker Antibiotikapress er ofte utløsende årsak Gir som regel ikke sykdom hos friske mennesker Stigende antall nosokomiale infeksjoner siden 1970-tallet Årsak til UVI, bakteriemi og postoperative infeksjoner, endokarditt Danner biofilm på fremmedlegemer (implantater)

3 Resistente mikrober Vanskeliggjør behandling ved infeksjon Økt dødelighet Kan bli en del av sykehusfloraen ved manglende tiltak Etterlevelse av basale smittevernrutiner, smitteisoleringsprosedyrer og antibiotikapolitikk er essensielt

4 Glykopeptidresistens hos Enterokokker Type av glykopeptidresistens VanA VanB VanC Vancomycin Teikoplanin R R R S S/R S Distribusjon blant Enterococcus spp. E. faecalis E. faecium E. avium E. durans E. hirae E. casseliflavus E. gallinarum E. faecalis E. faecium E. durans E. gallinarum E. casseliflavus E. gallinarum Genotype vana vanb vanc

5 Vancomycinresistens VanA høygradig resistens VanB middels resistens VanC lavgradig resistens VanA - og VanB-gen sitter ofte på plasmider, «hoppegener» som er overførbar smitteproblematikk VanC-gen kromosomal ikke smitteproblematikk i samme grad

6 VRE screening: Innleggelse på sykehus i utlandet (utenom Norden) de siste 12 måneder, helseinstitusjon med kjent utbrudd eller ved smitteoppsporing rundt en positiv pasient Prøvemateriale (eswab fra anus) dyrkes på CHROMAgar VRE Etter 1-2 døgn: VRE-screening ved vår lab E. faecalis/e. faecium rosa/lilla kolonier E. gallinarum/e. casseliflavus : blå kolonier Genotype vana/vanb/vanc påvises ved PCR

7

8

9 Antall funn Utbrudd? uke

10 Pasient 1 29.juli 13: Nekrotiserende fasciitt Prøvemateriale fra fistel med oppvekst av bl.a. E.faecium, fenotypisk Vanco S Behandles med bla.vancomycin 7. aug: oppvekst av VRE (Vanco MIC>256) Screening på avdelingen Retrospekt sammenligning viser vana-genet hos begge stammer

11 Antall funn Pasient 2 og uke

12 Antall funn Pasient uke

13 Pasient 4 Påvist VRE uke (Vanco MIC: >256 mg/l) Ny screening planlegges i uke 7 Blodkultur tatt to uker tidligere; Enterokokker (Vanco MIC: 0,75 mg/l)

14 Sammenligning av stammer med PFGE

15 Pasient 4 vana/vanb/vanc PCR Begge stammer har vana-genet Tradisjonell screeningmetode baserer seg på fenotypisk resistens Metoden for screening må endres!

16 Metodeutvikling Ingen tid til validering og utprøving Screening er allerede avtalt Dyrkning i anrikningsbuljong (2. døgn) Påvisning av vana genet fra buljongdyrkning med in-house PCR

17 Screeningskåler St.Olavs vancomycinscreening CHROMagar VRE BrainHeart infusion agar med 6 mg/ml vancomycin Justering av vancomycinkonsentrasjon; Enterococcoselagar (0, 0,5, 2 mg/ml Vancomycin) CHROMagar VRE (0, 0,5, 2 mg/ml Vancomycin) Ingen vekst av utbruddsstammen på; Brilliance VRE (Oxoid) ChromID VRE (Biomerieux) VRE Select (Bio-Rad)

18 Funn etter første «PCR-screening» 10 Infeksjon Screening, prevalens uke

19 Metodeforenkling Utprøvinger og valideringer i ettertid Rektalprøve (eswab) Lysozymbehandling etterfulgt av automatisert ekstraksjon Real-time PCR med Taq-man probe Konfirmering med kommersiell test (GeneXpert)

20 vana real-time PCR, St.Olavs Velkjente primere* Egenutviklet Taq-Man probe (2014) Deteksjonsgrense: 59 kopier/pcr uten lysozymbehandling 0,01 kopier/pcr med lysozymbehandling *Dutka-Malen et al: MolGenGenet1990, 224:364-72

21 Fra vana positiv PCR til et isolat vana PCR pos. fra transportmediet Utsåing Enterococcoselagar med Ampicillin 8 mg/l og CHROMagar vana PCR på sveip Sår ut i sektorer Enkeltkolonier vana PCR og MaldiTOF

22 SmaI (12+10 t 1/15-15/30) SmaI (12+10 t 1/15-15/30)

23 Noen isolater E.faecium skiller seg ut

24 VVE-Vancomycinvariable Enterokokker Bakteriestammen er sensitiv for vancomycin i utgangspunktet, men blir resistent under påtrykk av vancomycin VRE-utbruddet på St.Olavs Hospital er et VVE-utbrudd