(12) Oversettelse av europeisk patentskrift

Transkript

1 (12) Oversettelse av europeisk patentskrift (11) NO/EP 2161 B1 (19) NO NORGE (1) Int Cl. C07D 401/06 (06.01) A61K 31/4439 (06.01) A61P 29/00 (06.01) Patentstyret (21) Oversettelse publisert (80) Dato for Den Europeiske Patentmyndighets publisering av det meddelte patentet (86) Europeisk søknadsnr (86) Europeisk innleveringsdag (87) Den europeiske søknadens Publiseringsdato () Prioritet , GB, , GB, 0826 (84) Utpekte stater AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO SE SI SK TR Utpekte samarbeidende stater AL BA RS (73) Innehaver Atopix Therapeutics Limited, 26 Strand, London WC2R 1BH, GB-Storbritannia (72) Oppfinner ARMER, Richard, Edward, Oxagen Limited91 Milton ParkAbingdon, Oxon OX14 4RY, GB-Storbritannia PETTIPHER, Eric, Roy, Oxagen Limited91 Milton ParkAbingdon, Oxon OX14 4RY, GB-Storbritannia WHITTAKER, Mark, Oxagen Limited91 Milton ParkAbingdon, Oxon OX14 4RY, GB- Storbritannia WYNNE, Graham, Michael, Summit Corporation Plc91 Milton ParkAbingdon, Oxon OX14 4RY, GB-Storbritannia VILE, Julia, Summit Corporation Plc91 Milton ParkAbingdon, Oxon OX14 4RY, GB- Storbritannia SCHROER, Frank, Summit Corporation Plc91 Milton ParkAbingdon, Oxon OX14 4RY, GB-Storbritannia (74) Fullmektig Plougmann & Vingtoft, Postboks 03 Sentrum, 04 OSLO, Norge (4) Benevnelse Forbindelse med CRTh2-antagonistaktivitet (6) Anførte publikasjoner EP-A WO-A-0/2338 WO-A-06/09183 WO-A-08/01211 WO-A1-04/00741 WO-A1-0/040114

2 1 Beskrivelse [0001] Den foreliggende oppfinnelse vedrører forbindelser som er nyttige som farmasøytiske midler, metoder for fremstilling av slike forbindelser, preparater som inneholder dem og deres anvendelse ved behandling og forebyggelse av allergiske sykdommer som astma, allergisk rhinitt og atopisk dermatitt og andre inflammatoriske sykdommer mediert av prostaglandin D2(PGD2) eller andre agonister som virker på CRTH2-reseptoren på celler inkludert eosinofiler, basofiler og Th2-lymfocytter [0002] PGD2 er et eikosanoid, en klasse av kjemiske mediator syntetisert av celler som respons på lokal vevskade, normale stimuli eller hormonell stimuli eller via cellulære aktiveringsveier. Eikosanoider binder seg til spesifikke celleoverflatereseptorer på et bredt utvalg av vev i hele kroppen, og medierer forskjellige effekter i disse vev. PGD2 er kjent for å være produsert av mastceller, makrofager og Th2-lymfocytter og er påvist i høye konsentrasjoner i luftveiene til astmatikere utfordret med antigen (Murray et al., (1986), N. Engl. J. Med. 31: ). Instillasjon av PGD2 inn i luftveiene kan fremkalle mange typer av astmarespons inkludert bronkokonstriksjon (Hardy et al., (1984) N. Engl. J. Med. 311: 9-213; Sampson et al, (1997) Thorax 2: 13-18) og eosinofil akkumulering (Emery et al., (1989) J. Appl. Physiol. 67: ). [0003] Potensialet av PGD2 anvendt eksogent for å indusere inflammatoriske responser er blitt bekreftet ved anvendelse av transgene mus som uttrykker human PGD2-syntase i overskudd som oppviser overdrevet eosinofil lungebetennelse og Th2-cytokinproduksjon som respons på antigen (Fuj Itani et al., (02) J. Immunol. 168: ). [0004] Den første reseptor som er spesifikk for PGD2 som ble oppdaget var DPreseptoren som er koblet til heving av de intracellulære nivåer av camp. Dog er PGD2 som er antatt å mediere mye av sin proinflammatoriske aktivitet ved interaksjon med en G-proteinkoblet reseptor betegnet CRTH2 (kjemotiltrekkende reseptor-homologt molekyl uttrykt på Th2-celler) som er uttrykt ved Th2-lymfocytter, eosinofiler og basofiler (Hirai et al., (01) J. Exp. Med. 193: 2-261, og EP08 og EP-A og Bauer et al., EP-A ). Det synes klart at effekten av PGD2 på aktiviseringen av Th2- lymfocytter og eosinofiler via CRTH2 medieres ettersom de selektive CRTH2-agonistene 13,14 dihydro-1-keto-pgd2(dk-pgd2) og 1R-metyl-PGD2 kan framprovosere denne responsen og effekten av PGD2 blir blokkert av et anti-crth2-antistoff (Hirai et al., 01; Monneret et al., (03) J. Pharmacol. Exp. Ther. 4: 349-3). I kontrast fremmer ikke den selektive DP-agonisten BW24C migrasjon av Th2-lymfocytter eller eosinofiler (Hirai et al. 01; Gervais et al., (01) J. Allergy Clin. Immunol. 8: ). Basert på

3 2 dette beviset er antagonisering av PGD2 på CRTH2-reseptoren en attraktiv metode for å behandle den inflammatoriske komponenten av Th2-avhengige allergiske sykdommer som astma, allergisk rhinitt og atopisk dermatitt. 1 [000] EP-A antyder at fremgangsmåten som den relaterer til kan benyttes til å identifisere forbindelser som er i bruk ved behandling av allergisk astma, atopisk dermatitt, allergisk rhinitt, autoimmun reperfusjonsskade og en rekke inflammatoriske tilstander, som alle medieres av virkningen av PGD2 eller andre agonister på CRTH2- reseptoren. [0006] Forbindelser som binder seg til CRTH2 blir beskrevet i WO-A og WO- A Disse forbindelser er ikke nye, men ble først beskrevet sammen med tilsvarende forbindelser i GB , GB og GB , hvor de ble sagt å ha anti-inflammatorisk, analgetisk og antipyretisk aktivitet. WO-A og WO-A beskriver at forbindelsene til hvilke de er knyttet er modulatorer av CRTH2- reseptoraktivitet og er derfor nyttige i behandlingen eller forebyggingen av obstruktive luftveissykdommer som astma, kronisk obstruktiv pulmonal sykdom (KOLS) og en rekke andre sykdommer inkludert forskjellige tilstander i ben og ledd, hud og øyne, magetarmkanalen, det sentrale og perifere nervesystemet og andre vev samt allograftavstøtning. Disse forbindelser er alle indolderivater med en eddiksyre-substituent ved 3- posisjonen av indolringen. 2 [0007] PL 6781 og JP angår også indol-3-eddiksyrederivater som har lik struktur som indometacin og, som indometacin, sies å ha anti-inflammatorisk og antipyretisk aktivitet. Således, selv om dette kanskje ikke ble verdsatt på det tidspunkt da disse dokumentene ble publisert, er forbindelsene de beskriver COX-inhibitorer, en aktivitet som er ganske forskjellig fra den som forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse beskriver. Faktisk er COX-inhibitorer kontraindisert ved behandling av mange sykdommer og tilstander, for eksempel astma og inflammatorisk tarmsykdom hvor forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er nyttige, selv om de i enkelte tilfeller kan anvendes til behandling av artrittiske tilstander. 3 [0008] Det finnes ytterligere kjent teknikk som angår indol-1-eddiksyreforbindelser, selv om disse ikke er beskrevet som CRTH2-antagonister. For eksempel WO-A , WO-A , WO-A og WO-A-0164 relaterer alle til forbindelser som er indol-1-eddiksyrederivater, men disse forbindelser er sagt å være aldosereduktaseinhibitorer som er nyttige i behandling av diabetes mellitus (WO-A , WO-A og WO-A-0164) eller hypouricemi (WO-A ). Det er ingen antydning i

4 3 noen av disse dokumenter om at forbindelsene vil være nyttige for behandling av sykdommer og tilstander mediert av PGD2 eller andre CRTH2-reseptoragonister. 1 [0009] US 4,363,912 angår indol-1-alkylkarboksylsyrederivater (inkludert indol-1- eddiksyreanaloger) som er sagt å være hemmere av tromboksansyntetase og å være nyttige i behandlingen av tilstander som trombose, iskemisk hjertesykdom og slag. Forbindelsene har en usubstituert 3-pyridyl- eller 4-pyridyl-substituent i en tilsvarende posisjon til den pyridylgruppen med den generelle formel (I). Evaluering av den nærmeste analog (-fluor-2-metyl-3-(pyridin-3-ylmetyl)-indol-1-yl)-eddiksyre) som faller innenfor kravene til US 4,363,912 til forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, indikerer at den er betydelig mindre aktiv som CRTH2-antagonist enn forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse. I motsetning til forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse (som alle er indol-1-eddiksyrederivater), er de foretrukne forbindelser i US 4,363,912 3-(indol-1-yl)-propionsyrederivater. [00] WO-A vedrører forbindelser som er sagt å være spla2-inhibitorer som er nyttige ved behandling av bronkial astma og allergisk rhinitt. Disse forbindelsene har alle amid- eller hydrazidsubstituenter i stedet for karboksylsyrederivatet av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse. [0011] JP vedrører en fremgangsmåte for fremstilling av en 3- benzotiazolylmetyl-indoleddiksyre, som sies å være en aldosereduktaseinhibitor. 2 3 [0012] US 4,89,692 vedrører forbindelser som er sagt å være leukotriene antagonister nyttige i behandlingen av tilstander slik som astma, høysnue og allergisk rhinitt, samt visse inflammatoriske tilstander som bronkitt, ektopisk og atopisk eksem. Noen av forbindelsene ifølge dette dokumentet er indol-1-eddiksyrer, men de samme forfatterne beskriver i J. Med. Chem., 33, (1990), at forbindelser med en eddiksyregruppe på indolnitrogenet ikke har signifikant peptidoleukotrien aktivitet. [0013] US 4,273,782 angår indol-1-eddiksyrederivater som er sagt å være nyttige i behandlingen av tilstander som trombose, iskemisk hjertesykdom, slag, forbigående ischemisk anfall, migrene og de vaskulære komplikasjoner ved diabetes. Det er ingen omtale i dokumentet av tilstander mediert av virkningen av PGD2 eller andre agonister på CRTH2-reseptoren. [0014] US 3,7,142 angår 3-substituerte-1-indol-karboksylsyrer og estere som er sagt å være anvendelige ved behandling av inflammatoriske tilstander.

5 4 [001] WO-A-03/09798 vedrører forbindelser som er CRTH2-reseptorantagonister. De har ikke en arylsubstituent på indol-3-stillingen. [0016] Cross et al. J. Med. Chem. 29, (1986) vedrører en fremgangsmåte for fremstilling av indol-1-eddiksyrederivater fra de tilsvarende estere. Forbindelsene som det refererer til er sagt å være hemmere av tromboksansyntetase. [0017] EP-A vedrører indol-1-eddiksyrederivater som er leukotrienantagonister. 1 [0018] US 03/01371vedrører indol-1-eddiksyrederivater som er spla2-hemmere. Men alle de eksemplifiserte forbindelsene har voluminøse substituenter ved 2- og - stillingene i indolsystemet og er derfor svært forskjellige fra forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse. [0019] US 04/ beskriver indol-1-eddiksyrederivater som er inhibitorer av PAI-1. Det er ingen antydning om at forbindelsene kan ha CRTH2-antagonistaktivitet. [00] WO 04/08164 vedrører forbindelser som er sagt å være modulatorer for astma og allergiske betennelser. De eneste forbindelser hvor aktivitet er demonstrert er helt forskjellige i struktur fra indol-1-eddiksyrederivatene ifølge foreliggende oppfinnelse. 2 [0021] Forbindelser som binder til CRTH2-reseptoren, er beskrevet i WO-A-03/ og WO-A-03/ Disse forbindelsene er indoleddiksyrer, men i WO-A-03/ er indolsystemet koblet ved 2-3-posisjonene til en -7-leddet karbocyklisk ring. I WO-A- 03/09798 er det en pyrrolidingruppe ved 3-indol-stillingen. [0022] WO-A-03/1981, WO-A-03/1961 og WO-A-04/00741 forholder alle seg til indol-1-eddiksyrederivater som er sagt å være CRTH2-antagonister, men som avviker i struktur fra forbindelsene med den generelle formel (I), fordi det ikke er noe avstandsstykke eller en -S- eller -SO2-gruppe bundet til indol-3-stillingen i stedet for CH2-gruppen av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse som beskrevet nedenfor. 3 [0023] WO-A-0/ beskriver også indol-1-eddiksyrederivater som er sagt å være CRTH2-antagonister og som er sagt å være nyttige for behandling av forskjellige sykdommer i luftveiene. Disse forbindelser har alle en substituent som er knyttet til indol-3-stillingen med et oksygen-avstandsstykke.

6 [0024] WO-A-0/ beskriver igjen indol-1-eddiksyreforbindelser, denne gang med en alifatisk substituent ved 3-posisjonen av indolringen. Forbindelsene angis å være CRTH2-antagonister. [002] WO-A-06/ vedrører CRTH2-antagonist-indolforbindelser som har en heterosyklisk eller heteroaryl substituent knyttet direkte til 3-stillingen på indolringsystemet. 1 2 [0026] I oppfinnernes tidligere søknad, WO-A-0/044260, beskrives forbindelser som er antagonister av PGD2 på CRTH2-reseptoren. Disse forbindelsene er indol-1-eddiksyrederivater substituert i 3-stillingen med en CR 8 R 9 -gruppe, hvor R 9 er hydrogen eller alkyl og R 8 er en arylgruppe som kan være substituert med en eller flere substituenter. Forbindelsene som beskrives i dette dokumentet er potente antagonister in vitro av PGD2 på CRTH2-reseptoren. Oppfinnerne har imidlertid funnet at når de ble testet in vivo, var den farmakokinetiske profilen til noen av forbindelsene ikke optimal, og deres styrke når det gjelder formendringstest for eosinofil fra helblod, som gir en indikasjon på den sannsynlige in vivo-aktiviteten av forbindelsene, er ofte noe mindre enn man kunne vente ut fra in vitro-bindende resultater. [0027] I en annen av de tidligere søknader, WO06/09183, er indol-1-eddiksyrederivatene substituert i 3-stillingen med en 1-benzensulfonyl-1 H-pyrrol-2-ylmetylgruppe, hvor fenylgruppen av benzensulfonyldelen kan være substituert. Disse forbindelsene er ekstremt aktive CRTH2-antagonister, men blir raskt metabolisert som bestemt ved inkubasjon med humane mikrosompreparater. [0028] Oppfinnernes søknad WO08/01211 vedrører også CRTH2-antagonistforbindelser, denne gang indol-1-eddiksyrederivater substituert i 3-stillingen med en 2- fenylsulfonylbenzylgruppe. Det ble funnet at posisjonen til fenylsulfonylsubstituenten hadde en signifikant effekt både på aktiviteten til forbindelsene og deres farmakokinetiske profil. 3 [0029] Den foreliggende oppfinnelse relaterer seg til pyridylanalogene av forbindelsene i W008/ Disse forbindelsene lider ikke av de metabolske stabilitetsulempene til forbindelsene fra W006/09183, og det har overraskende blitt funnet at spesifikke pyridylregioisomerer og substitusjon derav gir opphav til en optimal balanse mellom styrke og farmakokinetiske egenskaper. Nærmere bestemt har det blitt funnet at innføringen av en fenylsulfonylsubstituent på 2-stillingen i pyridin-3-yl-regioisomeren

7 6 tilveiebringer forbindelser med god styrke i en funksjonell in vitro-analyse sammen med god farmakokinetikk in vivo. At denne kombinasjonen bør resultere i en meget gunstig kombinasjon av egenskaper er ikke åpenbar, og er ikke beskrevet i litteratur og patentsøknader i forbindelse med CRTH2-antagonister. Det er spesielt overraskende at 2- benzensulfonyl-pyridin-3-yl-forbindelser som er potente og spesifikke antagonister av CRTH2-reseptoren både i en reseptor-bindingsanalyse og i en funksjonell in vitroanalyse, ettersom vi har funnet at 3-benzensulfonyl-pyridin-2-yl-analogene er betydelig mindre potente og at 3-benzensulfonyl-pyridin-4-yl-analogene utstillinger lavere aktivitet i den funksjonelle in vitro-analysen enn man kunne forvente fra dens reseptorbindingsaktivitet. Det ser derfor ut til at posisjonen til pyridylnitrogenet er spesielt signifikant i forbindelsene ifølge oppfinnelsen. 1 [00] Foreliggende oppfinnelse angår således nye forbindelser som binder til CRTH2- reseptor og som således er anvendelige ved behandling av sykdommer og tilstander mediert av aktiviteten til PGD2 på CRTH2-reseptoren. [0031] I den foreliggende oppfinnelse er det tilveiebrakt en forbindelse med den generelle formel (I) 2 hvori W er fluor, og R 1 er fenyl eventuelt substituert med en halogensubstituent; eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. [0032] Forbindelsene med den generelle formel (I) er antagonister på CRTH2- reseptoren og er anvendelige ved behandling av tilstander som er mediert av PGD2 eller andre agonister som binder til CRTH2. Dette omfatter allergiske sykdommer, astmatiske lidelser og inflammatoriske sykdommer, eksempler på hvilke er allergisk astma, perennial allergisk rhinitt, sesongmessig allergisk rhinitt, atopisk dermatitt, kontakthypersensitivitet (inkludert kontaktdermatitt), konjunktivitt, spesielt allergisk

8 7 konjunktivitt, vernal keratokonjunktivitt og atopisk keratokonjunktivitt, eosinofil bronkitt, matallergier, eosinofil gastroenteritt, inflammatorisk tarmsykdom, ulcerøs kolitt og Crohns sykdom, mastocytose og også andre PGD2-medierte sykdommer, for eksempel autoimmune sykdommer slik som hyper-ige-syndrom og systemisk lupus erythernatus, psoriasis, akne, multippel sklerose, reperfusjonsskade ved allograftavstøtning, kronisk obstruktiv lungesykdom, samt revmatoid artritt, psoriasisartritt, slitasjegikt og fibrotiske sykdommer forårsaket/forverret av Th2-immunreaksjoner, for eksempel idiopatisk lungefibrose og hypertrofiske arr. [ACR1] 1 [0033] Den forbedrede styrke i formendringstest for eosinofil helbrod og farmakokinetiske profil av forbindelsene med generell formel (I) er spesielt overraskende ettersom noen av forbindelsene ifølge WO-A-0/044260, som er nærmest i struktur til forbindelsene med den generelle formel (I), ikke har disse fordelaktige egenskapene. Spesielt ligner forbindelsen i eksempel 17 i WO-A-0/ på forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse og kunne forventes å ha lignende egenskaper. Men in vivoeksperimenter utført på en hund, viser at utskifting av 4-metylsulfonylbenzylgruppe i eksempel 17 av WO-A-0/ med 2-(benzensulfonyl)-pyridin-3-ylmetylgruppen i forbindelsene med formel (I), har en betydelig effekt på farmakokinetikken til forbindelsene fordi når forbindelse 17 i WO-A-0/ administreres oralt, er dens farmakokinetiske profil in vivo mindre gunstig enn den for forbindelsene med den generelle formel (I). 2 [0034] I tillegg er det for mange av forbindelsene ifølge WO-A-0/044260, funnet at deres in vitro formendringsaktivitet for eosinofil fra helblod ofte er mindre enn man kunne forventet fra deres in vitro-aktivitet som målt med radioligand-bindingsforsøk til CRTH2-reseptoren. [003] Videre er forbedring i aktiviteten meget spesifikk for gruppen av forbindelser med generell formel (I). Forbindelser som er enda mer nært beslektet med forbindelsene spesifikt beskrevet i WO-A-0/ har slike fordelaktige egenskaper. For eksempel er analoger av den generelle formel (I) hvori SO2R-gruppen ikke er i en stilling på pyridinringen tilstøtende til bindingsmetylendelen som er knyttet til 3-stillingen av indolyl-avleiringen, mindre aktive i in vitro-helblod eosinofilrelaterte formendringstester. 3 [0036] I den foreliggende beskrivelse refererer "C1-C6alky" til en rett eller forgrenet mettet hydrokarbonkjede med 1-6 karbonatomer og eventuelt substituert med en eller flere halogensubstituenter og/eller med en eller flere C3-C8sykloalkylgrupper. Eksempler

9 8 inkluderer metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, t-butyl, n-heksyl, trifluormetyl, 2-kloretyl, metylencyklopropyl, metylencyklobutyl, metylencyklobutyl og metylencyklopentyl. [0037] Betegnelsen "C1-C18alkyl" har en tilsvarende betydning for den ovennevnte med unntak av at det refererer til en rettkjedet eller forgrenet mettet hydrokarbonkjede som har én til atten karbonatomer. [0038] I den foreliggende beskrivelse refererer "C3-C8-cykloalkyl" til en mettet karbocyklisk gruppe som har 3-8 ringatomer og eventuelt substituert med en eller flere halogensubstituenter. Eksempler omfatter cyklopropyl, cyklopentyl, cykloheksyl og 4- fluorcykloheksyl. [0039] I den foreliggende beskrivelse refererer "halo" til fluor, klor, brom eller jod. 1 2 [0040] Uttrykket "aryl" i forbindelse med den foreliggende beskrivelse refererer til et ringsystem med aromatisk karakter som har -14 ringkarbonatomer og som inneholder opp til tre ringer. Der hvor en arylgruppen inneholder mer enn en ring, behøver ikke alle ringene være fullstendig aromatiske i karakter. Eksempler på aromatiske deler, er benzen, naftalen, indan og inden. [0041] Betegnelsen "heteroaryl" i sammenheng med beskrivelsen refererer til et ringsystem med aromatisk karakter som har -14 ringatomer, der minst en av hvilke er et heteroatom valgt fra N, O og S, og som inneholder opp til tre ringer. Dersom en heteroarylgruppe inneholder mer enn en ring, behøver ikke alle ringene være fullstendig aromatiske i karakter. Eksempler på heteroarylgrupper inkluderer pyridin, pyrimidin, indol, benzofuran, benzimidazol og indolen. [0042] Egnede farmasøytisk og veterinærmedisinsk akseptable salter av forbindelsene med generell formel (I) er basiske addisjonssalter, slik som natrium, kalium, kalsium, aluminium, sink, magnesium og andre metallsalter, så vel som cholin, dietanolamin, etanolamin, etyldiamin, megulmin og andre kjente basiske addisjonssalt som oppsummert i Paulekuhn et al., (07) J. Med. Chem. 0: og/eller kjent for fagfolk innen teknikken. 3 [0043] Salter som ikke er farmasøytisk eller veterinærmedisinsk akseptable kan likevel være verdifulle som mellomprodukter. [0044] Promedikamenter er enhver kovalent bundet forbindelse som frigir den aktive

10 9 modersubstans i henhold til den generelle formel (I) in vivo. Eksempler på promedikamenter omfatter alkylestere av forbindelsene med den generelle formel (I), for eksempel estere med den generelle formel (II) nedenfor. [004] I spesielt egnede forbindelser med den generelle formel (I), er fenylgruppen R 1 usubstituert eller er substituert med en enkelt halosubstituent, vanligvis fluor eller klor, som vanligvis er ved 4-stillingen av fenylgruppen R 1. [0046] Særlig aktive forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelsen er: (3-{[2-(benzensulfonyl) pyridin-3-yl] metyl}--fluor-2-metylindol-1-yl)-eddiksyre; [-fluor-3-({2 -[(4-fluorbenzen)sulfonyl]pyridin-3-yl} metyl)-2-metylindol-1-yl]- eddiksyre; [3-({2-[(4-klorbenzen)sulfonyl]pyridin-3-yl}metyl)--fluor-2-metylindol-1-yl]-eddiksyre. 1 Forbindelser med den generelle formel (II): [0047] 2 hvor W og R 1 er som definert for den generelle formel (I), og R 4 er C1-C6alkyl eller benzyl; kan anvendes i en fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med den generelle formel (I), hvor fremgangsmåten omfatter omsetning av forbindelsen med den generelle formel (II) med en base så som natriumhydroksyd eller litiumhydroksyd. Reaksjonen kan finne sted i et vandig oppløsningsmiddel eller et organisk oppløsningsmiddel eller en blanding av de to. Et typisk løsningsmiddel som anvendes for reaksjonen er en blanding av tetrahydrofuran og vann. [0048] Forbindelser med den generelle formel (II) kan fremstilles fra forbindelser med generell formel (III):

11 hvor W er som definert i generell formel (I), og R 4 er som definert i den generelle formel (II), ved omsetning med et aldehyd med den generelle formel (IV): hvor R 1 er som definert for den generelle formel (I). Reaksjonen kan utføres i nærvær av trimetylsilyltriflat (TMSOTf) i et ikke-polart organisk løsningsmiddel, og ved redusert temperatur, for eksempel - til C, typisk 0 C. Mellomproduktet blir deretter redusert, for eksempel med et trialkylsilan slik som trietylsilan. 1 [0049] Fremgangsmåter for fremstilling av forbindelser med den generelle formel (III) er kjent for fagfolk innen teknikken og involverer generelt alkylering av -halo-indolderivat ved 1-stillingen med et alfa-bromacetatderivat eller beslektet alkyleringsmiddel. -halo-indolderivater er lett tilgjengelig eller kan fremstilles ved hjelp av kjente metoder. [000] Forbindelser med den generelle formel (IV) kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse med den generelle formel (V): 2 hvor X er en forlatende gruppe så som halogen, spesielt fluor eller klor, med en forbindelse med den generelle formel (VI): R 1 -SO2Na (VI)

12 11 hvor R 1 er som definert for den generelle formel (I). [001] Reaksjonen kan utføres i et polart organisk oppløsningsmiddel så som DMSO ved forhøyet temperatur, typisk tilbakeløpstemperatur over en lengre periode, for eksempel 48 til 1 timer. [002] Forbindelser med den generelle formel (V) og (VI) er kommersielt tilgjengelige. 1 [003] Forbindelser med den generelle formel (I) er CRTH2-reseptorantagonister og er derfor anvendelige i en fremgangsmåte for behandling av sykdommer og tilstander mediert av PGD2 eller andre agonister på CRTH2-reseptoren, idet fremgangsmåten omfatter administrering til en pasient som har behov for slik behandling med en egnet mengde av en forbindelse med den generelle formel (I). [004] I et tredje aspekt ved oppfinnelsen er det tilveiebrakt en forbindelse med den generelle formel (I) for anvendelse i medisin, spesielt for anvendelse ved behandling eller forebyggelse av sykdommer og tilstander mediert av PGD2 eller andre CRTH2-reseptoragonister. [00] Videre er det også tilveiebragt anvendelse av en forbindelse med den generelle formel (I) i fremstillingen av et middel for behandling eller forebyggelse av sykdommer og tilstander mediert av CRTH2-reseptoragonister, spesielt PGD [006] Forbindelsene er spesielt effektive når de anvendes for behandling eller forebyggelse av allergisk astma, perennial allergisk rhinitt, sesongmessig allergisk rhinitt, atopisk dermatitt, kontakt hypersensitivitet (inkludert kontaktdermatitt), konjunktivitt, spesielt allergisk konjunktivitt, vernal keratokonjunktivitt og atopisk keratokonjunktivitt, eosinofil bronkitt, matallergier, eosinofil gastroenteritt, inflammatorisk tarmsykdom, ulcerøs kolitt og Crohns sykdom, mastocytose og også andre PGD2-medierte sykdommer, for eksempel autoimmune sykdommer slik som hyper-ige-syndrom og systemisk lupus erythematus, psoriasis, akne, multippel sklerose, allograftavstøtning, reperfusjonsskade, kronisk obstruktiv pulmonal sykdom, så vel som reumatoid artritt, psoriatisk artritt, osteoartritt og fibrotiske sykdommer forårsaket/forverret av Th2- immunresponser, for eksempel idiopatisk lungefibrose og hypertrofiske arr. [007] Forbindelsene med generell formel (I) skal være utformet på en hensiktsmessig måte, avhengig av de sykdommer eller tilstander som de skal behandle.

13 12 [008] Derfor er det, i et ytterligere aspekt ved oppfinnelsen, tilveiebrakt et farmasøytisk preparat omfattende en forbindelse med den generelle formel (I) sammen med et farmasøytisk hjelpestoff eller bærer. Andre aktive stoffer kan også være til stede, som kan anses hensiktsmessig eller tilrådelig for sykdommen eller tilstanden som behandles eller forebygges. [009] Bæreren eller, dersom mer enn én er til stede, hver av bærerne må være akseptable i den forstand at de er kompatible med de andre ingrediensene i formuleringen og ikke skadelige for mottakeren. 1 [0060] Formuleringene innbefatter de som er egnet for oral, rektal, nasal, bronkial (inhalert), topisk (inkludert øyedråper, bukkal og sublingual), vaginal eller parenteral (inkludert subkutan, intramuskulær, intravenøs og intradermal) administrering, og kan fremstilles ved alle metoder som er vel kjente i farmasifaget. [0061] Administreringsveien vil avhenge av tilstanden som skal behandles, men foretrukne blandinger er formulert for oral, nasal, bronkial eller topisk administrering. 2 [0062] Sammensetningen kan fremstilles ved å bringe den ovenfor definerte aktive bestanddel i forbindelse med bæreren. Generelt blir formuleringene fremstilt ved å bringe den aktive bestanddel jevnt og nøye i forbindelse med flytende bærere eller finfordelte faste bærere eller begge, og deretter om nødvendig forme produktet. Oppfinnelsen strekker seg til fremgangsmåter for fremstilling av en farmasøytisk sammensetning som omfatter å bringe en forbindelse med den generelle formel (I) i samsvar eller forbindelse med en farmasøytisk eller veterinærmedisinsk akseptabel bærer eller vehikkel. [0063] Formuleringer for oral administrering i foreliggende oppfinnelse kan bli presentert som: adskilte enheter slik som kapsler, poser eller tabletter som hver inneholder en forutbestemt mengde av den aktive bestanddel, som pulver eller granuler, som en oppløsning eller en suspensjon av det aktive middel i en vandig væske eller en ikke-vandig væske, eller som en olje-i-vann flytende emulsjon eller en vann-i-olje flytende emulsjon, eller som en bolus, osv. 3 [0064] For preparater for oral administrering (for eksempel tabletter og kapsler), omfatter begrepet "akseptabel bærer" vehikler som vanlige eksipienser, slik som bindemidler, for eksempel sirup, akasie, gelatin, sorbitol, tragant, polyvinylpyrrolidon (Povidon), metylcellulose, etylcellulose, natriumkarboksymetylcellulose, hydroksypropyl-

14 13 metylcellulose, sukrose og stivelse; fyllstoffer og bærere, for eksempel maisstivelse, gelatin, laktose, sukrose, mikrokrystallinsk cellulose, kaolin, mannitol, dikalsiumfosfat, natriumklorid og alginsyre; og smøremidler så som magnesiumstearat, natriumstearat og andre metalliske stearinsyrer; glyserolstearat, stearinsyre, silikonfluid, talkumvoks, oljer og kolloidalt silisiumdioksyd. Aromamidler slik som peppermynte, wintergreen-olje (fjellte), kirsebærsmakstilsetning og lignende kan også anvendes. Det kan være ønskelig å tilsette et fargemiddel for å gjøre doseringsformen lett identifiserbar. Tablettene kan også belegges ved metoder vel kjent innen faget. 1 [006] En tablett kan lages ved komprimering eller støping, eventuelt med en eller flere hjelpeingredienser. Pressede tabletter kan fremstilles ved sammenpressing i en egnet maskin av den aktive bestanddel i en frittflytende form så som et pulver eller granuler, eventuelt blandet med et bindemiddel, smøremiddel, inert fortynningsmiddel, konserveringsmiddel, overflateaktivt eller dispergerende middel. Støpte tabletter kan fremstilles ved støping i en egnet maskin en blanding av den pulverformige forbindelsen fuktet med et inert flytende fortynningsmiddel. Tablettene kan eventuelt være overtrukket eller med hakk for deling, og kan formuleres slik at det tilveiebringes en langsom eller kontrollert frigjøring av det aktive middel. 2 [0066] Andre preparater egnet for oral administrasjon innbefatter pastiller som omfatter det aktive middel i en smakstilsatt basis, vanligvis sukrose og akasia eller tragant; pastiller omfattende den aktive bestanddel i en inert base så som gelatin og glyserin, eller sukrose og akasie, og munnvann omfattende den aktive bestanddel i en egnet flytende bærer. [0067] For topisk applikasjon til huden kan forbindelser med den generelle formel (I) formuleres til en krem, salve, gele, løsning eller suspensjon etc. Krem- eller salveformuleringer som kan brukes for legemidlet er vanlige formuleringer som er velkjente innen teknikken, for eksempel som beskrevet i standard tekstbøker for legemidler som British Pharmacopoeia. 3 [0068] Forbindelser med den generelle formel (I) kan anvendes for behandling av luftveiene ved nasal, bronkial eller bukkal administrering av, for eksempel, aerosoler eller sprayer som kan dispergere den farmakologisk aktive bestanddel i form av et pulver eller i form av dråper av en oppløsning eller suspensjon. Farmasøytiske preparater med pulverdispergerende egenskaper inneholder vanligvis, i tillegg til den aktive bestanddel, et flytende drivmiddel med et kokepunkt under værelsestemperatur og, om ønsket, hjelpestoffer, slik som flytende eller faste ikke-ioniske eller anioniske overflateaktive

15 14 midler og/eller fortynningsmidler. Farmasøytiske preparater hvor den farmakologisk aktive bestanddel er oppløst inneholder, i tillegg til dette, et egnet drivmiddel og dessuten, om nødvendig, et ekstra oppløsningsmiddel og/eller en stabilisator. I stedet for drivmidlet, kan trykkluft også brukes, idet det er mulig for denne å bli produsert etter behov ved hjelp av en egnet kompresjons- og ekspansjonsenhet. [0069] Parenterale formuleringer vil generelt være sterile. 1 [0070] Vanligvis vil dosen av forbindelsen være omtrent 0,01 til 0 mg/kg, for å opprettholde konsentrasjonen av legemiddel i plasma ved en konsentrasjon som er effektiv til å inhibere PGD2 på CRTH2-reseptoren. Den nøyaktige mengde av en forbindelse med den generelle formel (I) som er terapeutisk effektiv, og måten som en slik forbindelse best administreres på, bestemmes lett av en med vanlige kunnskaper innen faget, ved å sammenligne blodnivået i midlet med den konsentrasjon som er nødvendig for å få en terapeutisk effekt. [0071] Forbindelser med den generelle formel (I) kan anvendes i kombinasjon med ett eller flere aktive midler som er anvendelige ved behandling av de sykdommer og tilstander som er nevnt ovenfor, selv om de aktive midlene ikke nødvendigvis er inhibitorer av PGD2 på CRTH2-reseptoren. [0072] Derfor kan det farmasøytiske preparat som er beskrevet ovenfor i tillegg inneholde ett eller flere av de aktive midler. 2 [0073] Det er også tilveiebrakt anvendelse av en forbindelse med den generelle formel (I) i fremstillingen av et middel for behandling av sykdommer og tilstander mediert av CRTH2-reseptoragonister, spesielt PGD2, hvori midlet også omfatter et ytterligere aktivt middel anvendelig for behandling av de samme sykdommer og tilstander. 3 [0074] Disse ytterligere virkestoffene kan være andre CRTH2-reseptorantagonister, eller kan ha en helt annen virkningsmekanisme. De omfatter eksisterende terapier for allergiske og andre inflammatoriske sykdommer inkludert: Suplatast tosylat og lignende forbindelser; β2-adrenoreseptoragonister som metaproteranol isoproterenol, isoprenalin, albuterol, salbutamol, formoterol, salmeterol, indakaterol, terbutalin, orciprenalin, bitolterolmesylat og pirbuterol eller metylxantiner som teofyllin og aminofyllin, mastcellestabilisatorer som natriumkromoglykat eller muskarine reseptorantagonister slik som tiotropium;

16 1 1 2 antihistaminer, for eksempel histamin H1-reseptorantagonister slik som loratadin, cetirizin, desloratadin, levocetirizin, feksofenadin, astemizol, azelastin og klorfeniramin eller H4-reseptorantagonister; α1- og α2-adrenoreseptoragonister som propylheksedrin-fenylefrin, fenylpropanolamin, pseudoefedrin, nafazolin-hydroklorid, oksymetazolin-hydroklorid, tetrahydrozolin-hydroklorid, xylometazolin-hydroklorid og etylnorepinefrinhydroklorid; modulatorer av kjemokinreseptorfunksjon, for eksempel CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR og CCR11 (for C-Cfamilien) eller CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4 og CXCR (for C-X-C-familien) og CX3CR1 for C-X3-C-familien; leukotrienantagonister som montelukast og zafirlukast leukotrienbiosyntese-inhibitorer slik som -lipoksygenase-hemmere eller - lipoksygenase-aktiverende protein (FLAP)-inhibitorer slik som zileuton, ABT-761, fenleuton, tepoxalin, Abbott-7917, N-(-substituert)-tiofen-2-alkylsolfonamider, 2,6-di-tert-butylfenolhydrazoner, metoksytetrahydropyranr slik som ZD2138, SB- 2661, pyridinylsubstituert-2-cyanonaftalenforbindelser slik som L-7390, 2- cyanokinolinforbindelser slik som L-746,, indol- og kinolinforbindelser slik som MK -91, MK-886 og BAY x 0; fosfodiesterasehemmere, inkludert PDE4-hemmere slik som roflumilast; anti-ige-antistoffbehandling som omalizumab; anti-infektiva som fusidinsyre (spesielt for behandling av atopisk dermatitt); anti-soppmidler som klotrimazol (spesielt for behandling av atopisk dermatitt); immunsuppressive midler slik som takrolimus, og spesielt pimecrolimus i tilfelle av inflammatorisk hudsykdom eller alternativt FK-06, rapamycin, cyklosporin, azatioprin og metotreksat; immunterapimidler inkludert allergen immunterapi som Grazax; kortikosteroider som prednison, prednisolon, flunisolid, triamcinolon, beklometasondipropionat, budesonid, flutikasonpropionat-mometasonfuroat- og flutikasonfuroatlegemidler som fremmer Th1-cytokinrespons som interferoner, TNF eller GM-CSF. 3 CRTH2-antagonister kan også kombineres med behandling som er i utvikling for inflammatoriske indikasjoner inkludert: andre antagonister av PGD2 som virker ved andre reseptorer så som DPantagonister; stoffer som modulerer cytokinproduksjon, for eksempel som inhibitorer av TNFakonverterende enzym (TACE) anti-tnf-monoklonale antistoffer, TNF-reseptorimmunoglobulinmolekyler, inhibitorer av andre TNF-isoformer, ikke-selektive COX-

17 16 1/COX-2 inhibitorer slik som piroxicam, diclofenac, propionsyrer som naproxen, flubiprofen, fenoprofen, ketoprofen og ibuprofen, fenamater slik som mefenaminsyre, indometacin, sulindac og apazon, pyrazoloner slik som fenylbutazon, salisylater som aspirin, COX-2-hemmere slik som meloksikam, celekoksib, fofekoksib, valdekoksib og etorikoksib, lavdose-metotreksat, lefunomid, ciclesonid, hydroksyklorokin, d- penicillamin, auranofin eller parenteralt eller peroralt gull; stoffer som modulerer aktiviteten til Th2-cytokinene IL-4 og IL- slik som blokkering av monoklonale antistoffer og oppløselige reseptorer; PPAR-γ-agonister for eksempel rosiglitazon, eller med anti-rsv-antistoffer slik som Synagis (palivizumab), og midler som kan bli anvendt for å behandle rhinovirus-infeksjon i fremtiden, f.eks. intereferon-alfa, interferonbeta eller andre interferoner. 1 [007] I enda et ytterligere aspekt ved oppfinnelsen er det tilveiebrakt et produkt som omfatter en forbindelse med den generelle formel (I) og én eller flere av de midler som er nevnt ovenfor som et kombinert preparat for samtidig, separat eller sekvensiell anvendelse i behandlingen av en sykdom eller tilstand mediert av virkninge av PGD2 på CRTH2-reseptoren. 2 [0076] I enda et annet aspekt ved oppfinnelsen er det tilveiebrakt et sett for behandling av en sykdom eller tilstand mediert ved virkningen av PGD2 på CRTH2-reseptoren som omfatter en første beholder som omfatter en forbindelse med den generelle formel (I), og en andre beholder som omfatter et eller flere av de aktive midler som er nevnt ovenfor. [0077] Oppfinnelsen vil nå bli beskrevet i større detalj med referanse til følgende ikkebegrensende eksempler. [0078] I eksempel 1 ble 1 H NMR spektra oppnådd under anvendelse av et Bruker Advance II-spektrometer som opererer ved 0 MHz. Alle signalene ble referert i forhold til gjenværende protisk løsemiddel. 3 [0079] I eksemplene 2 og 3 ble NMR-spektrene samlet på et Jeol JNM-GSX spektrometer som opererer ved 400 MHz for 1 H NMR datainnsamling og 0 MHz for 13 C NMR datainnsamling. [0080] I eksempel 1 ble HPLC-CAD-MS utført på en Gilson 321 HPLC med deteksjon utført av en ESA Corona CAD og et Finnigan AQA massespektrometer som opererer i

18 17 positiv-ion elektrospray ioniseringsmodus. HPLC-kolonnen var en C18 Phenomenex Gemini 0 x 4,6 mm 3 μ, med en mobil fase-gradient fra 0% 0,1% maursyre i vann og 0% 0,1% maursyre i acetonitril som ble utført i løpet av 2, minutter, med en total kjøretid på 6, minutter. I noen tilfeller ble kun MS oppnådd ved bruk av apparatet som er beskrevet ovenfor. [0081] I eksemplene 2 og 3 ble HPLC utført på en Agilent 0 HPLC med deteksjon utført ved UV ved 2nm. HPLC-kolonnen var en YMC-Pack ODS-A x 4,6 mm μ, med en mobil fase-gradient mellom 0% 0,01% trifluoreddiksyre i vann og 0% 0,01% trifluoreddiksyre i acetonitril utført i løpet av 16 minutter, med en total kjøretid på 21 minutter. 1 Eksempel 1: Fremstilling av (3-{[2-(benzensulfonyl)pyridin-3-yl] metyl}-- fluor-2-metylindol-1-yl)-eddiksyre (forbindelse 1) 2-benzensulfonyl)isonikotinaldehyd [0082] 2 [0083] Til en omrørt suspensjon av benzensulfinsyre-natriumsalt (9,36 g, 0,07 mol) i DMSO (4 ml), ble det tilsatt 2-fluor-3-pyridinkarboksaldehyd (, ml, 0,02 mol). Den resulterende blanding ble omrørt ved 0 C i 94 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble reaksjonsblandingen fordelt mellom etylacetat og vann. Det organiske laget ble separert og det vandige laget ble ytterligere ekstrahert med etylacetat (3 x ml). De kombinerte organiske ekstraktene ble vasket med vann (0 ml) og saltløsning (0 ml), tørket over vannfritt MgSO4, filtrert og inndampet. Det resulterende faste stoff ble renset ved kolonnekromatografi under eluering med etylacetat: heksaner 0:0 til 60:40 v/v og dette ga 6,6 g (1%) av tittelforbindelsen (LCMS RT=,63 min, MH + 248). 1 H NMR (DMSO):,89 (1 H, d, J 0,68 Hz), 8,82 (1H, dd, J 1,7, 4,7 Hz), 8,32 (1H, dd, J 1,7, 7,9 Hz), 8,08 til 8,02 (2H, m), 7,8 (1H, dd, J7,9, 0,7 Hz), 7,81 (1H, dt, J 1,3, 7, Hz), 7,73 til 7,6 (2H, m). 3 [3-(2-benzensulfonylpyridin-3-ylmetyl)--fluor-2-metylindol-1-yl]-eddiksyre-etylester

19 18 [0084] 1 [008] En løsning av (-fluor-2-metylindol-1-yl)-eddiksyre-etylester (0,9 g, 4,04 mmol), fremstilt som beskrevet i eksempel 1 i WO/06/09279, og 2-(benzensulfonyl)- isonikotinaldehyd (1,0 g, 4,04 mmol) i tørr diklormetan (4 ml) ble tilsatt langsomt i løpet av minutter til en omrørt oppløsning av TMSOTf (1,46 ml, 8,08 mmol) i tørr diklormetan (12, ml), avkjølt til 0 C under N2. Denne blandingen ble omrørt i 1 minutter og trietylsilan (1,94 ml, 12,12 mmol) ble tilsatt i én porsjon. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 timer minutter, oppvarmet til romtemperatur og kjølt ved langsom tilsetning av mettet vandig NaHCO3 ( ml). Den resulterende bifasiske blandingen ble ekstrahert med diklormetan. De kombinerte organiske lagene ble vasket med saltvann, tørket over vannfritt MgSO4, filtrert og inndampet. Det resulterende faste stoff ble renset ved kolonnekromatografi under eluering med etylacetat: heksaner 0:0 til 60:40 v/v og dette ga 1,21 g (64%) av tittelforbindelsen (LCMS RT= 6,63 min, MH + 466,8). 1 H NMR (CDCl3):8,38 (1H, dd, J1.6, 4. Hz), 8.14 til 8.7 (2H, m), 7,67 (3 H, ddt, J1.3, 27.7, 7.4 Hz), 7,40 til 7,34 (1H, m), 7,22 (1H, dd, J4.6, 7.9 Hz), 7.12 (1H, dd, J4.2, 8.9 Hz), 6.90 (1H, dt, J2., 9.0 Hz), 6.72 (1H, dd, J2.4, 9. Hz), 4.82 (2H, s), 4.62 (2H, s), 4,24 (2H, q, J7,2 Hz), 2, (3H, s), 1,29 (3H, t, J7.2 Hz). 2 (3-{[2-(benzensulfonyl)pyridin-3-yl] metyl}--fluor-2-metylindol-1-yl)-eddiksyre (forbindelse 1) [0086]

20 19 [0087] Til en omrørt løsning av [3-(2-benzensulfonyl-pyridin-3-ylmetyl)--fluor-2- metylindol-1-yl]-eddiksyre-etylester (1, g, 2,6 mmol) i THF (26 ml) ble det tilsatt en oppløsning av kaliumhydroksyd (0,43 g, 7,68 mmol) i vann (9 ml). Den resulterende oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 3, timer. THF ble fjernet i vakuum og det gjenværende vandige lag ble surgjort med vandig HCl (0,1 M, 2 ml). Produktet ble oppsamlet ved filtrering, vasket med vann og tørket i vakuum og dette ga 1,12 g (0%) av tittelforbindelsen (LCMS RT= 4,8 min, M + -H 437,2). 1 H NMR (DMSO): 8,41 til 8,27 (1H, m), 8,06 til 7,91 (2H, m), 7,84 til 7,62 (3H, m), 7,0 til 7,31 (3H, m), 6,93 til 6,78 (2H, m), 4,99 (2H, s ), 4, (2H, s), 2,27 (3H, s). 1 Eksempel 2 - Fremstilling av [-fluor-3-({2-[(4-fluorbenzen)sulfonyl]pyridin-3- yl}metyl)-2-metylindol-1-yl]-eddiksyre (forbindelse 2) 2-(4-fluorbenzensulfonyl)-pyridin-3-karboksaldehyd [0088] 2 [0089] 2-klor-3-pyridinkarboksaldehyd (4,04 g, 2,86 mmol) og 4-fluorbenzensulfinsyrenatriumsalt (,73 g, 3,14 mmol) ble oppløst i DMSO (0 ml), og blandingen ble oppvarmet ved 0 C i 72 timer under nitrogen. Ved avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen fortynnet med vann (00 ml) og ekstrahert med EtOAc (3 x). De kombinerte organiske fasene ble vasket med vann, saltlake, tørket (MgSO4) og inndampet til tørrhet, og dette ga 7,89 g urent produkt. Den urene forbindelsen ble preabsorbert på silika og renset ved kolonnekromatografi med sug og tørr pad ved eluering

21 med heptan ved hjelp av en EtOAc-gradient, hvorved man fikk 4,14 g (41%) av det ønskede produkt som et gult faststoff (plater) (MP = ,3 C, IR = 1691 cm -1 ; HPLC = 7,21 min >99%). 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): (2H, m) 7,60 (1H, dd) 8,0 til 8, (2H, m) 8.37 (2H, dd) 8,67 (1H, dd) 11,1 (1H, s). 13 C NMR (0 MHz, CDCl3):116.6 (d) (d) (d) 1.7 (s) (d) (s) (d) 12. (s) 19.7 (s) 16.1 (s) (s) 188. (d). [-fluor-3-({2-[(4-fluorbenzenlsulfon)]pyridin-3-yl} metyl)-2-metylindol-1-yl]-eddiksyreetylester [0090] 1 2 [0091] En løsning av (-fluor-2-metylindol-1-yl)-eddiksyre-etylester (1,0 g, 4,4 mmol) og 2-(4-fluorbenzensulfonyl)-pyridin-3-karboksaldehyd (1,13 g, 4,3 mmol i tørr DCM (0 ml) ble tilsatt i løpet av til minutter til en omrørt oppløsning av TMSOTf i tørr DCM (1 ml) ved 0 C. Blandingen ble eldet i 1 minutter før tilsetning av rent trietylsilan (2,0 ml, 12,8 mmol) i én porsjon. Blandingen ble omrørt i ytterligere 1 timer og fikk varme seg opp til omgivelsestemperatur. Reaksjonen ble kjølt ved dråpevis tilsetning av mettet NaHCO3-løsning ( ml), og tofase-blandingen ble ekstrahert med DCM (2 x 0 ml). De kombinerte organiske fasene ble vasket med saltoppløsning (0 ml) og deretter tørket (MgSO4) og inndampet til tørrhet. Reaksjonen ble gjentatt på en identisk skala og de to urene materialene ble renset separat. Det urene reaksjonsmaterialet ble renset ved kolonnekromatografi under anvendelse av heptan og en etylacetat-gradient for å gi 0,90 g (43%) og 1,0 g (72%) av den ønskede forbindelse som henholdsvis et blekt fiolett fast stoff og et brunt fast stoff av forskjellige renheter (96,0 % og 94,% ved HPLC) (MP =, til 11, C, IR = 171 cm -1 ; HPLC = 12,24 min). 1 H NMR (400 MHz, CDCl3):1,26 (3H, t) 2.29 (3H, s) 4,22 (2H, q) 4.62 (2H, s) 4,80 (2H, s) 6,79 (1H, dd) 6,86 (1H, ddd) 7. (1H, dd) 7,19 (1H, dd) (2H, m) 7,36 (1H, dd) 8,0 til 8,11 (2H, m) 8,29 (1H, dd). 13 C NMR (0 MHz, CDCl3):.4 (q) 14.2 (q) 2.3 (t) 4,2 (t) 61,9 (t) 3.4 (d) 3.6

22 21 (d) 8.0 (s) 8.1 (s) 9.1 (d) 9.2 (d) 9. (d) 9.8 (d) (d) (d) (d) 128. (s) (s) (d) (d) (s) 13.1 (s) (s) (s) (d) 146,2 (d) 16,2 (s) 17,0 (s) 19,4 (s) 164,7 (s) 167,3 (s) 168,6 (s). [-fluor-3-({2-[(4-fluorbenzen)sulfonyl]pyridin-3-yl} metyl)-2-metylindol-1-yl]-eddiksyre (forbindelse 2) [0092] 1 [0093] KOH (0,34 g,,94 mmol) ble oppløst i vann (7 ml) og tilsatt til en kraftig omrørt oppløsning av [-fluor-3-({2-[(4-fluorbenzen)sulfonyl]pyridin-3-yl}-metyl)-2-metylindol- 1-yl]-eddiksyre-etylester (0,96 g, 1,98 mmol) i THF (21 ml) under nitrogen ved omgivelsestemperatur. Reaksjonen ble overvåket ved hjelp av TLC og LCMS. Etter 2 timer ble oppløsningsmidlet fjernet i vakuum før justering av ph til 1, ved hjelp av 0,1 M HCl-løsning. Presipitatet ble omrørt kraftig i 1 minutter før det ble isolert ved sugefiltrering. Det oppsamlede faste stoff ble vasket med vann og deretter MTBE, trukket tørt i luft og deretter tørket i vakuum ved 0 C, og dette ga 870 mg (97%) av produktet som et rosa, fast stoff (smp = C, IR = 1729 cm -1 ; HPLC =,80 min 99,3%). 1 H NMR (400 MHz, DMSO): 2,29 (3H, s) 4,6 (2H, s) 4.97 (2H, s) 6,8 til 6,91 (2H, m) (2H, m) 7,47 (1H, dd) 7,1 til 7,7 (2H, m) 8,06 til 8,1 (2H, m) 8.36 (1H, dd). 13 C NMR (0 MHz, DMSO):. (q) 2.0 (t) 4, (t) 2.7 (d) 2.9 (d) 7.7 (s) (s) 8.8 (d) 9.1 (d) 1.9 (d) (d) (d) ( d) (d) (d) (d) (d) (d) (d) 13. (s) (s) (s) (d) (d) 1.9 (s) 16.6 (s) 18.9 (s) (s) (s) (s). Eksempel 3 - Fremstilling av [3-({2-[(4-klorbenzen)sulfonyl]pyridin-3-yl} metyl)--fluor-2-metylindol-1-yl]-eddiksyre (forbindelse 3)

23 22 2-(4-klorbenzensulfonyl)-pyridin-3-karboksaldehyd [0094] 1 [009] 2-klor-3-pyridinkarboksaldehyd (,0 g, 3,0 mmol) og 4-klorbenzensulfinsyrenatriumsalt (7,7 g, 38,8 mmol) ble oppløst i DMSO (1 ml), og blandingen ble oppvarmet ved 0 C i 72 timer under nitrogen. Ved avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen fortynnet med vann (00 ml) og ekstrahert med EtOAc (3 x). De kombinerte organiske fasene ble vasket med vann, saltlake, tørket (MgSO4) og inndampet til tørrhet, og dette ga 8,1 g av urent materiale. Den urene forbindelsen ble pre-absorbert på silika og renset på kolonnekromatografi med sug og tørr pad ved eluering med heptan ved hjelp av en EtOAc-gradient, hvorved man fikk 4,62 g (61%) av det ønskede produkt som et hvitt, pulveraktig, fast stoff (smp = 0, til 1 C. IR = 1698 cm -1 ; HPLC = 8,00 min >99%). 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 7,6 (1H, dd) 7,60 (1H, dd) 7.99 (1H, dd) 8.38 (1H, dd) 8,67 (1H, dd) 11,1 (1H, s). 13 C NMR (0 MHz, CDCl3): 127,3 (d) 129,6 (d) 1,8 (s) 131,1 (d) 136, (s) 138,0 (d) 141,4 (s) 12, (d) 19, (s) 188,4 (d). [3-({2-[(4-klorbenzen)sulfonyl]pyridin-3-yl} metyl)--fluor-2-metylindol-1-yl]- eddiksyre-etylester 2 [0096]

24 23 1 [0097] En løsning av (-fluor-2-metyl-indol-1-yl)-eddiksyre-etylester (1,0 g, 4,2 mmol) og 2-(4-klorbenzensulfonyl)-pyridin-3-karboksaldehyd (1,19 g, 4,22 mmol) i tørr DCM (0 ml) ble tilsatt i løpet av til minutter til en omrørt oppløsning av TMSOTf i tørr DCM (1 ml) ved 0 C. Blandingen ble eldet i 1 minutter før tilsetning av rent trietylsilan (2,0 ml, 12,7 mmol) i én porsjon. Blandingen ble omrørt i ytterligere 1 timer og fikk varme seg opp til omgivelsestemperatur. Reaksjonen ble kjølt ved dråpevis tilsetning av mettet NaHCO3-løsning ( ml), og tofase-blandingen ble ekstrahert med DCM (2 x 0 ml). De kombinerte organiske fasene ble vasket med saltoppløsning (0 ml) og deretter tørket (MgSO4) og inndampet til tørrhet. Reaksjonen ble gjentatt på en identisk skala og de to urene produktene ble kombinert. Det urene reaksjonsmaterialet ble renset ved kolonnekromatografi under anvendelse av heptan og etylacetatgradient og dette ga 1,80 g (42%) av den ønskede forbindelse som et blekt oransje fast stoff (smp = 124,6 til 124,9 C, IR = 1741 cm -1 ; HPLC = 12.7 min 97,3%). 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 1,26 (3H, t) 2.29 (3H, s) 4. (2H, q) 4.62 (2H, s) 4,80 (2H, s) 6,80 (1H, dd) 6,87 (1H, ddd) 7. (1H, dd) 7,19 ( 1H, dd) 7,37 (1H, dd) 7,4 (2H, dd) 8,00 (2H, dd) 8.28 (1H, dd). 13 C NMR (0 MHz, CDCl3):.4 (q) 14.3 (q) 2.3 (t) 4,2 (t) 61,9 (t) 3.4 (d) 3.6 (d) 8.0 (s) 8.1 (s) 9.2 (d) 9.2 (d) 9. (d) 9.8 ( d) (d) 128. (s) (s) (d) 1.8 (d) (s) (s) (s) (s) (d) 140. (s) (d) 16,1 (s) 17,0 (s) 19,4 (s) 168,6 (s). 2 [3-({2-[(4-klorbenzen)sulfonyl]pyridin-3-yl}metyl)--fluor-2-metylindol-1-yl]-eddiksyre (forbindelse 3) [0098]

25 24 [0099] KOH (0,60 g,,7 mmol) oppløst i vann (14 ml) ble tilsatt til en kraftig omrørt løsning av [3-({2-[(4-klorbenzen)sulfonyl]pyridin-3-yl}metyl)--fluor -2-metylindol-1- yl]-eddiksyre-etylester (1,17 g, 3,49 mmol) i THF (40 ml) under nitrogen ved omgivelsestemperatur. Reaksjonen ble overvåket ved hjelp av TLC og LCMS. Etter 2 timer ble oppløsningsmidlet fjernet i vakuum før justering av ph til 1, ved hjelp av 0,1 M HCl-løsning. Presipitatet ble omrørt kraftig i 1 minutter før det ble isolert ved sugefiltrering. Det oppsamlede faste stoff ble vasket med vann og deretter MTBE, trukket tørt i luft og deretter tørket i vakuum ved 0 C for å gi 1,31 g (78%) av tittelforbindelsen som et rosa, fast stoff (smp = 12,2 til 126 C, IR = 1729 cm -1 ; HPLC = 11.37min> 99%). 1 H NMR (400 MHz, DMSO): 2,29 (3H, s) 4,6 (2H, s) 4.96 (2H, s) 6,8 til 6,91 (2H, m) 7,39 (1H, dd) 7,44 (1H, dd) 7,49 (1H, dd) 7,76 til 7,79 (2H, m) (2H, m) 8.36 (1H, dd). 13 C NMR (0 MHz, DMSO):. (q) 2.0 (t) 4,6 (t) 2.7 (d) 2.9 (d) 7.6 (s) (s) 8.8 (d) 9.0 (d) 1.9 (d) (d) (d) 1.0 ( d) (d) (d) (s) (d) (s) 140. (s) (d) 1.7 (s) 16. (s) 18.9 (s) (s). [00] I de følgende eksempler ble forbindelse 1-3 testet mot de følgende sammenlignende forbindelser: Cpd Navn Struktur A eddiksyre B [3-(4-metylsulfonyl-benzyl)--fluor-2-metyl-indol-1-yl]- [3-(3-benzensulfonyl-pyridin-4-ylmetyl)--fluor-2-metylindol-1-yl]-eddiksyre