(12) Translation of european patent specification

Transkript

1 (12) Translation of european patent specification (11) NO/EP B1 (19) NO NORWAY (1) Int Cl. C07K 16/00 (06.01) C07K 16/24 (06.01) C07K 16/28 (06.01) C07K 16/46 (06.01) C12N 1/ (06.01) Norwegian Industrial Property Office (21) Translation Published (80) Date of The European Patent Office Publication of the Granted Patent (86) European Application Nr (86) European Filing Date (87) The European Application s Publication Date () Priority.08.16, US, P , US, P , US, P (84) Designated Contracting States: AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO RS SE SI SK SM TR (73) Proprietor NovImmune S.A., 14 ch. Des Aulx Plan-Les-Ouates, 1228 Geneva, CH-Sveits (72) Inventor FISCHER, Nicolas, 16 Ch. des Ouches, 13 Geneva, CH-Sveits MAGISTRELLI, Giovanni, 327 Rue du Mt-Blanc, Cessay, FR-Frankrike GUENEAU, Franck, 19 Allee des Cèdres, Saint-Julien-en-Genevois, FR- Frankrike RAVN, Ulla, Rue Cavour, 13 Geneva, CH-Sveits ELSON, Greg, 222 Route de Bossey, Collonges sous Salève, FR-Frankrike (74) Agent or Attorney Bryn Aarflot AS, Postboks 449 Sentrum, 04 OSLO, Norge (4) Title METHODS FOR THE GENERATION OF MULTISPECIFIC AND MULTIVALENT ANTIBODIES (6) References Cited: WO-A1-/138 US-A JIJIE GU AND TARIQ GHAYUR: "Rationale and development of multispecific antibody drugs", EXPERT REVIEW OF CLINICAL PHARMACOLOGY, EXPERT REVIEWS LTD, GB, vol. 3, no. 4, 1 July (-07-01), pages , XP , ISSN: , DOI:.186/ECP..28 FISCHER NICOLAS ET AL: "Bispecific antibodies: Molecules that enable novel therapeutic strategies", PATHOBIOLOGY, KARGER, BASEL, CH, vol. 74, no. 1, 1 May 07 ( ), pages 3-14, XP00828, ISSN: 1-08, DOI:.119/00046 MORRISON S L: "Two heads are better than one", NATURE BIOTECHNOLOGY, NATURE PUBLISHING GROUP, NEW YORK, NY, US, vol. 2, no. 11, 1 November 07 ( ), pages , XP , ISSN: , DOI:.38/NBT FISCHER N: "New magic bullets can hit more than one target", EXPERT OPINION ON DRUG DISCOVERY, INFORMA HEALTHCARE, LONDON, GB, vol. 3, no. 8, 1 January 08 ( ), pages , XP , ISSN: FAGETE SEVERINE ET AL: "Specificity tuning of antibody fragments to neutralize two human chemokines with a single agent", MABS, LANDES BIOSCIENCE, US, vol. 1, no. 3, 7 April 09 ( ), pages , XP , ISSN: , DOI:.4161/MABS RAVN U ET AL: "By-passing in vitro screening-next generation sequencing technologies applied to antibody display and in silico candidate selection", NUCLEIC ACIDS RESEARCH, vol. 38, no. 21, 1 September (-09-1), XP , ISSN: 0-48

2 Enclosed is a translation of the patent claims in Norwegian. Please note that as per the Norwegian Patents Acts, section 66i the patent will receive protection in Norway only as far as there is agreement between the translation and the language of the application/patent granted at the EPO. In matters concerning the validity of the patent, language of the application/patent granted at the EPO will be used as the basis for the decision. The patent documents published by the EPO are available through Espacenet ( or via the search engine on our website here:

3 1 PATENTKRAV 1. Isolert monoklonalt antistoff som bærer en forskjellig spesifisitet i hvert kombinasjonssete og som består av to kopier av et enkelt tung kjede polypeptid og en første lett kjede og en andre lett kjede, hvor første og andre lette kjeder er forskjellige. 2. Isolert monoklonalt antistoff ifølge krav 1, hvor minst en del av den første lette kjeden er av Kappa typen og minst en del av den andre lette kjeden er av Lambda typen. 3. Isolert monoklonalt antistoff ifølge krav 2, hvor den første lette kjeden omfatter minst en Kappa konstant region Isolert monoklonalt antistoff ifølge krav 3, hvor den første lette kjeden videre omfatter en Kappa variabel region eller en Lambda variabel region.. Isolert monoklonalt antistoff ifølge krav 2, hvor den andre lette kjeden omfatter minst en Lambda konstant region. 6. Isolert monoklonalt antistoff ifølge krav, hvor den andre lette kjeden videre omfatter en Lambda variabel region eller en Kappa variabel region Isolert monoklonalt antistoff ifølge krav 2, hvor den første lette kjeden omfatter en Kappa konstant region og en Kappa variabel region, hvor den andre lette kjeden omfatter en Lambda konstant region og en Lambda variabel region. 8. Isolert monoklonalt antistoff ifølge ethvert av de foregående krav, hvor de konstante og variable rammeverkregion-sekvenser er humane Fremgangsmåte for å danne et bispesifikt antistoff ifølge krav 1, som omfatter: a. isolering av en antistoff- eller en antistoffragment-region med en spesifisitet som bestemt ved et tung kjede variabelt domene kombinert med et første lett kjede variabelt domene; b. isolering av en antistoff- eller antistoffragment-region med en forskjellig spesifisitet bestemt ved det samme tung kjede variable domenet som antistoffet i trinn a) kombinert med et andre lett kjede variabelt domene;

4 2 c. koekspresjon i en celle av: i. det felles tung kjede variable domenet fusjonert til en immunoglobulin tung kjede konstant region; ii. det første lett kjede variable domenet fusjonert til enten et lett kjede konstant domene av Kappa typen eller fusjonert til et lett kjede konstant domene av Lambda typen; og iii. det andre lett kjede variable domenet fusjonert til et lett kjede konstant domene av en forskjellig type enn det konstante domenet av den første lette kjeden. 1. Fremgangsmåte ifølge krav 9, hvor a. et Kappa lett kjede variabelt domene er fusjonert til en konstant region av Kappa typen, eller b. et Kappa lett kjede variabelt domene er fusjonert til en konstant region av Lambda typen, eller c. et Lambda lett kjede variabelt domene er fusjonert til en konstant region av Kappa typen, eller d. et Lambda lett kjede variabelt domene er fusjonert til en konstant region av Lambda typen. 11. Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 9 til, som videre omfatter trinnet med d) rensing av de bispesifikke antistoffer produsert i trinn c) fra de monospesifikke antistoffer produsert i trinn c) hvor trinn d) eventuelt er et affinitetskromatografi-rensetrinn Fremgangsmåte ifølge krav 11, hvor rensetrinnet er et affinitetskromatografirensetrinn gjennomført ved å anvende Kappa konstant domene spesifikke, Lambda konstant domene spesifikke eller både Kappa konstant domene spesifikke og Lambda konstant domene spesifikke affinitetskromatografimedier Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 9 til 12, hvor trinnet a) og b) forenkles ved anvendelse av antistoffbiblioteker med en felles tung kjede og diversitet begrenset til lett kjede variabelt domenet, hvor antistoffbiblioteket eventuelt er fremvist på filamentøs bakteriofag, på overflaten av gjær, bakterier eller pattedyrceller eller anvendes for ribosom eller annen type in vitro fremvisning.

5 Fremgangsmåte for fremstilling av et bispesifikt antistoff som spesifikt binder til et første antigen og et andre antigen, hvor de første og andre antigener er forskjellige, som omfatter: a. tilveiebringelse av et første nukleinsyremolekyl som koder for et første polypeptid som omfatter en tung kjede variabel region av et immunoglobulinpolypeptid eller fragment derav som binder det første antigen, koblet til en immunoglobulin konstant region; b. tilveiebringelse av et andre nukleinsyremolekyl som koder for et andre polypeptid som omfatter en lett kjede variabel region av immunoglobulinpolypeptidet eller fragment derav som binder det første antigenet koblet til en første Kappa-type eller Lambda-type lett kjede konstant region; c. tilveiebringelse av et tredje nukleinsyremolekyl som koder for et tredje polypeptid som omfatter en lett kjede variabel region av et immunoglobulinpolypeptid eller fragment derav som deler den samme tung kjede variable region av immunoglobulinpolypeptidet eller fragment derav i trinn a) og binder det andre antigen, koblet til en andre Kappatype eller Lambda-type lett kjede konstant region, hvor de første og andre lett kjede konstante domener er forskjellige typer; og d. dyrking av en vertscelle som omfatter de første, andre og tredje nukleinsyremolekyler under betingelser som tillater ekspresjon av de første, andre og tredje polypeptider Fremgangsmåte ifølge krav 14, som videre omfatter trinnet e) for utvinning av det bispesifikke antistoffet. 16. Fremgangsmåte ifølge krav 14, hvor den andre nukleinsyren koder for et Kappa-type lett kjede variabelt domene. 17. Fremgangsmåte ifølge krav 16, hvor den andre nukleinsyren koder for en Kappa-type konstant region eller en Lambda-type konstant region eller et Lambda-type lett kjede variabelt domene Fremgangsmåte ifølge krav 17, hvor den andre nukleinsyren koder for et Lambda-type lett kjede variabelt domene, hvor den andre nukleinsyren koder for en Kappa-type konstant region eller en Lambda-type konstant region.

6 4 19. Fremgangsmåte ifølge krav 14, hvor den tredje nukleinsyren koder for et Kappa-type lett kjede variabelt domene.. Fremgangsmåte ifølge krav 19, hvor den tredje nukleinsyren koder for en Kappa-type konstant region eller en Lambda-type konstant region. 21. Fremgangsmåte ifølge krav 14, hvor den tredje nukleinsyren koder for et Lambda-type lett kjede variabelt domene. 22. Fremgangsmåte ifølge krav 21, hvor den tredje nukleinsyren koder for en Kappa-type konstant region eller en Lambda-type konstant region Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 14 til 22, hvor det bispesifikke antistoffet utvinnes i et trinn e) ved å anvende et affinitetskromatografirensetrinn hvor rensetrinnet eventuelt utføres ved å anvende Kappa konstant domene spesifikke, Lambda konstant domene spesifikke eller både Kappa konstant domene spesifikke og Lambda konstant domene spesifikke kromatografimedier. 24. Antistoffblanding som omfatter to monospesifikke antistoffer og et bispesifikt antistoff, som alle har en felles tung kjede Fremgangsmåte for å danne en antistoffblanding ifølge krav 24, som omfatter: a. isolering av en antistoff- eller antistoffragment-region med en spesifisitet bestemt ved et tung kjede variabelt domene kombinert med et første lett kjede variabelt domene; b. isolering av en antistoff- eller antistoffragment-region med en forskjellig spesifisitet bestemt ved det samme tung kjede variable domenet som antistoffet i trinn a) kombinert med et andre lett kjede variabelt domene; c. koekspresjon i en celle av: i. det felles tung kjede variable domenet fusjonert til en immunoglobulin tung kjede konstant region; ii. det første lett kjede variable domenet fusjonert enten til et lett kjede konstant domene av Kappa-typen eller fusjonert til et lett kjede konstant domene av Lambda-typen;

7 iii. det andre lett kjede variable domenet fusjonert til enten et lett kjede konstant domene av Kappa-typen eller fusjonert til et lett kjede konstant domene av Lambda-typen; og eventuelt d. rensing av antistoffblandingen fremstilt i trinn c) fra cellekultursupernatant. 26. Antistoffblanding som omfatter tre eller flere monospesifikke antistoffer og tre eller flere bispesifikke antistoffer, som alle har en felles tung kjede Fremgangsmåte for å danne en antistoffblanding ifølge krav 26, som omfatter: a. isolering av en antistoff- eller antistoffragment-region med en spesifisitet bestemt ved et tung kjede variabelt domene kombinert med et første lett kjede variabelt domene; b. isolering av flere antistoff- eller antistoffragment-regioner med forskjellig spesifisitet bestemt ved det samme variable tung kjede domenet som antistoffet i trinn a) kombinert med forskjellige lett kjede variable domener; c. koekspresjon i en celle av: i. det felles tung kjede variable domenet fusjonert til en immunoglobulin konstant region; ii. alle de lette kjedene til antistoffene isolert i trinn a) og b) fusjonert enten til et lett kjede konstant domene av Kappa-typen eller fusjonert til et lett kjede konstant domene av Lambda-typen; og eventuelt d. rensing av antistoffblandingen fremstilt i trinn c) fra cellekultursupernatant.