MBT Sepsityper IVD Kit

Transkript

1 Bruksanvisning MBT Sepsityper IVD Kit Sett for identifisering av mikroorganismer fra positive blodkulturer ved hjelp av IVD MALDI Biotyper-systemet CARE- produkter er utformet for å støtte kunder verden over med artikler, tilbehør og dedikerte sett av høy kvalitet. CARE- produktserien er spesielt optimalisert og sertifisert for bruk med alle Bruker Daltonics-systemer. Språk: no Revisjon D (September 2016)

2 1 Tiltenkt bruk 2 2 Produktbeskrivelse 2 3 Inspeksjon, oppbevaring og holdbarhet Inspeksjon ved ankomst Oppbevaring før og etter åpning 3 4 Risiko- og sikkerhetsinformasjon Biologiske risikoer Prosedyrens begrensninger 4 5 Nødvendige kjemikalier og utstyr Kjemikalier Utstyr og artikler Anbefalt utstyr for høsting av blodkultur 6 6 Klargjøringsprosedyre for MBT Sepsityper IVD MBT Sepsityper IVD-applikasjonstrening 7 7 Produsent 8 1 Tiltenkt bruk MBT Sepsityper IVD Kit er et in-vitro- diagnostisk sett for klargjøring av prøver, som brukes til å identifisere mikroorganismer i positivt markerte blodkulturer ved hjelp av IVD MALDI Biotyper. Det brukes i kombinasjon med andre klinikk- og diagnoseprosedyrer, som et verktøy for tidlig diagnostisering av for eksempel sepsis. 2 Produktbeskrivelse I klinisk praksis føres blod (ca. 10 ml) fra pasienter som mistenkes å ha for eksempel sepsis, over i dyrkningsflasker for blodkultur. Flaskene inkuberes i et automatisk identifiseringssystem som påviser eventuelle bakterier, gjærsopp eller sopp i prøvene. MBT Sepsityper IVD Kit ødelegger blodceller selektivt og tilsetter mikroorganismer fra en blodkultur som er markert som positiv. De ferdige ekstraktene er egnet for analyse med bruk av IVD MALDI Biotyper- systemet. MBT Sepsityper IVD Kit gjør det mulig å identifisere relevante arter av mikroorganismer med høy sannsynlighet innen 30 minutter ved hjelp av IVD MALDI Biotyper-systemet. Når arten er identifisert, kan man i mange tilfeller beregne mikroorganismens følsomhet for en rekke antibiotika. Dette er et sett til in vitro-diagnostikk. Side 2 av 8 MBT Sepsityper IVD Kit Bruksanvisning Revisjon D

3 Settkomponenter MBT Sepsityper IVD Kit inneholder følgende komponenter: Lysis Buffer Washing Buffer 1,5 ml mikrosentrifugerør (50 stk.) Etiketter Hurtigveiledning formbt Sepsityper IVD Kit Bestillingsinformasjon Produkt Delenummer MBT Sepsityper IVD Kit for 50 prøver # Inspeksjon, oppbevaring og holdbarhet 3.1 Inspeksjon ved ankomst Kontroller MBT Sepsityper IVD Kit ved ankomst. Dersom emballasjen er skadet, må du kontrollere rørene/flaskene som er inni den. Dersom rørene/flaskene er skadet, må MBT Sepsityper IVD Kitikke brukes. MBT Sepsityper IVD Kit (rør/flasker og emballasje) kastes i henhold til retningslinjene som finnes i sikkerhetsdatabladet for produktet. Ta kontakt med Bruker for nytt utstyr. 3.2 Oppbevaring før og etter åpning +20 C +25 C Se etter om det er bunnfall i MBT Sepsityper IVD Kit før åpning. Dersom det er bunnfall, må Lysis Buffer oppbevares i romtemperatur (20 25 C) i minst en time og ristes før åpning. Etter åpning er MBT Sepsityper IVD Kit holdbar i opptil tre måneder i romtemperatur (20 25 C). MBT Sepsityper IVD Kit må ikke brukes etter utløpsdatoen som er trykt på pakningsetiketten. Revisjon D MBT Sepsityper IVD Kit Bruksanvisning Side 3 av 8

4 4 Risiko- og sikkerhetsinformasjon Lysis Buffer er klassifisert som et farlig kjemikal: FARE (H: 315, 318) 1 For mer informasjon kan sikkerhetsdatabladet lastes ned på Andre kjemikalier og materialer kan være nødvendig for å utføre prosedyrer beskrevet i denne bruksanvisningen. Les advarslene, instruksjonene og sikkerhetsdatabladet fra leverandøren nøye, og følg generelle sikkerhetsregler når du håndterer kjemikalier, biologisk avfall eller annet utstyr. 4.1 Biologiske risikoer MBT Sepsityper IVD Kit og IVD MALDI Biotyper- systemet behandler potensielt farlig biologisk materiale. Enhver som jobber med disse systemene har ansvar for å følge alle nødvendige helseforskrifter og sikkerhetsregler. Alle pasientprøver og kulturer må anses som potensielt smittefarlige. Det er kun kvalifisert laboratoriepersonell som skal jobbe med MBT Sepsityper IVD Kit og IVD MALDI Biotyper-systemet skal kun håndteres av kvalifisert laboratoriepersonell. De er ansvarlige for å ta nødvendige forholdsregler og følge alle sikkerhetsregler for håndtering av potensielt smittefarlig materiale. Det er svært viktig å bruke personlig verneutstyr til enhver tid. Det omfatter labfrakk, beskyttelseshansker og vernebriller. Forsikre deg om at det personlige verneutstyret er i god stand. Når MBT Sepsityper IVD-arbeidsflyten utføres, blandes enkelte reagenser med mikroorganismer og dermed også potensielt farlig biologisk materiale. Noe av tilbehøret og artiklene som brukes, kommer i kontakt med mikroorganismer. Det er brukerens ansvar å håndtere, kaste og dekontaminere de aktuelle substansene, tilbehørene og artiklene på en forsiktig måte i henhold til nasjonale eller lokale sikkerhetslover og -regler. 4.2 Prosedyrens begrensninger Identifiseringen av multimikrobielle infeksjoner eller kontaminasjoner (blandede kulturer) ved bruk av biokjemiske metoder kan gi feil resultater. Hvis MBT Sepsityper IVD Kit benyttes, kan det oppstå tvetydige resultater. I slike tilfeller kan det hende at kun én av mikroorganismene er identifisert, ingen identifisering har funnet sted, eller det er generert et hint for blandede kulturer (kun i MBT Sepsityper IVD-modul). 1 H315: Forårsaker hudirritasjon; P264: Vask hendene grundig etter håndtering; P280: Bruk beskyttelseshansker / beskyttende klær / vernebriller / ansiktsbeskyttelse; P302+P352: VED HUDKONTAKT: Vask med såpe og vann; P321: Spesifikk behandling (se førstehjelpstiltak i sikkerhetsdatabladet); P332+P313 Ved hudirritasjon: Oppsøk lege; P362+P364: Ta av kontaminerte klær og vask dem før de brukes på nytt. H318: Forårsaker alvorlig øyeskade; P280: Bruk beskyttelseshansker / beskyttende klær / vernebriller / ansiktsbeskyttelse; P305+P351+P338: VED ØYEKONTAKT: Skyll forsiktig med vann i noen minutter. Fjern eventuelle kontaktlinser hvis det er mulig. fortsett å skylle med vann; P310: Ta umiddelbart kontakt med GIFTINFORMASJONEN eller en lege. Side 4 av 8 MBT Sepsityper IVD Kit Bruksanvisning Revisjon D

5 Merk Genereringen av et hint for blandede kulturer er en sterk indikasjon, men ingen bekreftelse, på at en prøve inneholder en blanding av organismer. På den annen side vil en prøve som inneholder en blanding av organismer, ikke nødvendigvis generere et hint for blandede kulturer. Som med alle andre MALDI Biotyper-analyser må derfor også endelige resultater fra Sepsityper-prøver vurderes av profesjonelt personell med erfaring i klinisk mikrobiologi. For å kontrollere om positive blodkulturer inneholder blandede kulturer er det vanlig mikrobiologisk praksis å subkultivere hver blodkulturprøve i en agarskål. Dagen etter undersøkes koloniene i skålen. Tilstedeværelse av heterogene kolonier indikerer at det er mer enn én art mikroorganismer i prøven. Enhver blodkulturidentifisering ved hjelp av MBT Sepsityper IVD Kit må bekreftes ved å kontrollere at koloniene på platene er homogene, og all kolonimorfologi må bekreftes ved hjelp av IVD MALDI Biotyper-systemet. 5 Nødvendige kjemikalier og utstyr 5.1 Kjemikalier I tillegg til MBT Sepsityper IVD Kit- komponentene Lysis Buffer og Washing Buffer, er følgende kjemikalier og utstyr nødvendig for å utføre arbeidsflyten for MBT Sepsityper IVD-prøveklargjøring. For best resultater bør du bruke nylig klargjorte og renest mulige løsninger (for eksempel HPLC- eller CHROMASOLV LC-MS-løsninger). Absolutt etanol Maursyre Acetonitril Vann av HPLC-kvalitet IVD Bacterial Test Standard (IVD BTS, nr , Bruker Daltonik GmbH) IVD Matrix HCCA-portioned ( IVD HCCA, nr , Bruker Daltonik GmbH) Standardløsning (acetonitril 50 %, vann 47,5 % og trifluoreddiksyre 2,5 %) fra Sigma- Aldrich (nr ) eller SOLUTION OS fra VWR International GmbH (nr. PRLS , 250 ml) som er testet av Bruker Daltonik GmbH og er anbefalt for oppløsning av IVD BTS og IVD HCCA. 5.2 Utstyr og artikler MALDI-målplate av typen som passer den aktuelle arbeidsflyten Vorteksmikser Bordsentrifuge Hylle til rør Pipetter Pipettetupper Revisjon D MBT Sepsityper IVD Kit Bruksanvisning Side 5 av 8

6 5.3 Anbefalt utstyr for høsting av blodkultur BD 1 Vacutainer blodprøverør (8,5 ml), BD nr BD Vacutainer Eclipse blodprøvenål, BD # BD Vacutainer nåleholder, BD nr Merk Andre prøvetakingsmetoder kan brukes. Les advarslene, instruksjonene og sikkerhetsdatabladet fra leverandøren nøye, og følg generelle sikkerhetsregler når du håndterer kjemikalier, biologisk avfall eller annet utstyr. 6 Klargjøringsprosedyre for MBT Sepsityper IVD Høsting av blodkultur 1. Desinfiser veggen på blodkulturflasken med 70 % etanol eller lignende. 2. Samle tilstrekkelig mengde blodkultur. Prøveklargjøring ved hjelp av MBT Sepsityper IVD Kit Merk Ekstra prosedyretrinn som må utføres ved bruk av biomérieux blodkulturflasker som inneholder aktivert kull, står i kursiv. 3. Overfør 1 ml blodkultur til et Eppendorf-rør. 4. Tilsett 200 µl Lysis Buffer, og bland med vorteksing i 10 (± 5) sekunder. a. Tilsett 800 µl av denne blandingen i en SigmaPrep sentrifugeringskolonne (Sigma-Aldrich SC1000-1KT). b. Sentrifuger i 2 minutter ved 2000 o/min, og kast filteret. c. Gå til trinn Sentrifuger røret i 2 minutter ved o/min. 6. Fjern og kast supernatanten ved hjelp av en pipette. 7. Tilsett 1 ml Washing Buffer, og resuspender pelleten ved å pipettere opp og ned. 8. Sentrifuger røret i 1 minutt ved o/min. 9. Fjern og kast supernatanten ved hjelp av en pipette. Ekstraksjonsmetode og klargjøring av prøver på en MALDI-målplate 10. Tilsett 300 µl HPLC-separert vann, og resuspender pelleten ved å pipettere opp og ned. 11. Tilsett 900 µl etanol, og bland suspensjonen. 12. Sentrifuger røret i 2 minutter ved o/min. 13. Fjern og kast supernatanten ved hjelp av en pipette. 14. Sentrifuger røret i 2 minutter ved o/min. 15. Fjern og kast overflødig etanol ved hjelp av en pipette. 16. La pelleten tørke i 5 (±1) minutter ved romtemperatur. 1 Becton, Dickinson and Company Side 6 av 8 MBT Sepsityper IVD Kit Bruksanvisning Revisjon D

7 17. Tilsett 2 50 μl 1 70 % maursyre, og resuspender pelleten ved å pipettere opp og ned. 18. Tilsett samme volum acetonitril, og bland suspensjonen ved å pipettere opp og ned to eller tre ganger. 19. Sentrifuger røret i 2 minutter ved o/min. 20. Tilsett 1 µl supernatant på en MALDI-målplateposisjon. 21. Ved validering av IVD-systemet tilsettes 1 µl rekonstituert IVD BTS-løsning 2 på minst én MALDImålplateposisjon. FORSIKTIG: Forsinket / tapt / ingen identifiseringsresultater mulig Når prøven har tørket, må IVD HCCA-matriseløsningen tilsettes innen 30 minutter. Identifiseringsresultater fra en prøve som ble overdekket med IVD HCCAmatriseløsning i mer enn 30 minutter etter tørking, må vrakes. Klargjøring av denne prøven må gjentas på en ledig prøveposisjon eller på en annen MALDI-målplate. 22. La prøvene tørke ved romtemperatur. 23. Dekk over hver prøve med 1 µl rekonstituert IVD HCCA-matriseløsning La prøvene som er dekket med matrise, tørke ved romtemperatur. 25. Prøven med testmikroorganismer er nå klar for å gjennomgå identifiseringsprosessen. Sett MALDI- målplaten inn i MALDI- TOF- massespektometeret, og følg arbeidsflyten beskrevet i brukerhåndboken for programvaren. 6.1 MBT Sepsityper IVD-applikasjonstrening En MBT Sepsityper IVD- applikasjonstrening er tilgjengelig for å forbedre påliteligheten og suksessraten for prøveklargjøring med MBT Sepsityper IVD Kit. 1 Volumet av maursyren og acetonitrilen som er tilsatt pelleten, bør være proporsjonal med størrelsen på pelleten. På veldig små pellets kan volumet reduseres til 2 μl per stykk. 2 klargjort som beskrevet i bruksanvisningen IVD Bacterial Test Standard 3 klargjort som beskrevet i bruksanvisningen IVD Matrix HCCA-portioned Revisjon D MBT Sepsityper IVD Kit Bruksanvisning Side 7 av 8

8 7 Produsent Bruker Daltonik GmbH Fahrenheitstraße Bremen Tyskland Støtte E-post: biotyper.support@bruker.com Telefon: +49 (421) Faks: +49 (421) Salgsinformasjon E-post: care@bruker.com Telefon: +49 (421) Nettside: # Beskrivelser og spesifikasjoner erstatter all tidligere informasjon og kan endres uten varsel. Copyright 2016 Bruker Daltonik GmbH Side 8 av 8 MBT Sepsityper IVD Kit Bruksanvisning Revisjon D