Mikrobiologi i Rotatorieresirkuleringsanlegget

Transkript

1 Store programmer HAVBRUK - En næring i vekst Faktaark Mikrobiologi i Rotatorieresirkuleringsanlegget Jose Rainuzzo (SINTEF Fiskeri og havbruk AS, 7465 Trondheim) og Arne Kjøsnes (VannVekst, 7510 Stadsbygd) Mål: Å følge utviklingen av bakteriefloraen i resirkanlegget mhp. total bakteriemengde, Vibrio, Pseudomonas, andel hurtigvoksende og hemolyttiske bakterier i rotatoriekulturene, skimmet/ozonert vann og i biofilteret, etter oppstart av ny kultur. Metoder: Mikrobiologiprøver ble tatt ca. 2.hver dag i 2-3 uker etter oppstart av ny kultur. Det ble tatt prøver fra: 1. Rotatoriekultur (både vann og rotatorier), velg ut 2 faste prøvetakingskar. 2. Etter proteinskimmer/ozon behandling 3. Biofilter Prøvene ble sadd ut på M65 sjøvannsagar (en marin agar, total CFU), TCBS (Vibrio), Pseudomonas-agar (NB! Bruk 80% sjøvann ved tilberedning), blodagar med salt (hemolyttiske bakterier). Det ble tatt også ut vannprøver som ble fiksert med glutaraldehyd til TC (epifluorescence mikroskop). Skåler ble inkubert ved 20 C. M65-skålene telles på dag 2 og 14 (ca) for beregning av andel hurtigvoksende bakterier (kun vannprøvene). TCBS og blodagar ble telt etter 2-3 dager.

2 Resultater/Diskusjon: Det ble nådd rotatorietettheter på over 2500 ind/ml før kulturene kollapset etter ca 10 dager. Prøvetakingen ble avsluttet på dag 11. Bakterieinnholdet i rotatorier holder seg ganske jevnt, rundt 5000 CFU/ind, inntil kulturene kollapser. Da går også andel hemolyttiske bakterier opp. Andel vibrio er lav i hele perioden, det er typisk for Havbrukssenteret. Andel pseudomonas ligger rundt 40%; dette er vanlige bakterier i rotatorier. Det er ikke disse bakteriene som blomstrer opp under kollapsen. PV2 er et mål på hurtigvoksende bakterier, og vanligvis bruker vi dette målet kun på vannbakterier. I rotatorier (og andre dyr; artemia, larver) vi PV2 normalt være høy pga at bakteriene trolig må vokse rasket for å overleve i tarmen. I vann med stabil, modnet bakterieflora ligger PV2 under 20%. En skulle derfor forventet en lav PV2 i vann og biofilter i dette anlegget, iallefall etter en tid. Etter innledningsvis høy PV2 i vann pga inokuleringen med rotatorier var også tendensen at PV2 sank, men etter bytte av fôr steg den raskt igjen i rotatorietankene. De siste prøvetakningene er preget av ustabilitet. De økende bakteriemengdene tyder på at den organiske belastningen ble for høy. Så lenge rotatoriene var i god vekst, klarte de å beite og fordøye bakterier, men etter kultur-kollaps ble kondisjonen for dårlig. Det unormalt høye bakterieinnholdet i bakterier fra de kollasede kulturene, tyder på at disse rotatoriene er infisert/i ferd med å bli spist opp av bakterier. Oppsummering: Tendensen er at bakteriemengden i anlegget øker jevnt i hele perioden. Systemet er ikke i likevekt, da det trolig blir tilført mer fôr enn det som rotatoriene klarer å omsette. Ved å beregne fôrdose pr individ får man sikkert et klarere bilde på om dette stemmer. Ozon skal drepe bakterier i skimmeren. Vann fra skimmer og biofilter hadde lik bakterieflora, både kvalitativt og kvantitativt. Det er mulig at organisk belastning var for høy i anlegget til at ozonering hadde god desinfiserende effekt. Sammensetningen av bakteriefloraen var stabil i rotatoriene etter at de hadde blitt flyttet over i anlegget, og de hadde et jevnt høyt innhold av Pseudomonas, som er normalt for

3 rotatorier, inntil kollapsen. Lite Vibrio. Sammensetningen av bakteriefloraen i vann var ustabil, men en begynnende stabilisering ble observert (minkende PV2) inntil kollapsen. Figur 1: Vekst av rotatoriene i forsøksperioden. Figur 2: Totalt bakterieinnhold (påm65 sjøvannsagar) i rotatorier.

4 Figur 3: Sammensetning av bakterieflora i rotatorier. PV2 er andel hurtigvoksende bakterier. Figur 4: Totalt bakterieinnhold (på M65 sjøvannsagar) i vannet i de to prøvekarene.

5 Figur 5: Sammensetning av bakterieflora i vannet. Figur 6: Totalt bakterieinnhold (M65) i rotatorier og vann fra to tanker.

6 Figur 7: Bakterieinnhold (M65) i vann fra skimmer og biofilter. Figur 8: Sammensetning av bakterieflora i vann fra skimmer. Figur 9: Sammensetning av flora i vann fra biofilteret /120 Institusjon: Havforskningsinstituttet, Austevoll havbruksstasjon Prosjektleder: Torstein Harboe Kontaktperson: Torstein Harboe, 5392 Storebø E-post: Torstein.Harboe@imr.no