Prøvematerialets holdbarhet

Transkript

1 Prøvematerialets holdbarhet - noen erfaringer fra Trondheim Arne Åsberg, St. Olavs Hospital, mars

2 Hva er holdbarhet? Referansematerialets holdbarhet (ISO Guide 30) Den evne materialet har til å beholde den erklærte egenskap innenfor definerte grenser når det lagres under definerte forhold i et definert tidsrom Prøvematerialets holdbarhet - forslag Den evne materialet har til å beholde opprinnelig måleverdi innenfor definerte grenser når det lagres under definerte forhold i et definert tidsrom 2

3 Hvordan måle holdbarhet? Studere endringer etter lagring Gjennomsnittet av flere prøver Enkeltprøver 3

4 Kriterier for holdbarhet Endringer i gjennomsnitt av flere prøver Krav Endring av gjennomsnitt < tillatt systematisk feil med 95% sikkerhet Begrunnelse Tillatt systematisk feil er det største avvik gjennomsnittet kan ha for at målemetoden kan beholde sin antatte kliniske nytteverdi 4

5 Tillatt systematisk feil Systematisk feil skal ikke vesentlig øke feilklassifisering i forhold til referansegrensene Andel utenfor referansegrensene øker med mindre enn 16% hvis systematisk feil er mindre enn 1/4 av normal, total biologisk variasjon eller mindre enn 1/16 av referanseområdets bredde 5

6 Tillatt systematisk feil Tenkt analytt med referanseområde mmol/l, og tillatt systematisk feil (120-80)/16 mmol/l = 2,5 mmol/l 6

7 Kriterier for holdbarhet Endringer i enkeltprøver Krav I minst 95 % prøvene skal endringene < tillatt totalfeil Begrunnelse Tillatt totalfeil er det største avvik en enkelt måleverdi kan ha for å beholde sin antatte kliniske nytteverdi 7

8 Tillatt totalfeil Tillatt totalfeil = tillatt systematisk feil + 1,65 tillatt upresisjon 8

9 Én mulig framgangsmåte Hver prøve deles i like mange porsjoner som antall oppbevaringsmåter Porsjonene oppbevares i planlagt tid under de relevante fysiske forholdene Deretter settes porsjonene i -80 C-fryser for å eliminere ytterligere endringer Alle porsjoner tines og analyseres i samme "batch", for mest mulig å eliminere analytiske faktorer som årsak til endring av måleverdi Til slutt vurderes resultatene mot holdbarhetskriteriene 9

10 Lag en plan Innsamling og porsjonering Oppbevaring Analyse av prøver Innsamling og vurdering av analyseresultater Arbeidstider Arbeidsmengde Kostnader 10

11 Tre viktige elementer i planen 1. De fysiske forholdene for oppbevaring av prøvene 2. Holdbarhetskriteriene 3. Antall prøver 11

12 De fysiske forholdene Tid Temperatur Lys Eventuelle andre betingelser 12

13 Holdbarhetskriteriene Bestem tillatt systematisk feil og tillatt totalfeil En mulig kilde er Se henholdsvis "B%" og "TE%" under "Desirable specification" Men vurdér grunnlaget nøye 13

14 Antall prøver Kostnadshensyn tilsier et relativt lite antall prøver Presis bestemmelse av gjennomsnittene tilsier et relativt stort antall prøver Stor sannsynlighet for å oppdage ikke-holdbarhet i noen få enkeltprøver tilsier et relativt meget stort antall prøver 14

15 Antall prøver Eksempel Tillatt systematisk feil er 16%. Vi ønsker ikke at et gjennomsnittlig avvik på bare 10% skal føre til den konklusjon at prøvene ikke er holdbare. Den røde, horisontale streken viser 90%-konfidensintervall for gjennomsnittet, som er ±t SEM. Antall prøver er valgt så stort at t SEM blir så lite at alarm om manglende holdbarhet akkurat ikke utløses. Men: 10% er tilfeldig valgt, SEM er ukjent og vi har lagt opp til at sannsynligheten for varsel om ikke-holdbarhet kan være 50%! 15

16 Antall prøver - en pragmatisk løsning Tidligere erfaringer tyder på at prøver fra 20 personer kan være et rimelig utgangspunkt Så får vi heller supplere med prøver fra flere personer hvis resultatene blir inkonklusive med bare 20 16

17 Hvordan vurdere resultatene Én mulig framgangsmåte er å plotte resultatene mot oppbevaringstid Rådata Standardiserte data 17

18 Plott rådata mot oppbevaringstid CK-MB i romtemperatur 18

19 Standardisér data Alle måleverdier for hvert oppbevaringstidsrom standardiseres i forhold til utgangsverdien i hver enkelt prøve: 100 (resultat t : resultat 0 ) % der resultat t er måleverdien etter oppbevaring i tiden t og resultat 0 er utgangsverdien 19

20 Plott standardiserte data mot tiden Akseptområder TSF TTF CK-MB i romtemperatur (TSF 16%, TTF 31%) 20

21 Vurdér i forhold til kriteriene Gjennomsnittets 90% konfidensintervall Konfidensintervallet ligger i akseptområdet: OK Konfidensintervallet krysser en grense: Tja Konfidensintervallet ligger utenfor akseptområdet: NOK Endringer i enkeltprøver Tell opp hvor mange som er i akseptområdet Hvis minst 95% er der: OK 21

22 Noen eksempler 22

23 S-Fritt beta-hcg i romtemperatur Rådata Standardiserte data, TSF 5%, TTF 10% 23

24 S-PAPP-A i romtemperatur Rådata Standardiserte data, TSF 5%, TTF 10% 24

25 S-Kobalamin i kjøleskap Rådata Standardiserte data, TSF 18%, TTF 30% 25

26 MCV i romtemperatur Rådata Standardiserte data, TSF 1,2%, TTF 2,3% 26

27 Oppfordring Skriv rapport og gjør resultatene kjent Planen Analyseresultatene Vurderingene Konklusjonen La andre få kjennskap til arbeidet Ta godt vare på analyseresultatene 27

28 Konklusjon Å fastsette kriterier for holdbarhet er det vanskelige Resten er bare arbeid 28