Forslag til opplegg for kontroll av blodkultur og ID-systemer

Transkript

1 Forslag til opplegg for kontroll av blodkultur og ID-systemer Fredrik Müller Mikrobiologisk institutt Rikshospitalet

2 Bestilling: Å presentere et lavterskel opplegg for bruk av kvalitetskontroller knyttet til blodkultur og kommersielle identifikasjonssystemer. Ikke vise hvordan det skal gjøres, men hvordan det kan gjøres

3 Disposisjon: 1. Blodkultur BD Bactec BioMerieux BacT/Alert 2. Automatisert mykobakteriediagnostikk BD BBL MGIT BioMerieux BacT/Alert 3. Kommersielle (biokjemiske) identifikasjonssystemer BBL Crystal API Vitek 2.

4 Del 1: Blodkultur Kvalitetskontroll: Produsenten: Instrument Kontrollert før installasjon Tibud om serviceavtale Medier Hver batch kontrollert og godkjent i henhold til Quality Assurance for Commercially Prepared Microbiological Culture Media, NCCLS M22-A2, 1996 Definert holdbarhet

5 Eksempel: Bactec Plus Aerobic/F medium: ph 7,2 +/- 0,2 Steriltest OK Undertrykk: trekker > 8 ml Tilfredsstillende vekst av: Alcaligenes faecalis ATCC 8750 Candida albicans ATCC Escherichia coli ATCC Haemophilus influenzae ATCC Neisseria meningitidis ATCC Pseudomonas aeruginosa ATCC Staphylococcus aureus ATCC Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 Streptococcus pyogenes ATCC Antimicrobial removal : Tilfredsstillende

6 Eksempel: BacT/ALERT FA medium: ph 7,4-7,7 Steriltest OK Tilfredsstillende vekst av: Candida albicans ATCC Enterococcus faecalis ATCC Escherichia coli ATCC Micrococcus luteus ATCC 4698 Neisseria meningitidis ATCC Pseudomonas aeruginosa ATCC Staphylococcus aureus ATCC Stenotrophomonas maltophilia ATCC Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 Streptococcus pyogenes ATCC 19615

7 Kvalitetskontroll: Laboratoriet noen momenter: Preanalytiske forhold Korrekt blodvolum veie flasker (stikkprøver/prosjekt)? Korrekt prøvetaking følge andel kontaminanter? Instrument Regelmessig forebyggende vedlikehold Serviceavtale Daglig temperaturkontroll Årlig kalibrering av termometer Medier Hva anbefaler produsent? Andre anbefalinger? Systemkontroll (kontroll av hele systemet ) Anbefalinger?

8 Kvalitetskontroll av medier i laboratoriet: Hva anbefaler produsent? Hva anbefaler andre?

9 Anbefaling fra BD (Bactec): It is recommended that each shipment of media be tested for performance through the use of a positive and a negative vial test. The positive vial should be inoculated with 1.0 ml of a 0,5 McFarland standard of either Eschericia coli or Staphylococcus aureus. The inoculated vial should be detected as positive by the instrument within 72 hours. The negative control vial should remain negative.

10 Anbefaling fra BioMerieux (BacT/Alert): If desired, individual laboratories can perform quality control testing of BacT/Alert culture bottles: One or more organisms from Certificate of Conformance Culture derived from h solid medium: 0.5 McFarland diluted stepwise in tryptic soy broth. 0.4 ml (1000 cfu/ml) to each bottle ml fresh anticoagulated blood Bottles with aerobic organisms positive within 48 h Bottles with anaerobic organisms positive within 72 h

11 SWEDAC (svensk akkrediteringsorgan): 1. Hver batch med flasker skal kontrolleres med en aerob og en anaerob bakterie. 2. Flasker skal inokuleres med ca 50 cfu/flaske

12 Systemkontroll: Kvalitetskontroll av hele blodkultursystemet Anbefalinger?

13 SWEDAC: 1. Systemkontroll skal utføres månedlig ved at flasker kontrolleres med minst en aerob og en anaerob bakterie. 2. Inokulat ikke definert.

14 Forslag til kvalitetskontroll av blodkultur 1. Preanalytiske forhold Korrekt prøvetaking? Vurdere forekomst av kontaminering av kulturer med mikrober fra hudfloraen. Årlig, hyppigere ved mistanke om problemer. Ideelt: kontaminering < 3% av kulturer som anlegges. (Strategimøte nr 16, 2002, Blodkultur, s. 44) NB Vurdering av kontaminering er ingen enkel oppgave! Tappes det korrekt blodvolum? Ved spesiell mistanke om avvik kan kontroll vurderes ved å veie flasker, stikkprøvebasert eller alle i et definert tidsrom.

15 Forslag til kvalitetskontroll av blodkultur 2. Instrument Regelmessig forebyggende vedlikehold Etter produsentens spesifikasjoner Serviceavtale Daglig temperaturkontroll Årlig kalibrering av termometer

16 Forslag til kvalitetskontroll av blodkultur 3. Medier og systemkontroll Kontroll av flasker ved mottak Skade? Blakket eller misfarget medium? Månedlig vekstkontroll (dekker batch- og systemkontroll) 400 cfu/flaske (alternativt 50 cfu/flaske) av minst en stamme fra kvalitetssertifikat ml blod. Krav om vekst innen 72 timer.

17 Del 2: Automatisert mykobakteriediagnostikk Kvalitetskontroll: Produsenten: Instrument Kontrollert før installasjon Tilbud om serviceavtale Medier Hver batch kontrollert og godkjent Definert holdbarhet

18 Eksempel: BD BBL MGIT medium: ph Steriltest OK Tilfredsstillende vekst av: M. tuberculosis ATCC M. Tuberculosis ATCC M. kansasii ATCC M. intracellulare ATCC M. fortuitum ATCC 6841

19 Eksempel: BacT/ALERT MP medium: ph 6,6-6,8 Steriltest OK Tilfredsstillende vekst av: Mycobacterium tuberculosis ATCC Mycobacterium intracellulare ATCC 13950

20 Kvalitetskontroll: Laboratoriet - noen momenter: Instrument Regelmessig forebyggende vedlikehold Serviceavtale Daglig temperaturkontroll Årlig kalibrering av termometer Medier Mottakskontroll Hva anbefaler produsent? Systemkontroll

21 Anbefaling fra BD (BBL MGIT) Testing of each batch: Species ATCC number Dilution of 0.5 McFarland* Time to positive (days) M. tuberculosis : M. kansasii : M. fortuitum : *: Prepare 0.5 McFarland suspensions in Middlebrook 7H9 broth

22 Anbefaling fra BioMerieux (BacT/Alert): If desired, individual laboratories can perform quality control testing of BacT/Alert culture bottles: One or more organisms from Certificate of Conformance MP bottles: Make stepwise dilutions in Middlebrook 7H9 broth from 0.5 McFarland. Inoculate bottle with 0.5 ml broth ( cfu/ml). Days to positive depend on organism.

23 Forslag til kvalitetskontroll av automatisert mykobakteriediagnostikk 1. Instrument Regelmessig forebyggende vedlikehold Etter produsentens spesifikasjoner Serviceavtale Daglig temperaturkontroll Årlig kalibrering av termometer

24 Forslag til kvalitetskontroll av automatisert mykobakteriediagnostikk 2. Medier og Systemkontroll Kontroll av flasker/rør ved mottak Skade? Blakket eller misfarget medium? Månedlig vekstkontroll (dekker batch- og systemkontroll) Inokulat etter produsents anbefaling. Minst en stamme fra kvalitetssertifikat. Tid til positivt utslag etter produsents retningslinjer. 3. Eksterne kontroller Sammenliknende laboratorieprøving (SLP); Ringtester

25 Del 3: Kommersielle identifikasjonssystemer Kort, brett eller kassett med biokjemiske substrater som inokuleres med suspensjon av mikroorganismer Inkubering i instrument eller i skap/rom Avlesning i instrument eller manuelt I. Inkubering og avlesning i instrument Vitek 2 II. Avlesning i frittstående instrument API mini reader BBL Crystal auto reader III. Manuell avlesning API BBL Crystal

26 I. Inkubering og avlesning i instrument (Vitek 2) Forslag til kvalitetskontroll: 1. Densitometer Månedlig kalibrering av densitometer 2. Instrument Regelmessig forebyggende vedlikehold Serviceavtale 3. Gjennomføring Kontrollskål fra inokulat renkultur?

27 I. Inkubering og avlesning i instrument (Vitek 2) Forslag til kvalitetskontroll, fortsatt: 4. Kontroll av kort og systemkontroll Kontroll av kort ved mottak Månedlig vekstkontroll (dekker batch- og systemkontroll) Hver type ID-kort testes med minst en stamme fra utvalg fra kvalitetssertifikat. 5. Eksterne kontroller Sammenliknende laboratorieprøving (SLP); Ringtester

28 II. Avlesning i frittstående instrument/iii.manuell avlesning Forslag til kvalitetskontroll: 1. Densitometer Månedlig kalibrering av densitometer 2. Inkubering Daglig temperaturkontroll (skap/rom..) Årlig kalibrering av termometer 3. Gjennomføring Kontrollskål fra inokulat renkultur? 4. Eventuell avleser Forebyggende vedlikehold og kontroll i henhold til produsentens anvisning

29 II. Avlesning i frittstående instrument/iii.manuell avlesning Forslag til kvalitetskontroll, fortsatt: 5. Kontroll av brett/kassetter Kontroll av brett/kassett ved mottak Kontroll av hver ny batch Brett/kassetter testes med minst en stamme fra utvalg fra kvalitetssertifikat. 6. Eksterne kontroller Sammenliknende laboratorieprøving (SLP); Ringtester

30 Takk for oppmerksomheten!