Tor E. Horsberg Norges veterinærhøgskole

Transkript

1 Lakselus: Behandling og resistens Tor E. Horsberg Norges veterinærhøgskole

2 Lakselus? Friis ca Lakseluus Strøm 1770

3 Kjemisk avlusning 1974: Formaldehyd 1976: Metrifonat (Neguvon) oralt! 1978: Metrifonat (bad) 1979: Diklorvos (Nuvan, Skottland) 1987: --- " --- (Norge) 1987: Ivermektin (Ireland) 1993: Hydrogenperoxid 1993: Pyrethrum top coating (Norge) bad (Canada) 1994: Azametifos (Salmosan) 1996: Cypermetrin (Excis) 1996: Diflubenzuron (Lepsidon, Releeze), teflubenzuron (Ektobann) 1998: Deltametrin (AlphaMax) 1999: High-cis cypermetrin (Betamax) 1999: Emamektin benzoat (Slice)

4 Pyretrioder Deltametrin (AlphaMax, Pharmaq) High-cis cypermetrin (Betamax, Novartis) Low-cis cypermetrin (Excis, Novartis) Mål: Nervesystemet (Natrium-kanaler) Badebehandlinger Kan brukes hele året (forsiktig ved temp. < 6 C) % effekt på mobile stadier ~85 % effekt på larvestadier (chalimus) Dreper parasitten Bra sikkerhetsmargin Sterk binding til partikler Hydrolyseres i vann

5 Avermektiner Ivermektin (Palmer & al. 1987) Dårlig sikkerhetsmargin Emamektin benzoat (Slice, Schering-Plough Animal Health) Mål: Nervesystemet (klorid-kanaler) Behandling via fôr Kan brukes gjennom hele året forutsatt tilstrekkelig fôropptak % effekt på alle stadier Varighet av effekt: Opp til 10 uker God sikkerhetsmargin Langsomt opptak, langsom utskillelse Bindes sterkt til partikler 14 days

6 Organofosfater Azametifos (Salmosan, Fish Vet Group) Mål: Nervesystemet (AChE) Badebehandling Utmerket for voksne Lepeophtheirus hunner OK for preadulte Ingen effekt på larvestadier...? nauplier og chalimusstadier har AChE-activity > 50 % av det preadulte og adulte lus har Walday&Fonnum % effekt på chalimus Jøssund 2009, pers. comm. Brukes med forsiktighet ved vanntemperaturer > 10 C, og bør unngås > 15 C Begrenset sikkerhetsmargin Liten binding til partikler Hydrolyseres raskt i vann

7 Kitinsyntesehemmere Diflubenzuron (Releeze, Ewos) Teflubenzuron (Ektobann, Skretting) Mål: Kitinsyntesen Behandling via fôr ~ 90 % effekt på chalimus- og preadulte stadier Ingen persisterende effekt Ingen effekt på voksne lus Minst 12 uker mellom behandlinger Bør ikke bruker i månedene juni - august Svært god sikkerhetsmargin Langsom nedbrytning i vann og sediment

8 Hydrogenperoxid Badebehandling fortrinnsvis i brønnbåt Begrenset sikkerhetsmargin 50 % løsning ekstremt etsende! Effektivt (> 90 %) mot preadulte og adulte Noe effekt mot chalimus Uklart hvor god drapseffekten er Bør ikke brukes ved vanntemperaturer > 13 C Hydrolyseres raskt i vann

9 Kombibehandlinger Azametifos etterfulgt av kitinhemmer H2O2 etterfulgt av kitinhemmer Azametifos og pyretroider samtidig Full dose av begge (fra Skottland) Lav dose azametifos etterfulgt av full dose pyretroider (patentsøknad fra Nettforsk Baard Johannessen) +

10 Statistikk, lakselusmidler Folkehelseinstituttet

11 1000 ton Behandlingsintensitet Salmonids treated for salmon lice Production of salmonids Data fra Folkehelseinstituttet og Statistisk sentralbyrå

12

13 SEARCH EU prosjekt Partnere 1. NVH, Oslo 2. National University of Ireland - Galway Irish Marine Institute, Galway 3. Rothamsted Research, UK 4. Marine Harvest Norway 5. Marine Harvest Scotland 6. University of Prince Edward Island, Canada

14 Resistens:... nedarvet egenskap hos en stamme av en organisme som gjør denne i stand til å overleve doser av et giftstoff som ville drept majoriteten av individer i en normal populasjon av samme arten. (WHO, 1957)

15 Resistens:... nedarvet egenskap hos en stamme av en organisme som gjør denne i stand til å overleve doser av et giftstoff som ville drept majoriteten av individer i en normal populasjon av samme arten. (WHO, 1957)

16 adult females Diagnose Behandlingseffekt Treatment efficacy, deltamethrin Lusetelling før og 14 dager etter behandling > 90 % effekt: vellykket (?) % 98 % 93 % 96 % 94 % J F M A M J J A S O N D J F M A avg. before treatment avg. after treatment Sensitivitetstester Bioassays Deteksjon av resistensfaktorer Biokjemiske assay Molekylærbiologiske assays

17 Bioassays

18 Bioassays er velegnet for å sammenlikne sensitivitet mellom stammer robuste og reproduserbare (lab. assays) uavhengige av resistensmekanismen EC50 sensitive EC50 resistant Bioassays er ikke velegnet til å oppdage resistens på et tidlig stadium (EC50) direkte overførbare til behandlingsdoser tilstrekkelig validerte for bruk under feltforhold

19 Grenseverdier EC 50 (µg/l; ppb) Sensitiv Nedsatt følsomhet Resistent Azametifos < > 40 Deltametrin < > 1 Cypermetrin < > 6 Emamektin < >400

20 EC50 EC50 (ppb) Sensitivitetstester fra ulike norske laboratorier deltamethrin (N=304) Deltamethrin

21 EC50 EC50 (ppb) cis-cypermethrin (N=103) Cypermethrin

22 EC50 EC50 (ppb) Emamectin benzoate (N=195) Emamectin

23 EC50 EC50 (ppb) Azamethiphos (N=84) azamethiphos

24 Ingen resistens oppdaget mot Hydrogenperoksid Kitinsyntesehemmere (enda )

25 Multiresistens Deltamethrin Emamectin Azamethiphos Measured Sensitive 0 Measured Sensitive 0 Measured Sensitive

26 Mål for nye feltassays Enkle (èn protokoll uansett middel) Arbeidsbesparende (20-30 parasitter pr. assay) Raske (24 timer) Robuste (samme svar for samme stamme hver gang) Fleksible (uavhengig av utviklingsstadium)

27 azametifos emamektin cypermetrin deltametrin Tentativ protokoll

28 Resistensutvikling Behandling Reproduksjon Behandling Reproduksjon

29 Best case scenario Behandling Reproduksjon Behandling Reproduksjon

30 Worst case scenario Behandling Reproduksjon Behandling Reproduksjon

31 Nov 2008 Area with sensitive lice Area with reduced sensitivity (1 or more) Area with resistance to one drug Area with multi-resistance Not tested Marine Harvest

32 Nov 2009 Area with sensitive lice Area with reduced sensitivity (1 or more) Area with resistance to one drug Area with multi-resistance Not tested Marine Harvest

33 Andre diagnostiske tilnærminger In vitro diagnostikk Avhengig av kunnskap om virkningsmekanisme Mekanismer Økt detoksifisering Mutasjoner som gir nedsatt binding av midlet til målproteinet Nedsatt akkumulering

34 EC50 (24h), cypermethrin Lakselusresistens i Europa Organofosfater Massive resistensproblemer i Norge, skottland og Irland på tallet. Mekanisme: Organofosfatresistent AChE Pyretroider Sporadiske tilfeller i Norge, Skottland og Irland siden 1998 Alvorlige resistenstilfeller siden 2007 Mekanismer: Økt detoksifiseringsevne Pyretroidresistent Na + - kanal sealice strain EC50 EC50, prebeh. PBO

35 Emamektin benzoat Sporadiske tilfeller med behandlingssvikt i Irland, Skottland og Norge Sannsynligvis behandlingsfeil 2006 Resistens verifisert i Irland (og Skottland?) Emamektin tatt ut av bruk i to år i Irland 2007 Sterke holdepunkter for resistens i ett distrikt i Norge 2008 Resistens påvist i to distrikt i Norge Resistensproblemene ser ut til å spre seg 2009 Resistens verifisert i en rekke områder opp til Lofoten Ukjent mekanisme (foreløpig )

36 Hva nå? Kort sikt Reintroduksjon av gamle medikamenter organofosfater kitinsyntesehemmere hydrogenperoksid kombinasjonsbehandlinger Optimalisering av behandlingsmetoder Fôrtilsetninger som øker slimproduksjonen Ikke-kjemiske metoder f.eks. leppefisk Systematisk effektmonitorering Medium lang sikt Synkronisering av produksjonen i større områder Nye produksjonsmetoder Nye behandlinger Lang sikt Vaksine Lakselusresistent laks Synkronisering av behandlingstidspunkt Øverlie, unpublished

37 Resistensforebygging i en ideell verden Minimal bruk av kjemiske midler Leppefisk Synkronisert produksjon og brakklegging Branngater Oppvelling av vann Funksjonelt fôr Rotasjon av behandlinger Ulike virkningsmekanismer Korrekt avlusning Riktig dose Tilstrekkelig eksponeringstid Optimal fordeling av medisinert fôr til fisken Oppfølging Regionale strategier Vinteraksjoner Koordinering sommerstid Monitorering APR MAI JUN JUL AUG SEP OKT NOV DES JAN FEB MAR APR MAI JUN JUL AUG SEP OKT NOV DES Kitinsyntese hemmere Emamektin Pyretroider Azametifos H2O2 Kitinsyntesehemmere Pyretroider Azametifos UTSLAKTING Photo: John Burka

38 Unngå å drepe den siste følsomme lakselusa... x Den bør i stedet fredes!

39