Slimceller i laksehud er signifikant påvirket av diett og har et dynamisk utviklingsmønster

Transkript

1 Slimceller i laksehud er signifikant påvirket av diett og har et dynamisk utviklingsmønster Karin Pittman, Stine Karlson, Amanda Pittman, Teresa Ciepinska, Kirsten Redmond, Øystein Espeland, Philippe Sourd, John Sweetman, Elizabeth Sweetman & Bjarne Ravnøy

2 Formål: -Måle slimcellestørrelse og -tetthet hos laks -Er disse påvirket av diett, størrelse, kjønn, familie osv? Bakgrunn Metode Resultater

3 Frisk laks: Slim og huden er primærforsvar Lusen angriper hud

4 Tidligere studier av laksehud vs lusens festested Bare 4 studier på sjøvannsfasen? = smolt = ferskvannstadiet = ferskvann, electron microskopi

5 Source Species Section location Stain Thickness Units of report Buchmann & Bresciani (1998) Oncorhynchus mykiss (Freshwater stage) Varied Alcian Blue? Number per mm2 Fast et al. (2002a) Oncorhynchus mykiss Salmo salar Oncorhynchus kisutch Mid body Hematoxylin & Eosin 5 µm Number per 100 µm length Width of largest Harris & Hunt (1975a&b) Salmo salar Salmo trutta Varied Lead citrate Uranyl acetate Å Size (µ) Did not report density. Toluidine blue O Byrne-Ring et al. (2003) Salmo salar Shoulder flank Periodic acid- Schiff/alcian blue 1-2 µ 5 µm Number per mm2 Fast et al. (2002b) Oncorhynchus mykiss Salmo salar Oncorhynchus kisutch Mid body Hematoxylin & Eosin 5 µm Number per 100 µm length Roberts & Powell (2003) Salmo salar Gills Periodic acid- Schiff/alcian blue 5 µm Number per interlamellar unit Roberts et al. (1970) Salmo salar Salmo trutta Varied in head region Multiple stains (LM) 8 µm Observations Reynolds citrate stain (EM) 600 Å Van der Marel et al. (2010) Cyprinus carpio Varied Periodic acid- Schiff/alcian blue 4 µm Number of goblet cells per sample

6 Relevant prøvetaking på laks i oppdrett Hode dorsal ventral hale dorsal halerot Grundig utprøving av Analysemetoden

7 Slimceller flytter seg gjennom epidermis Epidermis folder rundt skjell Tradisjonelle snitt gir ikke pålitelige data Salmonids: Fast et al. 2002, Dis. Aquat. Org. 52:57-68 Salmon: Horne, M.M. & Sims, D.E Bull. Aquacul. Assoc. Canada 98-2: 85

8

9 Eksempel på snitt Kontroll Aquate SPMP skjell slimceller rosa neutral muciner blå syre muciner pigment

10 Unbiased stereologiske målinger areal tetthet Cell size nucleator in counting frame Mean volume of a particle Systematic uniform random selection Schmitz & Hof

11

12 Første publis

13 Kroppsted og prøvebehandling gir signifikante forskjeller på slimcellemåling Størrelse er følsom for sted og behandling Tetthet er et robust mål innenfor område 16 behandlingskombinasjoner 1 fisk (Pittman et al., subm.)

14 Signifikant større slimceller på dorsal siden (p<0.01) 170 Mean Mean±0,95 Conf. Interval Slimcellestørrelse ( μm2 ) H S V kroppsdel D n=4 fisk 52 cm SL Pittman et al. in prep

15 Signifikant tettere slimceller på dorsal siden (p<0.05) 0,090 Mean Mean±0,95 Conf. Interval 0,085 0,080 tetthet 0,075 0,070 0,065 0,060 0,055 0,050 0,045 H S V kroppsdel n=4 fisk D 52 cm SL Pittman et al., in prep

16 Trend til forskjell grunnet diett og kjønn (n=2 fisk for hvert punkt) 180 diet 1 diet SLIMCELLSTØRRELSE SLIMCELLESTØRRELSE 190 Sex: M Sex: F H S V H D V D Kroppsdel Kroppsdel 0,11 0,11 diet 1 diet 2 0,10 0,09 0,09 0,08 0,08 0,07 0,06 0,05 Sex: M Sex: F 0,10 TETTHET TETTHET S 0,07 0,06 0,05 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 H S Kroppsdel V D H S V D Kroppsdel Pittman et al. in prep

17 Slimcelle-størrelse og tetthet PÅ DORSALSIDE endres over tid og pga diett 0,30 0,25 TETTHET 0,20 0,15 0,10 0, SLIMCELLESTØRRELSE (µm2) Treatment: Aquate Treatment: Control 0, DAG Endret diett 80 Treatment: Aquate Treatment: Control DAG N=70 fisk 2 dietter, 4 merd 7 måneder Pittman et al., in prep

18 Slimcellestørrelsen øker utover året, påvirket av diett 14% Date Date Date Date Date Date Date 9% 220 7% 200 SNITT SLIMCELLESTØRRELSE Percent Observasjoner 11% and Treatment: Aquate Date 1 and Treatment: Control Date 1 and Treatment: Aquate Date 2 and Treatment: Control Date 2 and Treatment: Aquate Date 3 and Treatment: Control Date 3 and Treatment: Aquate Date 4 5% 2% Treatment: Aquate Mean nucleator = -10, ,0252*x Treatment: Control Mean nucleator = -45, ,8075*x ,6 0% AQ UATE CONTROL 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 700Kondisjonsfaktor 800 Slimcellestørrelse (µm2) N=70 fisk 7 måneder Pittman et al. (in prep) 1,5

19 Slimceller øker med økende fiskestørrelse Slimcelle størrelse på dorsal side er best korrelert med lengde (>0.8) SLIMCELLSTØRRELSE (µm2 ) LENGDE (cm) 0,40 Slimcelle tetthet på dorsal side er best korrelert med vekt (>0.75) 0,35 TETTHET 0,30 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 0 Sulefisk, n = 70 fisk, mars-november Pittman et al., in prep VEKT (g)

20 Forskjell mellom hann og hunn viser signifikant interaksjon mellom kjønn og familie 0, , Slimcelle tetthet Slimcelle størrelse um2 Sex: M Sex: F Sex: M Sex: F ,1 2 0,1 0 0,0 8 0,0 6 0, , Familie 1 2 Familie Averøy N=29 (Pittman et al., in prep) cm SL

21 Konklusjoner Slimceller er størst og tettest midt på laksekroppen Slimceller øker med økende kroppslengde og vekt Slimceller er påvirket av diett Signifikant interaksjon mellom familien og kjønn på både slimcellestørrelse og tetthet (betydning for tolkning av anti-lusbehandling? Avl?) Flere resultater under bearbeiding Styring av kroppsdelens slimutvikling? Innhold i slimcellene?

22 Studiene er næringsfinansierte

23 Takk til: Gildeskål Forskningstasjon AS Stanko Skugor, NOFIMA Ingrid Uglenes Fiksdal, IMR